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《中国农业大学》 2003年
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阿维菌素在鲟鱼体内生物富集与生物消除规律的研究

张启迪  
【摘要】: 正文:阿维菌素类药物(avermectins,AVMs)属大环内酯类抗生素,由于其优异的驱虫活性和较高的安全性,被视为目前最为优良、应用最广泛的兽用驱虫药。本文对阿维菌素(Avermectin,AVM)环境毒理的一部分内容进行试验研究,主体试验部分为研究进入到淡水中的阿维菌素在鲟鱼体内的生物富集和生物消除规律。 建立了阿维菌素在淡水中含量的高效液相色谱荧光检测法。用乙酸乙酯作为提取溶剂,过无水Na_2SO_4柱除去残余水分,减压浓缩至干,用1-甲基咪唑和三氟乙酸酐进行荧光衍生化,经水解后用高效液相色谱(HPLC)检测。色谱条件:色谱柱:ODS C_(18)反相色谱柱,流动相:甲醇-水(98/2,v/v),流速1.0mL·min~(-1),激发波长365nm,发射波长475am,进样量:100μL。本方法的检测限为0.01ng·mL~(-1),平均回收率范围在80.5%~89.1%之间,日内变异系数范围在4.0%~5.1%之间,日间变异系数范围在4.7%~10.1%之间。 建立了阿维菌素在鲟鱼肌肉中残留的高效液相色谱荧光检测法。采用乙腈作为肌肉中蛋白沉淀剂和阿维菌素的提取剂,经碱性氧化铝SPE柱纯化,蒸干和衍生化,用高效液相色谱(HPLC)检测。色谱条件:色谱柱:ODS C_(18)反相色谱柱,流动相:甲醇-水(97/3,v/v),流速1.0mL·min~(-1),激发波长365nm,发射波长475nm,进样量:100μL。本方法的检测限为0.2ng·g~(-1),平均回收率范围在87.4%~93.9%之间,日内变异系数范围在3.5%~5.3%之间,日间变异系数范围在4.8%~8.7%之间。 在国内外首次研究了阿维菌素在鲟鱼体内的生物富集和生物消除规律。鲟鱼对AVM B_(1a)(阿维菌素B_(1a)组分)摄取比较迅速,大约于14-18天达到稳态富集浓度。AVM B_(1a)在鲟鱼体内的残留消除比较迅速,大约经过4-6天的消除期,体内残留量大约消除50%;经过14-18天的消除期,体内残留量消除超过95%。对于低剂量组,AVM B_(1a)在鲟鱼肌肉中的生物富集系数(BCF)、半衰期(t_(2/1))、吸收速率常数(k_1)及消除速率常数(k_2)分别为42、4.95 days、5.91 days~(-1)和0.14 days~(-1);对于高剂量组,AVM B_(1a)在鲟鱼肌肉中的生物富集系数(BCF)、半衰期(t_(2/1))、吸收速率常数(k_1)及消除速率常数(k_2)分别为41、4.33 days~(-1)、6.53 days~(-1)和0.16 days~(-1)。 由于AVM B_(1a)分子量很大(872),以及分子体积很大(1.70×1.87×1.84nm),大的分子量和分子体积,产生了很大的立体屏障,阻止了AVM B_(1a)经鳃和肠道的吸收,限制了药物由分子膜转运,延缓了在鲟鱼脂肪和肌肉中的富集,导致AVM B_(1a)具有相对比较小的BCF。如果有机化合物的BCF值<100,则可以认为该化合物对环境的影响很小,不易在水生生物体内富集。在试验中,鲟鱼对水中的AVM B_(1a)摄取率较低,AVM B_(1a)在鲟鱼体内消除迅速,以及AVM B_(1a)较低的BCF值,表明不易在水生生物食物链中被生物浓缩,不易在水生生物体内富集,对环境和人类的健康影响较小。
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