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《中国农业大学》 2003年
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1,3-丙二醇产生菌肺炎克氏杆菌的分子育种

杨光  
【摘要】: 1,3-丙二醇(1,3-PD)是一种重要的化工原料,具有许多优良特性和很好的应用前景。微生物发酵法生产1,3-丙二醇与化学合成法相比具有显著的优点,因而越来越受到重视,成为当前的研究热点。底物和多产物抑制是造成微生物发酵法1,3-丙二醇产量和甘油转化率低,后期提取困难的主要原因,切断无益副产物的产生途径将提高1,3-丙二醇产量和甘油转化率,并简化后期提取工艺。 运用双底物两步法和微氧法对Klebsiella pneumoniae M5al菌株进行补料批式培养,发酵液中1,3-丙二醇浓度分别可达36.09gl~(-1)和45.22gl~(-1),较国内所能达到的水平有很大提高。 以Klebsiella pneumoniae M5al为出发菌株,用mini-Tn5随机转座诱变结合自杀性底物筛选的方法得到了两株产乙酸途径pta基因缺失突变株XL-6和XL-11,应用到微氧法发酵中,突变株的乙酸产量为亲株的50%以下,甘油转化率有所提高,但1,3-丙二醇浓度和生产强度有所下降。 PCR扩增出产乙醇途径adhE基因的部分片段和产乳酸途径ldhA基因的部分片段,构建了分别带有部分adhE基因片段和部分ldhA基因片段的自杀质粒pWW和pVV,通过同源重组的手段分别得到了6个adhE~-突变株和4个ldlM~-突变株。6个adhE~-突变株的乙醛脱氢酶活性均降低为亲株的10%以下,乙醇脱氢酶活性降低为亲株的10%左右;4个ldhA~-突变株的乳酸脱氢酶活性均降低为亲株的7%以下。突变株将应用到发酵中以研究其能否提高1,3-丙二醇产量和甘油转化率。
【学位授予单位】:中国农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:Q933

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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【参考文献】
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【共引文献】
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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9 白雪峰;;PTT聚合单体——1,3-丙二醇的生产方法[A];中国化工学会2003年石油化工学术年会论文集[C];2003年
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1 赵明星;厨余物厌氧产氢过程控制因素优化研究[D];江南大学;2010年
2 马正;利用不同底物生产1,3-丙二醇及基因工程菌的构建[D];江南大学;2010年
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7 李翠华;新疆棉籽油脱臭馏出物综合转化研究[D];天津大学;2012年
8 李志刚;发酵液中1,3-丙二醇和2,3-丁二醇的双水相萃取研究[D];大连理工大学;2011年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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8 陈祥军;腺苷钴胺素合成酶基因cobs的克隆及在产1,3-丙二醇菌中的应用[D];江南大学;2010年
9 刘春杰;环氧乙烷氢甲酯化合成3-羟基丙酸甲酯的研究[D];太原理工大学;2011年
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【二级引证文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前5条
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5 胡秋龙;发酵法生产1,3-丙二醇条件优化及相关策略研究[D];湖南农业大学;2007年
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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8 克热木江·阿布都热合曼;一株产谷胱甘肽啤酒酵母菌株的选育研究[D];兰州大学;2012年
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10 张丽勍;VI型分泌系统在植物青枯菌致病和蛋白分泌中的作用研究[D];中国农业科学院;2010年
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