siRNA敲减雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因抑制增殖性玻璃体视网膜病变的实验研究

【摘要】： 目的:研究使用雷帕霉素靶蛋白(mTOR)特异siRNA敲减mTOR基因对增殖性玻璃体视网膜病变的影响。 方法:将三对化学合成的siRNA分别转染入D407人RPE细胞株,检测其对细胞的增殖、黏附、伸展、迁移的影响;使用实时定量PCR检测其对胶原mRNA的影响;使用酶联免疫吸附实验(ELISA)和细胞免疫组织化学法检测其对细胞外、内I、III、IV型胶原分泌的影响。使用人RPE细胞注入兔眼玻璃体腔制作PVR模型,同时将1对化学修饰的siRNA注射入兔眼玻璃体腔,检测其对体内胶原表达及PVR病变的影响。 结果:使用siRNA将mTOR基因敲减82%可以显著降低细胞的伸展、迁移、胶原mRNA含量、细胞外和细胞内I、III、IV型胶原蛋白分泌。化学修饰的siRNA能抑制体内胶原蛋白的分泌,能将PVR实验眼视网膜脱离的发生率由100%(阴性对照组)降至50%。 结论:mTOR特异siRNA能抑制RPE细胞的伸展和迁移,抑制人RPE细胞I型、III型、IV型胶原的分泌,能抑制兔眼内PVR病变总的胶原分泌,抑制兔实验PVR的病变发展。mTOR特异siRNA为治疗PVR提供了一种新思路。