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七种脂肪酸标准物质的制备及人体血液中脂肪酸含量的测定

许倩  
【摘要】:脂肪酸在生命历程中是一个非常重要的角色。脂肪酸可以直接调节细胞膜的组成及蛋白质与膜内受体,对人体健康有重要影响。虽然游离脂肪酸只占生命体中所有脂肪酸的一小部分,但他们最为积极的代谢脂质,并通过氧化释放大量的能量供生命体所使用。越来越多的研究表明,许多疾病与游离脂肪酸的浓度变化有密切关系,一些重要的游离脂肪酸(如棕榈油酸等不饱和脂肪酸)含量的异常变化是病情发展的重要依据。因此准确测定人体血液中的脂肪酸组分的含量具有重要的科学意义。 脂肪酸纯度标准物质在脂肪酸的分析检测中具有重要的地位,它是数据可比,可溯源的关键因素之一。高纯度脂肪酸的制备具有较高的技术含量,目前含量在95%以上的制备技术完全被国外公司所垄断,高纯度脂肪酸的制备具有很强的创新性。本文首先采用重结晶的方法成功制得7种脂肪酸标准物质:十三烷酸(C13:0),十四烷酸(C14:0),十七烷酸(C17:0),硬脂酸(C18:0),反式油酸(C18:1),二十烷酸(C20:0)和二十二烷酸(C22:0),研究了其制备及提纯工艺条件,并用红外光谱(FT-IR)仪,气相色谱质谱联用(GC-MS)仪,核磁共振(NMR)仪对其结构进行了表征,利用电位滴定、气相色谱和灼烧残渣实验方法对所得脂肪酸标准物质精确定值。 本文同时建立了一种快速,准确的样品提取方法,无需衍生化,快速提取样品采用高效液相色谱-质谱联用技术对样品进行分析,测定人体血液中游离脂肪酸含量。并对冠心病病人血液中脂肪酸的含量进行检测,与正常人血液的脂肪酸含量做出对比,找出存在的差异,为此类疾病的预防和诊断及治疗提供重要的作用。 实验结果表明:本文成功制的了七种脂肪酸标准物质,其含量都在99%以上,性质及结构都与脂肪酸标准物质相符合。并对样品提取方法及实验条件的进行了优化,建立了一种快速、准确的定量方法。本方法采用Dole提取法,提取样品直接用HPLC-MS进行分析,无需衍生化,根据脂肪酸标准物质成功定量了人血液中游离脂肪酸含量。并将正常人与冠心病人血液中游离脂肪酸含量作对比,发现正常人与病人的脂肪酸含量确有不同。


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