收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

生姜原生质体培养与体细胞变异

郭英华  
【摘要】:生姜(Zingiber.officinale Rosc.)是姜科、姜属能形成根状茎的一个栽培种。广泛分布于亚洲热带、亚热带地区,在南非、北美和澳大利亚也有栽培,是集调味品、食品加工原料和药用为一体的高效多用途蔬菜。生姜以根状茎作为繁殖材料,繁殖系数低,容易通过种姜传播病害,而且长期无性繁造成种性退化。由于姜很少开花结籽,因此无法通过有性杂交手段进行种质创新和品种改良。本论文以河南鲁山县张良姜、陕西城固黄姜、湖北枣阳生姜、四川竹根姜为试材,建立了生姜胚性愈伤组织诱导和植株再生体系、胚性悬浮系再生体系,获得了原生质体再生植株,分析了离体培养过程中的体细胞变异情况,获得如下结果: 1 以各生姜地方品种的茎尖组织为材料,诱导产生了胚性愈伤组织,建立了高频再生体系。筛选出了适于胚性愈伤诱导及扩增最佳培养基MSN+1.0mg·L~(-1)2,4-D+0.2mg·L~(-1)KT+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;胚性愈伤组织分化培养基MS+0.2mg·L~(-1)2,4-D+5.0mg·L~(-1)BA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;根状茎形成培养基MS+3.0mg·L~(-1)BA+0.1mg·L~(-1)NAA+6.0%蔗糖+0.7%琼脂。植物激素、氮源对生姜茎尖胚性愈伤组织形成和再分化有较大影响。蔗糖比葡萄糖更利于根状茎的诱导,活性炭对根状茎诱导没有明显作用。不同品种间胚性愈伤组织诱导、愈伤组织再分化以及植株再生能力存在一定的差异。 2 以胚性愈伤组织为材料,建立了胚性细胞悬浮系,并获得了再生植株。结果表明悬浮细胞干重和pH之间有一定的相关性。接种量和AgNO_3含量对悬浮细胞的生长都有影响:最佳接种量为1.0%,最适AgNO_3浓度为6.0mg·L~(-1)。不同品种间胚性细胞悬浮系的生长能力不同。悬浮系愈伤组织的分化能力低于其对应的胚性愈伤组织分化能力。 3 利用生姜胚性细胞悬浮系成功分离得到原生质体,获得SC姜再生植株。酶种类和浓度、渗透压调节剂种类和浓度对分离原生质体有重要影响,最佳酶液组成为4.0%纤维素酶、1.0%离析酶、0.1%果胶酶、11%甘露醇、0.5%CaCl_2和0.1%MES。原生质体产量达到6027×10~6g~(-1),原生质体活力为90.7%。悬浮培养时间对分离原生质的产量和活力有影响。葡萄糖比蔗糖更利于纯化后原生质体分裂和生长。低浓度的AgNO_3(2.0-6.0mgl~(-1))可以降低原生质愈伤组织褐化速度。不同品种间在原生质体分裂、愈伤组织分化、植株再生方面有显著差异。 4 对各品种生姜的胚性愈伤组织再生植株、胚性悬浮系再生植株、原生质体再生植株进行形态学、细胞学、分子生物学鉴定。结果表明,再生植株外部形态没有明显变异。再生植株的染色体数目没有变异。RAPD多态性分析表明,再生植株存在较广泛的体细胞变异。对各品种胚性愈伤组织、胚性悬浮系愈伤组织、原生质体再生愈伤组织进行细胞学鉴定和RAPD分析表明,愈伤组织的体细胞变异率远远高于再生植株的体细胞变异率。继代次数对体细胞变异率也有影响,随着继代时间的延长,体细胞变异率有上升趋势。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 裴新梧,王亚馥;植物体细胞胚发生与作物育种[J];生物技术通报;2000年05期
2 廖兆周,劳方业,颜秋生,张雷琴;甘蔗原生质体培养──快速再生植株[J];甘蔗糖业;1999年06期
3 张伟,简玉瑜;籼稻原生质体游离培养及再生植株[J];华南农业大学学报(自然科学版);1993年03期
4 徐明良,杨金水,胡容霞,葛扣麟;水稻原生质体高频分裂及基因转化[J];复旦学报(自然科学版);1996年06期
5 廖兆周;甘蔗原生质体培养──一个可再生植株的细胞系的特征[J];甘蔗糖业;1999年05期
6 佘建明,吴敬音,周邗扬;陆地棉原生质体高频率分裂及植株再生[J];遗传学报;1993年06期
7 张伟,简玉瑜;普通野生稻胚性细胞悬浮系的建立及原生质体再生植株[J];华南农业大学学报(自然科学版);1991年04期
8 贾勇炯,陈放,李英,何小莉;从水稻根部悬浮培养细胞分离原生质体及植株再生[J];生物工程学报;1994年02期
9 张宝红;棉花原生质体培养研究进展(综述)[J];四川农业大学学报;1995年01期
10 ;植物细胞、组织及原生质体培养[J];生物技术通报;1994年06期
11 唐巍,欧阳藩;松柏类植物原生质体培养研究进展[J];生物技术通报;1996年06期
12 ;生姜增产措施[J];农业科技通讯;1977年03期
13 程;生姜的栽培管理[J];台湾农业探索;1990年03期
14 吴永东;生姜生产沉浮录——四川营山生姜基地的调查思考[J];农家顾问;1996年07期
15 黄安忠;;八德村农民靠种生姜致富[J];农家之友;1996年08期
16 唐巍,欧阳藩,郭仲琛;火炬松胚性悬浮细胞原生质体的分离和培养[J];木本植物研究;1997年03期
17 牛峰;生姜亩产4000以斤高产技术[J];北京农业;1997年01期
18 陈丽娟;生姜高产栽培技术要点[J];福建农业;1998年01期
19 高山林;生姜组培脱毒苗及高产栽培要点[J];农业科技通讯;1999年05期
20 ;窖贮生姜[J];农民致富之友;1999年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 卫志明;许智宏;;外源DNA转化高粱原生质体[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
2 刘永翔;刘作易;;戴氏绿僵菌原生质体的形成及再生[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
3 王鹏;李伟伟;朱迎紫;方侃;何森;孟凡欣;程瑛琨;;均匀设计法优化纤维堆囊菌ATCC15384原生质体的制备条件[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
4 王广策;叶乃好;曾呈奎;;藓羽藻原生质体再生植株的形成与发育[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
5 郭文武;Grosser JW;邓秀新;;柑橘原生质体操作技术与育种新进展[A];湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2004年
6 林栖凤;李冠一;;第一章 植物遗传转化的主要方法(一)[A];植物分子育种——第四届全国植物分子育种学术研讨会论文集[C];2004年
7 程红;周嫦;;三种植物幼嫩花粉原生质体的分离与培养[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
8 王镨;许英;张信强;;香菇(Lentinus edodes)原生质体再生菌丝的形状发生[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
9 王文涵;王丽达;许浩然;郑田;孟凡欣;刘洋;;响应面法优化纤维堆囊菌So ce 90原生质体的制备条件[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
10 张鉴铭;郑玉萍;;鸡(土从)菌丝原生质体的分离和培养[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郭英华;生姜原生质体培养与体细胞变异[D];中国农业大学;2005年
2 叶乃好;藓羽藻原生质体团聚、再生及其相关的应用研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
3 刘文婷;苜蓿体细胞胚作为生物反应器表达外源蛋白的研究[D];西北农林科技大学;2012年
4 李艳丽;原生质体技术筛选刺芹侧耳高产多糖和漆酶菌株的研究[D];吉林农业大学;2012年
5 吕芳;羽藻再生过程中基因表达及其光合作用的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
6 刘红全;条斑紫菜的转基因研究[D];中国海洋大学;2004年
7 郭衍银;生姜癞皮病病原鉴定及发病机理研究[D];山东农业大学;2004年
8 王兴翠;生姜离体叶片植株再生体系及多倍体诱导技术研究[D];山东农业大学;2011年
9 张学英;草莓(Fragaria ananassa Duch.)原生质体培养及植株再生研究[D];河北农业大学;2004年
10 洪伟雄;甘蔗梢腐病病原菌—串珠镰刀菌分子生物学研究初探[D];福建农林大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵硕;耐高渗(高糖)酵母菌株的选育[D];安徽农业大学;2010年
2 白忠彬;原生质体介导的外源性GRF基因在家兔及小鼠肌肉中的表达[D];延边大学;2002年
3 彭帅;电融合法构建海藻糖高产菌株的研究[D];吉林农业大学;2004年
4 张新峰;嗜热真菌高产木聚糖酶及其酶法制备低聚木糖的研究[D];湖北工业大学;2011年
5 王春丽;β-葡萄糖苷酶高产菌株的选育及玉米芯的诱导作用研究[D];北京化工大学;2010年
6 孟国庆;头孢菌素C高产菌株选育及发酵特性研究[D];山东轻工业学院;2011年
7 吕伟光;鹅掌楸属内种间体细胞原生质体融合研究[D];南京林业大学;2010年
8 谢华永;杨树胚性悬浮细胞系建立与原生质体融合研究[D];南京林业大学;2004年
9 张宇昊;康氏木霉的原生质体诱变及玉米秸秆发酵酒精工艺研究[D];河北农业大学;2004年
10 周海霞;灭活原生质体融合选育α-ALDC-高产菌株[D];河北大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张洪军;食姜益处多 夏日须讲究[N];大众科技报;2006年
2 河南省太康县逊母口镇政府 朱广凯;养猪用生姜 治病保健康[N];河北农民报;2007年
3 李永耐;板栗园中套种生姜效果好[N];中国水利报;2002年
4 ;夏吃生姜益处多[N];中国食品质量报;2000年
5 本报记者 白舒婕;“蒜你狠”未平 “姜你军”又起[N];新农村商报;2010年
6 本报记者 杨赞;长林村扶农“打姜山”[N];大庆日报;2010年
7 杨宁 王彬;小生姜 大产业[N];巢湖日报;2006年
8 健康时报特约记者  谢明霞;生姜:意想不到的好处[N];健康时报;2006年
9 吴歌;夏日吃姜五项注意[N];中国中医药报;2006年
10 昆宝军;神奇的姜[N];大众科技报;2000年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978