收藏本站
《中国农业大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

烟草NADPH氧化酶在Na~+、Cu~(2+)胁迫中的活性变化及其作用

于中连  
【摘要】:非生物胁迫诱导了细胞中活性氧的大量产生。植物质膜NADPH氧化酶催化产生的活性氧被认为是逆境胁迫中活性氧产生的一个重要来源。我们根据已发表序列克隆得到了烟草NADPH氧化酶的cDNA,并对所得的序列进行了生物信息学分析,结果显示,该序列是含有植株NADPH氧化酶的保守结构域。序列修饰分析结果表明,该酶除了可以被钙直接结合外,也可能被诸如磷酸化等调控机制调控。 通过构建PET-NAO原核表达载体,原核表达获得了NADPH氧化酶C末端部分片断的目的蛋白,并利用其获得了效价1:1000的兔抗血清。同时我们构建了CaMV35S启动子驱动的NADPH氧化酶过表达载体NAO和两个RNAi载体(NAOa,NAOb),农杆菌介导获得转基因烟草。经基因组DNA PCR、RT-PCR和Western blot检测,共获得阳性转基因植株NAO 10株、NAOa 8株和NAOb 12株。 已有研究显示,体外H_2O_2处理拟南芥诱导了体内抗氧化物酶基因表达的增加。然而内源活性氧对植株体内抗氧化物酶的活性的影响还不清晰。我们测定了转基因烟草内CAT、POX、APX、GR和SOD酶活性。与对照植株相比,过量表达NADPH氧化酶的转基因植株内这五个酶的活性均有不同程度的升高,干扰植株体内抗氧化物酶活性与此相反,两个干扰株系中各抗氧化物酶活性都受到了抑制。这些结果说明,植株体内存在着一个自动协同机制以消除活性氧的过量产生和产生减少对植物所带来的影响。 盐胁迫诱导了活性氧的产生。NADPH氧化酶特异性抑制剂DPI抑制了盐诱导的拟南芥H_2O_2的产生。然而,盐胁迫对NADPH氧化酶活性的影响还不清楚。细胞色素C还原法测定盐胁迫烟草植株中NADPH氧化酶活性。低浓度(100-200mM)短时间(1-6h)的NaCl处理的烟草叶片NADPH氧化酶活性升高,NADPH氧化酶催化产生的活性氧是NaCl胁迫活性氧的主要来源之一。高浓度(200mM)长时间(6h)NaCl处理的烟草叶片NADPH氧化酶活性降低。过量表达转基因植株长时间盐胁迫处理生长受到抑制,体内抗氧化物酶活性应答胁迫失灵,MDA水平升高,而干扰植株长势比对照植株要好,体内抗氧化物酶活性应答胁迫灵敏,MDA水平低。NAO转基因植株的种子发芽率受到了100mMNaCl的抑制,其中株系3发芽率与对照株相比降低了30%。 Cu~(2+)诱导了小麦根NADPH氧化酶活性的升高。我们的实验显示Cu~(2+)诱NADPH氧化酶转录和活性的的升高。我们的数据显示,Cu~(2+)激活PLD参与调节的NADPH氧化酶活性升高所催化产生的活性氧是Cu~(2+)胁迫下活性氧的主要来源之一。我们推测,同哺乳动物NADPH氧化酶相似,植物NADPH氧化酶活性也可以受到PLD和PA的调控。
【学位授予单位】:

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈元松;;盐度胁迫对茳芏·短叶茳芏萌芽的影响[J];安徽农业科学;2011年17期
2 任小青;冀宏;;盐胁迫对碱茅草种子萌发的影响[J];安徽农业科学;2011年19期
3 杨志莹;赵兰勇;徐宗大;;盐胁迫对玫瑰生长和生理特性的影响[J];应用生态学报;2011年08期
4 刘海英;崔长海;赵倩;郭净净;张东玲;范念斯;;施用有机肥环境下盐胁迫小麦幼苗长势和内源激素的变化[J];生态学报;2011年15期
5 庞秋颖;陈思学;于涛;王洋;阎秀峰;;盐胁迫对拟南芥和盐芥莲座叶芥子油苷含量的影响[J];生态学报;2011年16期
6 于利刚;解莉楠;李玉花;;植物抗逆反应中水孔蛋白的表达调控研究[J];生物技术通报;2011年08期
7 张恒;戴绍军;;植物盐胁迫应答蛋白质组学研究的技术策略[J];应用生态学报;2011年08期
8 李斌;郭世荣;孙锦;李娟;;外源亚精胺对盐胁迫下黄瓜幼苗游离态多胺含量和多胺合成酶基因表达的影响[J];植物科学学报;2011年04期
9 陈涛;王贵美;沈伟伟;李小珍;祁建民;徐建堂;陶爱芬;刘晓倩;;盐胁迫对红麻幼苗生长及抗氧化酶活性的影响[J];植物科学学报;2011年04期
10 谭会娟;李新荣;赵昕;刘玉冰;;红砂愈伤组织适应盐胁迫的渗透调节机制研究[J];中国沙漠;2011年05期
11 顾大形;陈双林;顾李俭;可晓;庄明浩;李应;;盐胁迫对四季竹细胞膜透性和矿质离子吸收、运输和分配的影响[J];生态学杂志;2011年07期
12 王进;李新荣;;盐胁迫对盐芥悬浮培养细胞超微结构的影响[J];中国沙漠;2011年04期
13 姚晓华;张志斌;;HVA1基因的同源克隆及其转基因植物耐逆性研究进展[J];广东农业科学;2011年14期
14 管博;于君宝;陆兆华;张莹;王雪宏;;黄河三角洲滨海湿地水盐胁迫对盐地碱蓬幼苗生长和抗氧化酶活性的影响[J];环境科学;2011年08期
15 胡凡波;刘玲;隆小华;刘兆普;;外源NO对NaCl胁迫下长春花幼苗生物量和叶绿素荧光的影响[J];生态学杂志;2011年08期
16 高世庆;王永波;唐益苗;徐蓓;马锦绣;陈京瑞;柳珊;张风廷;赵昌平;;长穗偃麦草EeNAC9基因功能初步研究[J];生物技术通报;2011年06期
17 范克胜;吴小芹;任嘉红;叶建仁;;盐胁迫下外生菌根真菌与根际有益细菌互作对杨树光合特性的影响[J];西北植物学报;2011年06期
18 李宏;程平;郑朝晖;孙守文;李丕军;王宝庆;;盐旱胁迫对3种新疆造林树木种子萌发的影响[J];西北植物学报;2011年07期
19 张桦;张富春;张雨良;张博;陈全家;;新牧一号杂花苜蓿MvNHX1基因的表达分析和提高烟草耐盐性的研究[J];植物研究;2011年05期
20 刘寅;贾黎明;张博;马晨;;滨海盐碱地绿化植物筛选及耐盐性评价研究进展[J];西南林业大学学报;2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 严顺平;苏维埃;汤章城;孙卫宁;;水稻根中盐胁迫响应蛋白的蛋白质组学的分析[A];中国蛋白质组学第二届学术大会论文摘要论文集[C];2004年
2 叶武威;喻树迅;王俊娟;樊宝相;赵云雷;;盐胁迫下棉花耐盐相关基因差异表达分析[A];中国棉花学会2008年年会论文汇编[C];2008年
3 赵福庚;刘友良;;盐胁迫下大麦根系多胺含量变化与耐盐性的关系[A];中国青年农业科学学术年报[C];2002年
4 孙健;王美娟;丁明全;邓澍荣;陈少良;;盐胁迫下胡杨调控细胞内K~+/Na~+平衡的生理和信号机制[A];第六届中国植物逆境生理学与分子生物学学术研讨会论文摘要汇编[C];2010年
5 华春;王仁雷;刘友良;;外源AsA对盐胁迫下水稻叶绿体活性氧清除系统的保护作用[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
6 杨俊诚;姜慧敏;张建峰;梅勇;;盐胁迫下植物对磷的吸收的研究[A];2004年全国学术年会农业分会场论文专集[C];2004年
7 高青海;王秀峰;杨凤娟;魏珉;任志雨;;LaCl_3对硝酸盐胁迫下黄瓜幼苗光合特性的影响[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
8 陈静波;刘建秀;;4种暖季型草坪草对盐胁迫的生长生理反应[A];中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会论文集[C];2007年
9 张润花;郭世荣;李军;;外源腐胺对盐胁迫黄瓜幼苗生长,光合及叶绿素荧光参数的影响[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
10 杨帆;丁菲;杜天真;;盐胁迫下构树幼苗各器官中K~+、Ca~(2+)、Na~+和Cl~-含量分布及吸收特征[A];第九届全国植物结构与生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前7条
1 记者 谢军;中美科学家联手成功克隆水稻耐盐功能基因[N];光明日报;2005年
2 记者 邱曙东;盐碱地种水稻将不再是梦想[N];解放日报;2005年
3 肖文;149项鼓励引进技术可享税收优惠[N];中国税务报;2007年
4 李杰萍;梁统;周克元;厚朴酚可抑制溶酶体酶释放[N];中国医药报;2004年
5 记者 铁铮;树木抗逆性专项研究取得突破[N];中国绿色时报;2002年
6 ;为学生终身发展奠基[N];天津日报;2005年
7 施燕;保证学生健康心理 积极推进素质教育[N];中国教育报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 于中连;烟草NADPH氧化酶在Na~+、Cu~(2+)胁迫中的活性变化及其作用[D];中国农业大学;2005年
2 陆一鸣;短芒大麦盐胁迫相关基因的克隆及其功能分析[D];中国人民解放军军需大学;2003年
3 严顺平;水稻响应盐胁迫和低温胁迫的蛋白质组研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2006年
4 刘永霞;硅对金丝小枣盐胁迫的缓解效应及其机理[D];南京林业大学;2007年
5 吴雪霞;外源一氧化氮对盐胁迫下番茄幼苗生理特性影响的研究[D];南京农业大学;2007年
6 杜伟;诱导型激活拟南芥突变体库的构建以及AtCRK3生化、表达分析[D];武汉大学;2005年
7 史仁玖;多枝赖草(Leymus multicaulis)盐胁迫应答相关基因的克隆及表达分析[D];南京农业大学;2005年
8 王俊生;延迟荧光检测技术及其在光合能力与胁迫检测中的应用[D];哈尔滨工业大学;2007年
9 何奇江;盐胁迫下雷竹的离子响应及生理生态变化[D];中国林业科学研究院;2011年
10 刘杰;向日葵对碱胁迫和盐胁迫适应机制比较[D];东北师范大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张锦广;NADPH氧化酶参与盐胁迫诱导的烟草悬浮细胞活性氧的产生[D];中国农业大学;2005年
2 武金华;盐胁迫下紫杆柽柳cDNA文库构建及表达序列标签(EST)分析[D];东北林业大学;2004年
3 杨涓;盐胁迫下枸杞糖蛋白及糖代谢变化的研究[D];宁夏大学;2004年
4 于影;转柽柳LEA基因烟草耐盐性分析[D];东北林业大学;2006年
5 黄丽;槲寄生与寄主红树植物之间水分和营养研究[D];厦门大学;2009年
6 聂晶;五个垂直绿化树种的耐盐特性及耐盐性评价[D];山东农业大学;2004年
7 孙丽娜;水杨酸对盐胁迫下黄瓜生长发育及超微结构影响的研究[D];东北农业大学;2005年
8 周志文;葡萄种质资源的耐盐性鉴定及其生理基础的研究[D];山东农业大学;2003年
9 麻德平;外源NO和精胺提高高羊茅草耐盐性研究[D];郑州大学;2007年
10 张艳;NaCl胁迫下海滨锦葵光保护机制的研究[D];山东师范大学;2008年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978