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《北京林业大学》 2015年
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利用乳杆菌脱除伏马毒素的研究

王晓  
【摘要】:基于伏马毒素-菌体共培养体系,本文采用伏马毒素试剂盒与高效液相色谱法相结合的方式,筛选出了2株具有结合伏马毒素效果的菌株植物乳杆菌(Lactobacillusplant arum) B7和戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus) X8;研究了在伏马毒素存在下两株菌的生长表现,探讨了温度、时间、pH、化学处理、酶处理等因素对菌体脱除伏马毒素FB1和FB2的影响;根据伏马毒素影响Caco-2细胞系的存活状况,在细胞水平上证实了乳杆菌菌株确有脱除伏马毒素的能力;进一步在此基础上,探索了乳杆菌吸附伏马毒素FB1和FB2的机制,旨在为用生物方法脱除伏马毒素提供理论基础,主要研究结果如下:1.2株乳杆菌具有脱除伏马毒素的能力,植物乳杆菌B7和戊糖乳杆菌X8在37℃吸附1h后对FB1的脱除率分别为52.9%和58.0%,对FB2的脱除率分别达到了85.2%和86.5%。2株乳杆菌对FB2的吸附效果要普遍高于对FB1的吸附效果,且菌株X8对伏马毒素的吸附效果要略高于菌株B7。2.在5μg/mL伏马毒素存在下,菌株B7和X8的生长不受影响,且菌体细胞在吸附伏马毒素后仍具有活性。菌株脱除伏马毒素的能力并与菌体活性关系不大,但pH、HCl、TCA、酶处理能够显著影响2株菌吸附伏马毒素的能力。在低pH时,2株菌具有较好地吸附伏马毒素的能力,FB1的吸附率都在50%以上,FB2的吸附率也在80%以上。HCl和TCA处理后,菌株吸附伏马毒素的能力有所提高,但溶菌酶处理后,菌体吸附伏马毒素的能力则减弱。3.与不经菌株结合的伏马毒素上清液相比,经菌株B7和X8与伏马毒素共培养后的上清液导致Caco-2细胞系死亡的效率明显降低。对2株菌而言,Caco-2细胞的死亡率分别从34.1%降至28.1%或21.9%,这表明乳杆菌细胞具有脱除伏马毒素的能力,降低了毒素对Caco-2细胞死亡率的影响。4.菌株吸附伏马毒素的主要位点是细胞壁的肽聚糖,菌株B7和X8的肽聚糖吸附伏马毒素FB1效率分别是82.6%和86.2%,吸附FB2的效率分别为95.8%和97.5%。当去除菌体细胞壁时,其吸附率仅为10%。进一步地,破坏肽聚糖的三维立体网状结构会导致2株乳杆菌的伏马毒素吸附率下降,完整的肽聚糖结构在菌体吸附伏马毒素的过程中发挥着重要作用。综上,植物乳杆菌B7和戊糖乳杆菌X8能较好地吸附伏马毒素的能力,具有作为生物介质用于脱除环境中伏马毒素的潜力。
【学位授予单位】:北京林业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:Q93;O647.3

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