收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

GFP-mTn嵌合基因对蓝猪耳的遗传转化及融合蛋白在蓝猪耳中的表达

齐一伯  
【摘要】: 植物细胞中的微丝骨架,是细胞内的一个由蛋白质构成的动态网络结构,参与胞内诸多的重要的生理活动。依赖各种actin结合蛋白的调节,微丝骨架可以受到高度严密的调控,从而在时间和空间上发生快速的重组。 Talin是一个重要的F-actin结合蛋白,它可以控制微丝的长度,并且同actin聚合体发生交联,F-actin和Talin发生的结合可以显著地增加微丝骨架的强度。Talin在帮助actin的装配同时还可以和Vinculin及其它的actin结合蛋白以及粘着斑上的蛋白相结合。 绿色荧光蛋白(GFP)作为报告探针,已经在研究工作中广泛地应用。将gfp:mtn(mTn是微丝结合蛋白Talin的微丝结合域,可以显示活体细胞中微丝的结构)导入拟南芥后,发现表达的融合蛋白能够标记微丝骨架,同时又不影响植物细胞的正常形态和功能。 蓝猪耳在其发育的四核期,胚囊从珠孔端伸出,当胚囊完全成熟时,助细胞、卵细胞和大部分中央细胞均暴露于胚珠组织之外,是研究被子植物受精和胚囊发育的模式植物。我们将嵌合基因gfp:mtn通过叶盘法导入蓝猪耳,探索了蓝猪耳遗传转化的方法和转基因苗的再生条件,建立了成熟的蓝猪耳转化系统。经激光共聚焦显微镜观察了转基因植株的各种不同组织中融合蛋白的表达和分布情况。在叶片的表皮细胞、保卫细胞、根部的皮层细胞中有融合蛋白的表达,保卫细胞中微丝标记状况良好,经光诱导处于开放态的气孔的保卫细胞微丝呈网状结构,在细胞内无规则分布;经黑暗诱导处于关闭态的气孔保卫细胞中微丝束沿保卫细胞纵轴排列,呈卷曲状分布。只有极少数的转基因植株在表皮细胞和根皮层细胞中有目的基因的表达。在转基因植株的其它部位,例如茎表皮细胞、根毛细胞和花粉粒中,未检测到目的基因的表达。 我们将外源基因成功地导入蓝猪耳,为利用转基因的手段研究被子植物受精和胚囊发育打下基础。获得的转基因植株也可以作为研究气孔运动过程中微丝动态变化的材料。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 佟晓南,韩玉珍,徐夙侠;蓝猪耳的组织培养和植株再生[J];植物生理学通讯;2002年03期
2 陶均,李玲;蓝猪耳组织培养和植株再生条件研究[J];华南师范大学学报(自然科学版);2004年04期
3 房克凤,孙蒙祥,周嫦;烟草与蓝猪耳胚胎发生中细胞表面三种凝集素受体的动态分布[J];植物生理与分子生物学学报;2003年05期
4 陈素红,扬延红,廖景平,田惠桥;蓝猪耳卵细胞和合子的分离[J];植物生理与分子生物学学报;2005年04期
5 姚成义,赵洁;钙和硼对蓝猪耳花粉萌发及花粉管生长的影响[J];武汉植物学研究;2004年01期
6 陈素红;邹璞;廖景平;;蓝猪耳小孢子发生和雄配子体发育[J];热带亚热带植物学报;2010年02期
7 陈素红,杨延红,廖景平,田惠桥;蓝猪耳精细胞的分离及两个精细胞群体的收集[J];热带亚热带植物学报;2004年06期
8 罗滟苏;宋梅芳;韩玉珍;;蓝猪耳胚珠磷脂酶C基因TfPLC1启动子的克隆、序列分析及植物表达载体的构建[J];农业生物技术学报;2007年02期
9 龙海涛;李洪清;李玲;;蓝猪耳启动子捕获系统的建立[J];北方园艺;2008年05期
10 魏琦超;周岩;畅丽萍;;三种提取蓝猪耳总DNA方法的比较[J];生物学杂志;2010年03期
11 杨延红;王雅英;叶祖云;田惠桥;;蓝猪耳合子和二胞原胚细胞的分离(简报)[J];分子细胞生物学报;2008年01期
12 康培婧,李梅兰,李洪清;TDZ诱导的蓝猪耳根高效再生体系(简报)[J];亚热带植物科学;2005年02期
13 龙海涛;李洪清;李玲;;根癌农杆菌介导蓝猪耳转化的影响因素研究[J];亚热带植物科学;2008年02期
14 侯雷平;王小菁;李洪清;李梅兰;;应用Tail-PCR扩增蓝猪耳T-DNA侧翼序列[J];应用与环境生物学报;2009年06期
15 格日乐;陈肖;朱学艺;田惠桥;;蓝猪耳花药发育中多糖和脂滴的组织化学研究[J];西北植物学报;2010年06期
16 赵振东;秦源;吴娟子;赵洁;;在烟草和蓝猪耳花粉萌发及花粉管生长中阿拉伯半乳糖蛋白的作用[J];武汉植物学研究;2006年05期
17 陈素红;田惠桥;廖景平;;蓝猪耳受精生物学研究进展[J];热带亚热带植物学报;2006年06期
18 杨怡姝;王小利;沈思嗣;肖向茜;;激光扫描共聚焦显微镜原位检测核酸及蛋白质的实验教学设计[J];实验技术与管理;2011年02期
19 刘德莉,胡晓洁,吴娟娟,刘伟,曹谊林;绿色荧光蛋白逆转录病毒载体的构建及其表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2002年05期
20 田涛,王琦;绿色荧光蛋白作为分子标记物在微生物学中的应用[J];微生物学杂志;2005年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 姚成义;蔡奇英;文雅;王芳;余扬帆;葛刚;;蓝猪耳(Torenia fournieri)雌蕊——中间类型的花柱[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
2 黄吉雷;张泉;苏都莫日根;;蓝猪耳DUO1基因及其启动子的克隆与功能分析[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
3 吴娟子;赵洁;;蓝猪耳花粉管生长过程中激素的作用[A];2005年全国植物生长物质研讨会论文摘要汇编[C];2005年
4 魏琦超;高峰;;蓝猪耳肌动蛋白基因的克隆与序列分析[A];河南省细胞生物学学会第二届会员代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2009年
5 石乐义;李洪清;李美茹;;拟南芥AtNHX5基因的克隆及其抗盐性功能分析[A];2005年全国植物逆境生理与分子生物学研讨会论文摘要汇编[C];2005年
6 宋梅芳;俞利凤;韩玉珍;;蓝猪耳生殖器官表达的磷脂酶C基因的克隆[A];中国植物生理学会第九次全国会议论文摘要汇编[C];2004年
7 吴娟子;秦源;赵洁;;激素对蓝猪耳花粉管生长的影响[A];湖北省植物生理学会第十五次学术研讨会论文集[C];2007年
8 宋梅芳;韩玉珍;;蓝猪耳胚珠表达的磷脂酰肌醇磷脂酶C基因的克隆与表达分析[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
9 龙海涛;李洪清;李玲;;蓝猪儿捕获启动子系统建立[A];2006中国植物细胞发育与分子生物学学术研讨会论文集[C];2006年
10 李扬;宋长城;罗松;宋小元;齐建国;王永潮;;IDl对细胞增殖、分化和调亡的影响[A];中国动物学会全国显微与亚显微形态科学分会第十次形态科学与显微注射技术学术研讨会论文摘要集[C];2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨延红;蓝猪耳精、卵细胞,中央细胞,助细胞以及原胚细胞的分离[D];厦门大学;2007年
2 房克凤;被子植物性细胞膜表面凝集素受体的分布模式及与受精的关系[D];武汉大学;2003年
3 张敏;Ⅰ、CD133在人直结肠癌肿瘤细胞体外增殖和侵袭能力中的作用及机制 Ⅱ、外源绿色荧光蛋白表达对肿瘤细胞体外生物学行为的影响[D];北京协和医学院;2012年
4 安志兴;绿色荧光蛋白融合基因在小鼠早期胚胎表达的研究[D];西北农林科技大学;2003年
5 李璞媛;汉坦病毒嵌合基因G1S0.7、G2S0.7重组腺病毒的改建、表达及其免疫学特性的比较研究[D];第四军医大学;2010年
6 徐越驰;组氨酸为活性中心的蛋白质酪氨酸磷酸酶和细胞自噬标记物的研究[D];吉林大学;2010年
7 王芳;表达绿色荧光蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌及其免疫生物学特性[D];扬州大学;2002年
8 李梅君;葡萄果实中脱落酸激活的钙依赖蛋白激酶:纯化、测序及定位[D];中国农业大学;2005年
9 卢永忠;钝顶节旋藻cpcB基因上游序列结构功能的研究[D];中国海洋大学;2005年
10 郑月茂;转基因山羊乳腺上皮细胞系建立与转基因克隆胚发育[D];西北农林科技大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 齐一伯;GFP-mTn嵌合基因对蓝猪耳的遗传转化及融合蛋白在蓝猪耳中的表达[D];中国农业大学;2003年
2 徐夙侠;钙在蓝猪耳双受精过程中作用的研究[D];中国农业大学;2003年
3 陈丙春;反义ACC合酶转基因对蓝猪耳生长发育的影响[D];中国农业大学;2004年
4 林少岩;根癌农杆菌介导的P_(SAG12)-IPT基因转化蓝猪耳的研究[D];华南师范大学;2005年
5 禹艳红;农杆菌介导的蓝猪耳(Torenia fournieri Lind.)和松叶牡丹(Portulaca grandiflora Hook.)遗传转化研究[D];华南师范大学;2003年
6 陶均;发根农杆菌对蓝猪耳的遗传转化及其毛状根再生植株的初步研究[D];华南师范大学;2004年
7 洪克前;蓝猪耳(Torenia fournieri Lind)花发育及育性的研究[D];华南师范大学;2005年
8 魏琦超;蓝猪耳(Torenia fournieri L.)肌动蛋白基因的克隆及生物信息学分析[D];西南大学;2006年
9 白君;蓝猪耳受精过程中胚囊细胞微丝骨架的动态研究[D];中国农业大学;2005年
10 李淑华;蓝猪耳(Torenia fournieri Lind)育性的研究[D];华南师范大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;化学诺奖得主为什么是钱永健[N];江苏科技报;2008年
2 ;“绿色荧光蛋白”能追踪癌细胞[N];江苏科技报;2008年
3 ;生物光的真谛:绿色荧光蛋白[N];大众科技报;2008年
4 李岿然 尹志 李丽云;绿色荧光蛋白“转基因”猪问世[N];江苏农业科技报;2007年
5 李岿然 尹志 记者 李丽云;国内首例绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪问世[N];科技日报;2006年
6 记者 朱伟光 特约记者 朱伟华 通讯员 鞠长荣 岳金凤;哈医大四院推出绿色荧光蛋白活体成像系统[N];光明日报;2006年
7 陈清华;从“绿色荧光蛋白”所想到的[N];中国财经报;2008年
8 王丰丰;华裔科学家钱永健摘诺贝尔化学奖[N];新华每日电讯;2008年
9 朱伟光;首例“转基因”克隆猪在哈降生[N];光明日报;2006年
10 卜晓明;钱永健的终极挑战:攻克癌症[N];新华每日电讯;2008年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978