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《北京交通大学》 2011年
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PLGA纳米微球的制备及其作为基因药物递送载体的研究

李丹丹  
【摘要】:聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA)具有良好的生物相容性、安全性和靶向性修饰等优点,制备成纳米微球后,随着其在体内的逐渐降解,可以释放出其中包载的药物,实现缓慢释药,达到长效给药的目的,是一种良好的药物递送载体。白喉毒素(diphtheria toxin, DT)及其突变体(DT389)对多种肿瘤细胞具有杀伤作用,可以用于治疗肿瘤。微球制备过程中的诸多因素对微球的性质有显著影响,从而进一步影响微球中药物的释放特性。本课题旨在研究PLGA纳米微球的制备工艺对微球药物释放行为的影响以及该纳米微球在肿瘤基因治疗中应用的可能。 本论文通过W/O/W乳化溶剂挥发法制备PLGA纳米微球,改变微球的制备参数,包括PLGA组成的单体比例、浓度以及超声时间来制备包载DNA的纳米微球。观察微球表面形态,测定微球包封率及体外释放特性,考察微球对所包载的DNA的酶切保护作用。为进一步探讨PLGA作为基因药物递送载体的应用,MTT法检测空白纳米微球对人脑胶质瘤细胞U251、人胚肾细胞HEK293及人肝癌细胞HepG2的毒性。在以上实验的基础上,构建了pcDNA3.1(-)/DT389质粒,体外检测不同制备条件的PLGA/DT389纳米微球对人脑胶质瘤细胞U251及人肝癌细胞HepG2的作用。 扫描电镜图片显示出通过乳化溶剂挥发法制备的微球形态完整,表面光滑无破损。微球包封率随超声时间的延长和PLGA浓度的增加而增加,PLGA单体比例的改变对微球包封率没有影响。体外释放曲线结果表明,微球突释现象随超声时间的延长、PLGA浓度的增加以及PLGA亲水性的降低而降低,各种微球均能够在21d内持续释放其中包载的DNA。酶切保护实验结果表明PLGA纳米微球能够有效保护DNA,免遭核酸酶的降解。 为了测定PLGA微球的细胞毒性及其作为基因药物递送载体的性能,我们选取了三种细胞系,进行了MTT检测。MTT实验结果表明,空白PLGA纳米微球对人脑胶质瘤细胞U251、人胚肾细胞HEK293及人肝癌细胞HepG2均无毒。在体外实验中,随着PLGA/DT389纳米微球作用时间的延长和微球中包载质粒浓度的增加,U251细胞和HepG2细胞的存活率呈现下降趋势,具有时间和剂量依赖性,而且释放速率快的微球比释放速率慢的微球抑瘤作用更为显著,表明PLGA/DT389纳米微球对肿瘤细胞具有杀伤作用,其抑瘤活性与DT389从微球内的释放速率直接相关。
【学位授予单位】:北京交通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R318.08

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 黄苏萍;朱军;孙虹;周科朝;;无机纳米基因载体的研究进展[J];材料导报;2010年15期
2 李文,张瑞林,王力红,王光辉;阳离子脂质体介导体内基因转染对脏器及血生化影响[J];华西医学;2005年03期
3 邹伟伟;张娜;;聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒作为非病毒基因载体[J];生命的化学;2009年01期
4 王刚;潘丽;张永光;;PLGA纳米/微球作为核酸载体的研究进展[J];微生物学通报;2009年12期
5 白荣;;乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球的制备工艺与生物学性能[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年34期
6 张旭辉;孙永海;张宏;;聚乳酸-羟基乙酸共聚物吗啡微球的制备及其镇痛作用[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年38期
7 杨菁;宋存先;李拥军;管珩;李大勇;;纳米粒子作为基因载体在不同动物模型上的基因转染效果[J];中国医学科学院学报;2006年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 钟英强;魏菁;傅玉如;邵静;梁倚文;林燕华;刘娟;朱兆华;;阳离子脂质体Lipofectamine2000对人胰腺癌Capan-2细胞的毒性作用[J];南方医科大学学报;2008年11期
2 涂心明;郭绍芳;胡伊乐;;MPEG-PLGA纳米胶囊在真核质粒转染细胞中的应用[J];河南科技大学学报(医学版);2012年03期
3 张清;;生物可降解聚合物作为非病毒基因载体的研究进展[J];食品与药品;2009年11期
4 李洪英;邹伟伟;刘春喜;张娜;;阳离子PLGA载基因纳米粒的初步研究[J];中国生化药物杂志;2009年02期
5 曹建军;李源;程龙;张凯伦;;装载肝素PLGA纳米粒的制备及体外细胞相容性研究[J];华中科技大学学报(医学版);2012年05期
6 李燕;阳俊;刘桂英;张欣;;基因治疗药物输递系统的研究现状及发展趋势[J];生物化学与生物物理进展;2013年10期
7 范海波;张海;李莹;张园;唐建熹;陈俊汇;李本义;;超声对纳米多聚体靶向释放DNA影响的实验性研究[J];中国生化药物杂志;2014年01期
8 张建华;高秉仁;李斌;杨永珠;王成;苟云久;王志强;陈文胜;;纳米基因载体的研究进展[J];微创医学;2007年02期
9 房立峰;;局部麻醉缓释药物的制备及镇痛作用[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年16期
10 吴慧昊;;乳酸及其衍生物国内外发展现状及应用研究[J];西北民族大学学报(自然科学版);2010年02期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 胡三元;载恩度PEG-PLGA纳米粒的制备及对结肠癌的治疗作用研究[D];中南大学;2011年
2 王瑞华;纳米粒介导人arresten基因转染对兔移植静脉内膜增生的抑制作用[D];山东大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐慧芳;影响羟基磷灰石纳米颗粒DNA转染率因素的研究[D];中南大学;2011年
2 赖超凤;嗜热厌氧杆菌产乳酸的代谢调控研究[D];华南理工大学;2011年
3 林丽;介孔氧化硅纳米材料进行基因转染的体外研究[D];哈尔滨工业大学;2011年
4 吕艳秋;Egr-1反义寡核苷酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用[D];汕头大学;2006年
5 邹伟伟;生物可降解型载基因纳米粒的研究[D];山东大学;2009年
6 陈建民;新城疫纳米乳疫苗的研制[D];西北农林科技大学;2010年
7 金玺圆;PLGA微球的制备及其作为肿瘤药物递送载体的研究[D];北京交通大学;2012年
8 杨东强;葡聚糖微球介入栓塞治疗兔VX2肝移植瘤的研究[D];河北医科大学;2013年
9 李红;介孔氧化硅纳米材料控制siRNA释放性能的初步研究[D];哈尔滨工业大学;2013年
10 石拯拯;利福平海藻酸钠微球栓塞剂肝脏局部组织代谢实验研究[D];河北北方学院;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘俊,刘选明,肖苏尧,童春意,唐冬英,赵李剑;基于超声波下淀粉纳米颗粒作载体的基因转导[J];高等学校化学学报;2005年04期
2 蔡晴,贝建中,王身国,王常勇,范明,刘爽,赵强;乙交酯/丙交酯共聚物的体内外降解行为及生物相容性研究[J];功能高分子学报;2000年03期
3 杜兵,程祥荣;聚乳酸及其共聚物微球的性质及应用[J];国外医学.生物医学工程分册;2002年05期
4 蒋明;张永全;贺广湘;孙虹;;羟基磷灰石纳米颗粒介导NT-3基因对豚鼠兴奋毒性损伤耳蜗的保护作用[J];中南大学学报(医学版);2007年04期
5 温玉明,李文,王昌美,李龙江,杨湛,陈亚多;nm23-h1基因导入对腺样囊性癌分化的影响[J];临床口腔医学杂志;2001年03期
6 武玉敏,李大伟;溶剂蒸发法在微球制备中的应用[J];食品与药品;2005年03期
7 刘丽萍,肖雁冰,肖子文,王智彪,李崇雁,龚晓波;家兔静脉注射羟基磷灰石纳米粒子的反应研究[J];卫生研究;2005年04期
8 叶美娣,郑彩虹;乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球控释系统的突释[J];中国现代应用药学;2005年05期
9 张桂锋;马喜锋;张桂平;;聚乳酸及其共聚物在药物缓释体系中的研究及应用[J];医疗保健器具;2007年09期
10 曹婷颖;顾月清;高向东;;聚乳酸载药微球的制备和给药方法[J];药学进展;2006年10期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王艳华,李曦光;PLA、PGA及其共聚物支架在组织工程中的研究应用[J];锦州医学院学报;2004年03期
2 钟延强,周永刚,张国庆,傅强,王彬,龚纯贵,鲁莹,高申;局部麻醉用缓释盐酸布比卡因PLGA微球的制备及特性研究[J];第二军医大学学报;2004年08期
3 李乾兵,王国平,颜辉,周书林,陈文魁;粉尘螨(抗原)PLGA微球对致敏小鼠肺部变应性炎症的影响[J];皖南医学院学报;2004年03期
4 曹颖光,王戎,王华均,吴慧华,胡立桉;骨髓间充质干细胞与PLGA体外附着的实验研究[J];临床口腔医学杂志;2005年04期
5 钱良山;王小鹏;陈天宁;;聚乳酸-羟基乙酸药物控释微型装置的制备[J];中国医药工业杂志;2006年05期
6 邱利焱;聚膦腈共混膜在动物体内的降解和组织相容性[J];生物医学工程学杂志;2002年02期
7 田建广,白东海,刘志国,唐洪泰,夏照帆;聚乳酸-羟基乙酸胶原膜生物相容性的实验研究[J];中华烧伤杂志;2003年S1期
8 徐公平;姬烨;闫景龙;张东旭;;生长因子PLGA微包囊成形参数的实验研究[J];现代生物医学进展;2007年08期
9 葛建华;吕宇鹏;周伟岗;马晓兵;;PLGA组织工程支架材料在生理盐水中的降解性能[J];材料科学与工程学报;2009年02期
10 段宏,沈彬,何勤,裴福兴,陈坚;缓释bFGF-PLGA微球制备及其体外释药性质和生物活性的研究[J];中国药学杂志;2004年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李艳辉;崔媛;张慧敏;关秀文;;利用等离子体技术在PLGA表面固定胶原的研究[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
2 ;PLGA nanoparticle encapsulated paclitaxol for sustained release and its anticancer effect for HeLa cells in vitro[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年
3 吴飞;;Sustained-release Delivery of GM-CSF from PLGA Microspheres Prepared via Aqueous-aqueous Emulsification[A];生物颗粒与粉体制备、应用技术研讨会论文集[C];2010年
4 杨安树;杨林;刘卫;李卓娅;杨祥良;;PEG-PLGA纳米粒长循环机制及载TNF-α拮抗肽性能研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
5 仲琦;刘建国;张弢;;电化学阻抗谱方法对聚合物化学降解的实时原位表征[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
6 贾帅军;孟国林;刘建;刘利;熊卓;张人佶;;PLGA/TCP/胶原/BMSCs复合物修复兔膝关节骨-软骨联合缺损的研究[A];第十九届中国康协肢残康复学术年会论文选集[C];2010年
7 郑爱萍;曹德英;毕芸祺;崔旭;张晓燕;孙建绪;;壳聚糖修饰的载胰岛素PLGA纳米粒的生物粘附性及毒性评价[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
8 叶鸣;王志刚;李兴升;李巧;牛诚诚;骆杰;;包载经PEG修饰的重组腺病毒PLGA超声造影剂的制备及特性研究[A];第十届全国超声心动图学术会议论文[C];2010年
9 隋刚;王兢;杨小平;;PLGA载药纤维的制备及释药行为研究[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
10 杜宝玲;曾园山;;明胶海绵圆柱体支架与PLGA圆柱体支架移植对大鼠脊髓组织影响的比较研究[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 庄愉;多层片释药系统研究进展[N];中国医药报;2002年
2 陈庆华;医药用生物降解聚合物应用进展[N];中国医药报;2003年
3 敬松;缓释及控释注射剂研究进展[N];中国医药报;2004年
4 ;研发者目光聚焦“长效”[N];医药经济报;2004年
5 李博;“人造红细胞”[N];大众卫生报;2009年
6 吕工;可生物降解载体材料应用研究[N];中国医药报;2001年
7 胡剑 徐坤元;软包装行业大有可为[N];中国包装报;2003年
8 重庆 秦晓飞;封装方式大检阅[N];电脑报;2005年
9 朱奎;烧伤病人有了永久“人造皮肤”[N];健康报;2003年
10 记者 张巍巍;英干细胞治疗中风取得新进展[N];科技日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 戴文达;新型结构PLGA/胶原三维可降解复合材料用于软骨再生的效果研究[D];复旦大学;2010年
2 韩瑞玲;鱼精蛋白包覆PLGA纳米粒用于疫苗载体的初步研究[D];华中科技大学;2010年
3 刘福娟;聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA)仿生细胞外基质的制备、表征及其与蛋白界面交互作用的研究[D];东华大学;2010年
4 于凤宾;应用复合PLGA纳米纤维膜构建人工硬脊膜修复羊硬脊膜缺损的实验研究[D];第二军医大学;2013年
5 徐洋;表面改性的纳米羟基磷灰石/PLGA复合材料的制备及成骨活性实验研究[D];吉林大学;2010年
6 李丹;PLGA/羟基磷灰石复合支架的制备及其用于骨修复的研究[D];浙江大学;2011年
7 孟昭旭;电纺PLGA/明胶组织工程支架和药物载体的制备与性能研究[D];哈尔滨工程大学;2011年
8 刘毅;纳米银颗粒和PLGA共涂层的不锈钢合金在抗菌和骨诱导方面的作用研究[D];山东大学;2013年
9 王明新;MSCs附和PLGA电纺支架修复兔跟腱损伤的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
10 董静文;PLGA载姜黄素纳米粒对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用及机制探究[D];中南大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 季培红;PLGA-PLGA/BG微球双层修复支架材料的研究[D];华南理工大学;2010年
2 常丽云;堆型艾美耳球虫3-1E重组质粒PLGA微球包被技术研究[D];河北农业大学;2011年
3 许尧祥;复合壳聚糖微球PLGA支架的制备及其对蛋白缓释作用的实验研究[D];青岛大学;2010年
4 于玮洁;聚乳酸—羟基乙酸(PLGA)网作为组织工程真皮替代物骨架的研究[D];浙江大学;2010年
5 李忠义;PLGA-HA复合支架与异体骨体外细胞相容性的对比实验研究[D];中国医科大学;2010年
6 谭羽莹;利用表面改性纳米羟基磷灰石/PLGA材料构建组织工程化骨的实验研究[D];吉林大学;2011年
7 张基昌;新型冠脉可降解支架材料PLGA,PLGA-PEG与兔血管平滑肌细胞相容性的研究[D];吉林大学;2004年
8 李丹丹;PLGA纳米微球的制备及其作为基因药物递送载体的研究[D];北京交通大学;2011年
9 高飞艳;生物可降解微球PLGA疫苗运输载体研究[D];兰州大学;2011年
10 林海淋;GFP基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞复合PLGA的形态学观察[D];福建医科大学;2010年
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