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《中国农业大学》 2004年
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地被月季、菊花再生和抗旱遗传转化体系建立及其耐旱性快速评价方法研究

张常青  
【摘要】: 本研究为建立园林地被植物抗旱种质资源筛选和创新方法体系,以地被月季‘Royal Bassino’和地被菊花‘White Snow’为试材,研究了再生和抗旱遗传转化体系建立,并探索了其耐旱性快速鉴定和评价方法。 ‘White Snow’在MS添加0.2mg/l NAA、1.0mg/l KT和2.5mg/l GA_3或0.1mg/l NAA、2.0mg/l KT、5.0mg/l GA_3的培养基中每40天一次交替继代,对幼芽增殖效果最好;以无菌苗叶片为外植体,在附加2.0mg/l 6-BA和0.2mg/l NAA的MS培养基中获得了93.8%的不定芽再生率。而对于‘Royal Bassino’带有腋芽的茎段,MS中添加1.5mg/l 6-BA和0.1mg/l IBA为最适诱导培养基,诱导出芽率100%;MS中添加0.5mg/l 6-BA和0.05mg/l IBA可以获得最高增殖倍数6.3;而添加0.01 mg/l IBA的1/2MS为最佳生根培养基,生根率92%;以叶柄为外植体和MS为基础培养基,在添加7μM TDZ的诱导培养基中暗培养10天后,转接到添加0.5mg/l 6-BA的再生培养基中光周期培养约20天,可以获得57.1%的芽再生率,为最适再生培养条件。 将含拟南芥逆境诱导转录因子DREB1A基因的植物双元表达载体pBI-DREB1A导入根癌农杆菌LBA4404,农杆菌介导法遗传转化地被菊花‘White Snow’叶盘,经PCR和PCR-Southern检测,DREB1A基因已整合到转化植株的基因组中。遗传转化过程中,预培养2d后,将OD_(600)为0.5~0.7的农杆菌菌液稀释30倍后侵染叶盘10min,再共培养2d,有利于获得最高遗传转化效率。 用‘White Snow’10叶龄扦插生根幼苗为试材,分别采用自然失水胁迫和PEG胁迫处理,环境条件为温度23±2℃、空气相对湿度30±3%、光照约10μmol.m~(-2)s~(-1)。在划分不同处理萎蔫指数的基础上,测定了鲜样质量保持率、叶片水势、叶片溶质渗透势、MDA含量、SOD和CAT活性等指标。结果表明:萎蔫指数划分的主要形态特征因胁迫方法而异。自然失水胁迫中,胁迫8h为幼苗恢复极限;在恢复极限内复水,幼苗鲜样质量保持率、叶片水势、MDA含量、SOD以及CAT活性都得到了规律性的结果。PEG胁迫处理中,与胁迫浓度呈正相关的指标有鲜样质量保持率、叶片溶质渗透势、MDA含量以及SOD活性,而叶片水势和CAT活性却没有发现规律性结果。20%PEG胁迫处理4h内复水,能够正常恢复,其复水期间的鲜样质量保持率、叶片溶质渗透势、MDA含量、SOD活性都得到规律性的结果,而叶片水势和CAT活性却没有得到。综合上述,自然失水胁迫和PEG胁迫都可以用于地被菊花‘White Snow’幼苗耐旱性快速评价;不同处理形态萎蔫评价指标不同;不同的胁迫处理方式可利用的水分状况和生理指标存在一定的差异。
【学位授予单位】:中国农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S688.4

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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1 吕晋慧;根癌农杆菌介导的AP1基因转化菊花的研究[D];北京林业大学;2005年
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中国硕士学位论文全文数据库 前3条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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10 赵娜;郝培尧;晏海;董丽;;北京市城区道路绿化调查分析[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前5条
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中国期刊全文数据库 前4条
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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