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《中国农业大学》 2005年
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2,2’5,5’-四氯联苯和雌二醇对鸡生殖功能的影响

张易祥  
【摘要】:禽类胚胎离开母体在密闭的蛋壳内完成全部发育,其原始生殖细胞(PGCs)的迁移和发育不同于哺乳动物。作为精子和卵子的祖代细胞,PGCs起源于胚盘的上胚层,当入孵20小时左右时,组织间迁移至原条期生殖新月部位;入孵50小时左右时进入血液循环中,而后穿过毛细血管壁进入生殖原基部位;入孵72小时左右时完成血液循环至生殖原基的迁移,最后在生殖原基定居、增殖、分化成配子。PGCs的独特的迁移路线,使得胚胎进行外源性物质处理后,在胚胎的胚盘、原条期生殖新月部位、血液循环及性腺四个部位能较为方便地分离PGCs,于生存状态下进行外源物质对PGCs增殖性迁移影响的研究。 禽类的精卵相互作用也和哺乳动物有很大的不同。母鸡受精一次后可以在一定时间内连续产受精蛋而不再需要人工受精或自然交配。在禽类受精过程中,精卵的相互作用发生在排卵后10—20分钟的输卵管的漏斗部。可通过精子穿过卵黄内膜时由于水解作用所产生的孔和卵黄外膜所捕获的精子数来研究精卵结合。同时,精子在体外可与分离的卵黄膜内层进行作用。这种体外精卵作用和体内精卵作用均可很好地反映精子和/或卵子的活性状态。 本研究利用禽类原始生殖细胞的迁移特点和禽类精卵相互作用的特征,研究了雌二醇(E_2)和具有雌激素活性的2,2’,5,5’—四氯联苯(PCB52)对鸡的生殖系统的影响,研究建立检测PCBs/E_2的动物模型,为人类制定和预防环境激素污染提供科学依据。 实验结果表明: 1.E_2对鸡胚PGCs的增殖性迁移无明显影响。同时,对发育30期以前的鸡胚而言,PGCs的迁移对E_2并没有一个敏感期,其PGCs的增殖性迁移并不受不同发育期暴露E_2的影响。由于E_2是通过雌激素受体发生作用的,所以,本实验结果表明,在鸡胚PGCs迁移期间,PGCs的雌激素受体可能还没有合成。 E_2不影响PGCs由胚盘至生殖新月的迁移过程,E_2也不影响PGCs从生殖新月进入血液的迁移过程,因此,E_2对PGCs由胚盘中央区组织迁移至生殖新月区,再由生殖新月区迁移至血液循环的过程无明显影响。 用PCB52处理胚盘后,阻碍了PGCs由胚盘向生殖新月明区的迁移,也影响了PGCs从生殖新月明区向血液循环的迁移及此后在性腺的定居过程。 PCB52对PGCs发育的影响可能主要是毒性作用的结果,不是其类雌激素作用的结果。由此推断,PGCs迁移过程中可能没有雌激素受体参与。 PCB52处理过的受体胚胎明显阻碍外源PGCs的增殖性迁移。PCB52在鸡胚体内的半衰期很长,对细胞的毒性作用至少持续100多小时,对胚胎的原始生殖细胞可造成长久的有害影响。 E_2处理过的受体胚胎对外源PGCs由胚盘中央经生殖新月至血液循环,再由血液循环到达生殖原基的增殖性迁移无明显影响。 2.用不同浓度的PCB52和E_2于37℃处理新鲜精子20min,然后和同一只母鸡所产蛋的卵黄膜内层体外反应,浓度大于0.001μmol/1 PCB52对卵黄膜内层(IPVL)的孔数有明显影响(P0.05),和对照组相比E_2的影响不显著(P0.05)。 用相同浓度的PCB52和E_2于37℃处理新鲜精子20min后,然后和不同母鸡所产蛋的卵黄膜
【学位授予单位】:

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