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《中国农业大学》 2004年
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一株红酵母Y11吸附镉的特性研究及其金属硫蛋白的分离纯化

王能飞  
【摘要】: 微生物在治理镉污染中有着广阔的应用前景,其中微生物吸附剂的研究已成为目前研究的热点之一。本文对一株可在高镉浓度(2000mg/L)下存活的酵母菌Y11吸附镉的特性作了详细的研究,并对其吸附镉的机制进行初步探讨,为实现微生物的镉污染治理奠定了基础。 根据形态学观察和葡萄糖发酵实验,脲酶实验以及重氮基蓝B实验结果,结合《酵母菌的特征与鉴定手册》,确定Y11为一株红酵母(Rhodotorula sp.)。 生长曲线结果表明菌体液体培养7小时进入对数期,18小时左右进入稳定期,因此初步确定菌体培养时间为20小时。在此基础上,研究了吸附时间、菌体加入量及pH对Y11吸附效果的影响。结果表明菌体对镉的吸附在7~8分钟达到峰值,30分钟基本平衡。在镉浓度为48.1mg/L的溶液中,菌体加入量为6g/L时,镉的去除率最大,达到95.6%,菌体中镉含量为干重的9‰。pH对吸附效率有决定性的影响,随着pH的升高,菌体吸附镉的能力增强,但低pH条件有利于镉的解吸。 Y11菌体具有重复吸附镉的能力。经五次吸附循环,其对50.7mg/L含镉溶液中镉的去除能力保持在90.87%~93.23%之间。将菌体用明胶—海藻酸钠固定后吸附镉,最大去除率达到77.91%。 研究了不同处理的菌体吸附的镉在细胞内的分布情况,结果发现在菌体培养过程中添加浓度为100mg/L镉时,菌体吸附的镉有3.27%进入细胞内;但是用培养好的菌体,冻干后吸附镉,菌体吸附的镉只有1%可进入原生质体,其余99%都分布在细胞壁周围。 探讨了Y11菌产金属硫蛋白(MT)的情况,结果表明镉诱导能明显促进Y11菌MT的产量,菌体经诱导后的MT产量达到638.8μg/g,是非诱导菌体的85倍,远大于报道的酵母菌中MT的产量。采用玻璃珠破碎细胞,经煮沸除去不耐热蛋白,再通过乙醇沉淀得到MT粗品。依次经过Sephadex G-50凝胶过滤,DEAE-52离子交换,再通过Sephadex G-25凝胶过滤脱盐纯化MT,经SDS-PAGE检测MT周围没有其它杂蛋白,分子量为6500 Da。
【学位授予单位】:中国农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:Q939.9

【引证文献】
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【参考文献】
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【同被引文献】
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