收藏本站
《中国农业大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

白菜抗虫基因工程及bar基因的遗传飘移研究

刘凡  
【摘要】: 针对白菜的主要虫害,进行了基因工程育种研究,并以导入的除草剂抗性基因为标记基因,对转基因材料中外源基因的漂移可能性进行了调查。研究内容主要包括二方面: 1.白菜抗鳞翅目害虫基因工程: 构建了含马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因“pinⅡ”的单价质粒pBBBasta-pinⅡ,含蜘蛛杀虫肽基因的单价质粒 pBBBasta-sip,以及含pinⅡ和sip的双价质粒pBBBasta-pinⅡ-sip。采用叶盘转化法,获得了大白菜——北京80号的转pinⅡ基因植株;通过真空渗入转化,获得了三种质粒的不结球白菜——49菜心的转基因植株共88株。遗传检测表明转基因株后代的除草剂抗性分离比符合或不符合孟德尔遗传规律。根据分离比推测大多数转基因株系中,外源基因为单或寡拷贝插入。Southern分子杂交证明,外源基因已经插入植物基因组中,插入拷贝数与表现出的功能拷贝数符合或不符合。外源bar、pinⅡ及SIP基因在一些株系中能够连锁插入并遗传,但在一些转化单株中也发生了基因交换或丢失现象。转基因材料的室内连续饲虫实验结果表明,其离体叶片对白菜常见害虫——菜青虫、小菜蛾的生长发育具有明显的抑制及致死作用。取食转基因大白菜的菜青虫的死亡率为80%,对照为40%,相差2倍;小菜蛾的死亡率为90%,对照为35%,相差2.6倍。取食转基因菜心小菜蛾的死亡率在一些株系中可以高达98%,与对照相比,一些株系中可以相差3.6倍。北京80号通过游离小孢子培养获得了纯合转化株系;49菜心通过连续自交获得了纯合转化株系。 真空渗入转基因技术的研究表明,白菜中的转化事件发生在花发育的后期,转化种子均为杂合体。转化种子在处理植株的上部荚中产生较多。采用处于开花期、花蕾期、初蕾期的植株进行渗入处理,都能获得转化种子。影响处理后材料生长、结籽的因素也明显影响材料的种子转化率及植株转化率。 2.转基因白菜的外源基因漂移研究: 利用转入bar及NIa基因的白菜纯合转基因材料,进行了田间试验。结果表明,外源基因能够通过自然传粉,进入芸薹属的甘蓝型油菜、芜菁基因组中;不能进入甘蓝、芥菜基因组中。温室人工辅助授粉结果表明:外源基因能够进入芸薹属的黑芥、芜菁两个基本种中,以及甘蓝型油菜、芥菜、埃塞俄比亚芥三个复合种中,但不能进入甘蓝基因组以及萝卜属的萝卜基因组中;也不能进入我国农田常见的十字花科野生杂草如荠菜、唐葛菜等的基因组。外源基因在种间杂种中能够表达,但杂种的减数分裂不正常,育性低,致使外源基因的传递困难。芥菜、黑芥、埃塞俄比亚芥的转基因杂种难于得到F2代。外源基因的渗入率随二亲本间栽培距离的增加明显降低。0-3米距离段的基因飘逸是最主要的部分。栽培隔离带作物可以大幅度阻止基因漂移。
【学位授予单位】:中国农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S634.1

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;猪吃了白菜为什么会中毒[J];甘肃农业科技;1977年05期
2 李家文;中国白菜国际学术讨论会论文综述[J];园艺学报;1981年01期
3 刘志富;;白菜喷钼、硼肥增产显著[J];黑龙江农业科学;1983年01期
4 袁伯英;反季优质白菜“夏阳50天”的高产栽培[J];云南农业科技;1996年02期
5 ;白菜为什么烂疙瘩[J];中国农村科技;1999年09期
6 张麦熟,牛瑞生,孟小莽,袁瑞江,齐连芬;抗病晚熟大白菜新品种——冀白菜6号[J];河北农业科学;2001年04期
7 ;食之先祖 菜之帝王——大白菜[J];吉林蔬菜;2003年03期
8 牛平;煎白菜肉卷[J];河南农业;2003年04期
9 赵家跃,杨晶,曲小荣;核酸生物肥对白菜产量和品质的影响[J];农民致富之友;2005年04期
10 白祥安;白菜三大病害的主要防治途径及今后研究方向的商榷[J];中国农业科学;1961年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 邢德峰;徐香玲;马伟;;白菜转抗病基因体系建立的研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
2 王微微;石延霞;谢学文;向文胜;李宝聚;;应用POCER模型对白菜病虫害防治药剂的风险性评价[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
3 刘德辉;赵慧渊;田蕾;高芝祥;邵建华;;盆栽白菜-水稻条件下氨基酸螯合微肥的肥效研究[A];全国第九届新型肥料开发与应用技术交流会论文资料集[C];2004年
4 张爱红;黄鹂;余小林;卢钢;向珣;曹家树;;白菜花粉发育相关多聚半乳糖醛酸酶基因比较[A];中国十字花科蔬菜研究进展 2009——中国园艺学会十字花科分会第七届学术研讨会论文集[C];2009年
5 阮玉蓉;胡帅;王芳展;刘振宁;刘亚培;余小林;;白菜BcRALF基因启动子的分离[A];中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
6 张波;侯喜林;;白菜晚抽薹基因的SSR标记[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
7 田爱梅;曹家树;;白菜脂质转移蛋白基因的反义RNA验证[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
8 雷建军;;抗虫基因工程及其在蔬菜育种上的应用[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
9 许良政;罗来辉;刘惠娜;廖富林;;少花龙葵的化感效应及其机理的研究[A];中国植物生理学会第十次会员代表大会暨全国学术年会论文摘要汇编[C];2009年
10 陈振德;张清智;王文娇;周英;陈建美;;不结球白菜低农药残留基因型的筛选研究[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 周莹;玉白菜将惊艳世博[N];扬州日报;2010年
2 本报记者 李银雁 龙军才;南宁白菜价格为何暴跌[N];中国经济时报;2010年
3 郭旭光;白菜入药治病多[N];中国中医药报;2010年
4 ;白菜分层吃法[N];保健时报;2005年
5 苗玲;韩国培植出抗癌白菜[N];农民日报;2005年
6 记者王城;中国白菜出口韩国救急[N];中国食品报;2010年
7 本报记者 刘述波 穆巍;秋菜窖储:“错时销售”供需双赢[N];哈尔滨日报;2010年
8 本报记者 吴丽华;悲惨的白菜[N];华夏时报;2011年
9 记者 许晓青 舒静;志愿者好心态:“做一棵靠谱的白菜”[N];新华每日电讯;2010年
10 徐宝康;从“白菜危机”看“身土不二”[N];人民日报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘凡;白菜抗虫基因工程及bar基因的遗传飘移研究[D];中国农业大学;2004年
2 邓智年;野苋菜凝集素基因的克隆及转基因研究[D];广西大学;2007年
3 徐恒戬;利用真空渗入法获得转基因抗虫白菜及其转化机理的研究[D];山东农业大学;2004年
4 叶纨芝;白菜细胞核雄性不育相关基因mf-CYP450的分子鉴定、克隆和序列分析[D];浙江大学;2001年
5 王永勤;白菜核不育两用系育性基因表达特征分析及其小孢子发育相关基因的分离[D];浙江大学;2003年
6 卢钢;白菜分子遗传图谱构建及其重要农艺性状的基因定位研究[D];浙江大学;2002年
7 高丽红;白菜、生菜高温伤害机理及其越夏栽培技术的研究[D];南京农业大学;1994年
8 崔辉梅;白菜与芜菁Ogura雄性不育系的获得及其创建过程中的遗传学研究[D];浙江大学;2004年
9 余小林;白菜雄性不育相关基因CYP86MF的功能验证及其人工不育系的创建[D];浙江大学;2002年
10 孙保娟;白菜花组织再生体系的建立及离体条件下阶段发育转变的研究[D];浙江大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 符庆功;白菜核不育两用系基因组AFLP差异片段筛选、克隆及序列分析[D];浙江大学;2003年
2 帅琪峰;白菜核雄性不育两用系花蕾cDNA文库的构建及雄性不育相关基因的初步筛选[D];浙江大学;2004年
3 王丽;应用RAPD技术进行菜心(Brassica campestris L.ssp.chinensis var.utilis Tsenet Lee)种质遗传多样性的研究[D];西南大学;2006年
4 徐重益;白菜种质资源鉴定与更新方法研究[D];西北农林科技大学;2004年
5 贾可;磷肥在蔬菜上的产量效应及土壤中磷肥转化的研究[D];河北农业大学;2004年
6 姜立珍;雪花莲凝集素基因遗传转化甘蔗的研究[D];华南热带农业大学;2007年
7 陈鹏飞;大白菜类胡萝卜素分离鉴定和积累机理与调控研究[D];扬州大学;2008年
8 李勇;红菜苔春化作用相关基因及其天然早花突变的分子机理研究[D];重庆大学;2009年
9 张豫超;白菜雄性不育相关基因BcMF10的功能验证[D];浙江大学;2006年
10 黄细松;白菜开花时间相关基因的分子标记及春化相关基因的克隆和表达分析[D];浙江大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026