小麦T型细胞质雄性不育育性恢复基因的SSR标记定位
【摘要】：小麦T型不育系育性稳定,已转育出一些农艺性状较好的T型不育系及其保持系,但由于异源细胞质负效应的存在,导致杂种的饱满度差,且恢复源较少,育性恢复受多基因控制,选育强优组合较难。因此对T型细胞质雄性不育育性相关基因的研究尤为重要。
本研究以农大95A/PR143和小偃6号A/PR143的F2群体为实验材料,利用SSR对小麦T-CMS的恢复系PR143的育性恢复基因进行了定位。通过对组合农大95A/PR143的遗传分析,表明PR143有一个主效恢复基因,将组合农大95A/PR143的F2选定为T型细胞质雄性不育育性相关基因的定位群体。利用不育池、可育池和两亲本对320对SSR引物进行筛选,结果在两池和亲本间扩增出有稳定多态性且差异一致的6对引物,分别为Xgwm18、Xgwm273、Xgwm582、Dupw267、Xgwm264和Xgwm456,将这些引物在整个F2群体中进行扩增。然后在“Grain Genes”(http://wheat.pw.usda.gov)上又找到了一些与Xgwm18和Xgwm273(与本研究的恢复基因连锁较为紧密)遗传距离较近的一些SSR标记,并利用两亲本对它们进行筛选,得到了有差异带型的以下8个标记:Barc61、Barc137、Barc188、Wmc222、Xgwm11、Xgwm131、Xgwm153和Xgwm274,并在随机挑选的190个F2个体中进行扩增。
利用MAPMAKER软件对实验结果进行了分析。将LOG值的阈值设定为2.0,采用区间作图的方法,得到了1BS染色体上的遗传图,上面的标记依次为Barc61-Xgwm131-Xgwm11-Barc137-Xgwm18-Xgwm273-Dupw267-Xgwm582-Xgwm456和Xgwm153-Barc188,遗传距离依次为38.9 cM-19.0 cM-7.2 cM-7.7 cM-5.9 cM-2.0 cM-7.9 cM-10.3cM和23.7cM。该主效恢复基因的育性贡献率约为87.5%,利用复合区间定位的方法将它定位在了Xgwm18和Barc137两个标记之间,这两个标记之间的遗传距离为7.7cM,利用这两个标记的扩增产物目标条带在两极端个体中发生交换的比值计算出该主效恢复基因与Xgwm18和Barc137的遗传距离分别约为2.6cM和5.1cM。
【关键词】：细胞质雄性不育 育性恢复基因 SSR 小麦 【学位授予单位】：中国农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：S512.1
【目录】：
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-5
- 目录5-6
- 1.第一章 文献综述6-14
- 1.1.小麦的雄性不育与杂种优势利用6
- 1.2.小麦细胞质雄性不育(CMS)的研究进展6-13
- 1.2.1.CMS的形成机理6-9
- 1.2.2.小麦T-CMS的育性恢复基因的研究进展9-12
- 1.2.3.CMS的育性恢复基因的克隆12-13
- 1.3.本研究的目的和意义13-14
- 2.第二章 实验材料与方法14-18
- 2.1.实验材料14
- 2.2.实验方法14-18
- 2.2.1.考种方法14
- 2.2.2.DNA提取14-15
- 2.2.3.BSA池的构建15
- 2.2.4.SSR分析15-18
- 3.第三章 结果与分析18-29
- 3.1.考种结果与分析18-19
- 3.2.SSR扩增结果19-22
- 3.2.1.初步的引物筛选19-20
- 3.2.2.所筛引物在整个群体中的扩增结果20-21
- 3.2.3.进一步检索引物及扩增21-22
- 3.3.数据读取及MAPMAKER的定位作图22-29
- 4.第四章 讨论29-32
- 4.1.关于F2群体表型性状的讨论29
- 4.2.对定位的讨论29
- 4.3.对该恢复基因的一些相关讨论29-32
- 主要参考文献32-35
- 致谢35-36
- 附录36-43
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