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《中国农业大学》 2003年
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家蝇对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性机制研究

刘婷  
【摘要】: 本文用敌敌畏选育了家蝇的抗性品系,对抗性和敏感品系家蝇中的乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarE)的生物化学、毒理学性质进行了研究。 结果表明,用DDVP对家蝇进行抗性选育,共选育了42代,选育初期(F_0~F_(13)代)抗性水平停滞不前,LD_(50)在0.013左右徘徊。从F_(14)代抗性开始有所上升,F_(22)代以后抗性上升明显,至F_(42)代抗性达到18.06倍。DDVP抗性家蝇AChE的活性与抗性无明显的相关性,CarE的活性均比敏感品系高,但不是明显的线性关系。从抗性家蝇和敏感家蝇对溴氰菊酯的毒力测定结果看,抗性家蝇对溴氰菊酯的LD_(50)值为敏感家蝇的1.24倍,说明DDVP抗性家蝇并没有对溴氰菊酯产生交互抗性。 酶液浓度、反应时间和温度与AChE活性的关系研究表明,酶液浓度的增加与酶活性的增加并不是线性关系,当底物浓度一定时,酶液浓度达到一定数值,酶活性会趋于稳定状态,不再增加;AChE和底物的反应在最初的15min之内,时间和酶活性是明显的直线关系;当温度在30℃以下时,AChE活性和温度呈直线关系。所以,AChE和底物的最适反应条件为:酶液浓度2.5头/ml,时间15min,反应温度30℃。 AChE动力学研究表明,抗性家蝇AChE的K_m值是敏感品系的2.35倍,对底物的亲和力减小。敏感品系家蝇AChE对DDVP、毒扁豆碱、氧化乐果、灭多威和残杀威的双分子速率常数分别是抗性品系的26.51、7.80、7.70、12.54和22.48倍,抗性品系对这几种抑制剂的敏感度都有所下降,其中对DDVP和残杀威敏感度降低最多。 不同浓度的DDVP、毒扁豆碱和残杀威对家蝇AChE的抑制作用表明,随着DDVP和残杀威浓度升高,AChE的残存活性降低较多,抗性家蝇AChE的残存活性高于敏感家蝇,而随着毒扁豆碱浓度的增加,AChE残存活性降低较少,并且当毒扁豆碱浓度很低时,在一定范围内,敏感家蝇AChE的残存活性高于抗性家蝇。 明确了不同抑制剂对AChE抑制作用的时间效应不同。DDVP和毒扁豆碱抑制40min,抗性家蝇AChE活性的减小幅度明显大于敏感家蝇,而残杀威对敏感和抗性品系的抑制,差异不大。但是,残杀威对AChE的抑制,主要集中在反应最初的5min之内,而后抑制作用不明显,DDVP和毒扁豆碱则没有这种现象。 从CarE酶浓度、时间和温度反应进程曲线可以看出,底物与CarE反应的最适酶浓度为5头/ml,最适温度为30℃,反应时间为15min。
【学位授予单位】:中国农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S481.4

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