收藏本站
《北京林业大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

草地早熟禾高频再生体系的建立及基因枪导入甜菜碱脱氢酶基因的研究

段碧华  
【摘要】:通过草地早熟禾组织培养的最佳条件和体细胞胚胎发生的影响因素的研究,建立了草地早熟禾的组织培养的高频再生体系;优化了草地早熟禾的基因枪转化技术参数,并利用基因枪轰击法将山菠菜的甜菜碱脱氢酶基因导入草地早熟禾,并稳定地整合到草地早熟禾基因组中,经耐旱耐盐试验初步证实了转基因植株的耐旱和耐盐性有所提高。 1、通过外植体筛选、不同激素浓度配比试验,对草地早熟禾5个品种愈伤组织诱导、器官分化、壮苗生根影响因素进行了研究,发现用ABA代替CH有利于愈伤组织的质量和诱导率的提高,建立了一套以“新哥莱德(Nuglade)”成熟种子为主基因型的草地早熟禾高频再生组织培养体系。即: 诱导培养基:MB5+2mg/L2,4-D+0.2mg/L6-BA(或0.5mg/LKT)+2mg/LABA+12mg/L gelrite+60mg/L蔗糖 继代培养基:MB5+0.5-1mg/L2,4-D+0.2mg/L6-BA(或0.5mg/LKT)+2mg/LABA+12mg/L gelrite+60mg/L蔗糖。 分化培养基:MB5+3mg/L6-BA(或2mg/LKT)光下培养。 生根培养基:1/2MS+IAA0.8mg/L。 培养条件:25±1℃暗处培养暗培养3~4周,转移到愈伤组织继代培养基上光照培养。白天25±1℃,夜晚18±1℃,光强1500-2000LUX,光照时间16h/d。 2、通过对轰击压力、轰击次数、轰击距离、不同金粉及DNA的纯度和浓度等因素的研究,优化了草地早熟禾的基因枪转化技术参数。每轰击一枪后转动培养皿的方向,并翻动受体材料有利于转化效果的提高。在选用1100psi压力膜、6cm的轰击距离、使用250ug金粉吸附0.5ug pBIN438质粒DNA的用量和轰击两枪下转化性价比最好。 3、通过对草地早熟禾愈伤组织标靶材料筛选、高渗溶液处理、继代培养、轰击后恢复培养等进行研究,结果表明:作为转化受体,在所选用的实验材料中,新哥莱德(Nuglade)再生能力强,获得转基因植株的频率较高,是较好的转化标靶材料;在基因枪轰击前,用含0.5M甘露醇的分化培养基预处理10~24h,有助于提高转化效率;发现草地早熟禾愈伤组织的继代时间应在3个月以内,尽量缩短抗性愈伤的筛选
【学位授予单位】:北京林业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S688.4

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 党卫玲;孙彦;杨青川;;草坪草转基因研究进展[J];北方园艺;2007年08期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 王康;董洁;周禾;;转基因技术对草坪草育种的影响[A];中国草学会草坪专业委员会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张吉宇;无芒隐子草(Cleistogenes songorica)种质抗旱评价、cDNA文库构建及相关基因克隆与鉴定[D];兰州大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 殷昭平;陈运起;刘世琦;高莉敏;;蔬菜抗热、耐寒性鉴定方法与评价指标研究进展[J];山东农业科学;2008年04期
2 吴振映;柳絮;王文英;姚方印;刘开启;;利用农杆菌介导法获得转cry2A抗虫基因水稻的研究[J];山东农业科学;2011年05期
3 张斌;秦岭;王莹莹;范仲学;毕玉平;;作物抗旱分子机制研究进展[J];山东农业科学;2011年12期
4 周济铭;刘文国;赵强;郑爱泉;;铝逆境下植物根系有机酸的分泌及其解铝毒机理[J];安徽农学通报;2008年01期
5 陈哲;孔祥翔;张斐斐;龚明;;植物抗逆性基因工程研究进展[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年07期
6 方志红;董宽虎;;Na_2SO_4胁迫对碱蒿叶绿素、甜菜红素和O_2~-产生速率的影响[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年09期
7 刘贵富,韩立德,吴跃进,郑乐娅,徐文章;耐低磷、低钾水稻品种的筛选[J];安徽农业科学;1996年03期
8 台德卫,张效忠,王元垒;全球水稻分子育种计划核心种质苗期耐低磷资源的鉴评与筛选[J];安徽农业科学;2003年06期
9 许兰珍;何永睿;姜国金;刘小丰;陈善春;;cDNA文库构建及其在植物抗性研究中的应用[J];安徽农业科学;2007年03期
10 朱河水;刘记强;杨国宇;仝千秋;张代;;原生质体融合技术的应用[J];安徽农业科学;2007年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张启军;李聪;虞德容;孙永华;吕川根;;抗病虫转基因广亲和水稻新资源的创新[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
2 王海光;李自超;;植物干旱胁迫应答基因及其产物研究进展[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
3 程林梅;孙毅;任永玲;;转基因耐盐植物研究进展[A];作物逆境生理研究进展——中国作物生理第十次学术研讨会文集[C];2007年
4 王才林;赵凌;朱镇;张亚东;林静;张所兵;陈涛;刘贤金;王冬兰;黄骏麒;龚蓁蓁;;用花粉管通道法将慈姑蛋白酶抑制剂(API)基因导入水稻获得转基因植株[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集[C];2006年
5 董硕;段红喜;赵书岗;赵悦平;张志华;;核桃花芽分化研究进展[A];第五届全国干果生产、科研进展学术研讨会论文集[C];2007年
6 钟淮钦;吴建设;黄敏玲;钟海丰;黄双龙;叶秀仙;;观赏向日葵花瓣发育过程中花色素苷及其相关生理物质积累的初步研究[A];中国观赏园艺研究进展 2009[C];2009年
7 高志民;牟少华;李雪平;潘会堂;;根据模式植物花发育的分子机制分析牡丹花型的演进规律[A];中国观赏园艺研究进展 2009[C];2009年
8 焦晓国;张国安;涂巨民;崔旭红;;转Bt基因水稻抗虫性测定[A];华中昆虫研究(第一卷)[C];2002年
9 张孝羲;刘向东;;二化螟种群猖獗和防治策略分析[A];水稻螟虫灾变规律及治理对策研讨会论文集[C];2001年
10 王才林;赵凌;朱镇;张亚东;林静;张所兵;陈涛;刘贤金;王冬兰;黄骏麒;龚蓁蓁;;用花粉管通道法将慈姑蛋白酶抑制剂(API)基因导入水稻获得转基因植株[A];植物分子育种——第四届全国植物分子育种学术研讨会论文集[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李笑一;拟南芥叶绿体LON4蛋白酶功能研究[D];兰州大学;2010年
2 李望丰;SsNHX1基因在紫花苜蓿中的表达及其耐盐性研究[D];东北师范大学;2010年
3 李瑞利;两种典型盐生植物耐盐机理及应用耐盐植物改良盐渍土研究[D];南开大学;2010年
4 陈洋;转cry1Ab/vip3H水稻抗螟性的鉴定及三类不同转基因水稻对其非靶标生物褐飞虱影响的评价[D];浙江大学;2010年
5 何影;引入甘氨酸甲基化合成甜菜碱途径提高黑麦草抗旱性研究[D];山东大学;2010年
6 姜伟;温室土壤次生盐渍化及其主要盐分对辣椒幼苗胁迫的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
7 何富强;核桃LFY同源基因的克隆和表达[D];河北农业大学;2011年
8 张来军;转褪黑素合成酶基因林烟草的产生及其抗逆性和外源褪黑素对离体植物生长的影响[D];西北大学;2011年
9 王延玲;新疆红肉苹果红色发育机理的初步研究[D];山东农业大学;2011年
10 冯守千;红梨着色机理的研究[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周勇;草鱼出血病转基因植物疫苗表达载体的构建[D];华中农业大学;2010年
2 刘鑫;利用分子标记辅助选择培育和评价三种BT基因(CRY1AC、CRY1C~*和CRY2A~*)抗虫水稻[D];华中农业大学;2010年
3 卢增斌;防治水稻螟虫单项技术措施的评价及储备技术—转基因水稻对非靶标生物影响的研究[D];华中农业大学;2010年
4 高胡静;百合离体条件下的耐盐性评价和EMS诱变育种初步研究[D];华中农业大学;2010年
5 朱冬梅;盐碱胁迫下星星草(Puccinellia tenuiflora)根部转录应答的初步分析[D];哈尔滨师范大学;2010年
6 马明勇;环境胁迫对莲草直胸跳甲生存与繁殖的影响[D];中南林业科技大学;2009年
7 杨洛滨;盐胁迫下5个树种根系活力及Na~+,K~+含量影响的研究[D];山东农业大学;2009年
8 于丽萍;玉米种子胚特异性启动子emb5的功能分析[D];山东农业大学;2010年
9 李树芬;甜菜碱提高转基因番茄耐热性研究[D];山东农业大学;2010年
10 李清清;苹果中六个胁迫相关的转录因子表达特性及与醇酰基转移酶基因表达相关性分析[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李继平;徐春波;王勇;李兴酉;赵海霞;;紫花苜蓿转基因技术研究进展[J];安徽农学通报;2008年15期
2 党卫玲;孙彦;杨青川;;草坪草转基因研究进展[J];北方园艺;2007年08期
3 李拥军,苏加楷;苜蓿地方品种遗传多样性的研究──RAPD标记[J];草地学报;1998年02期
4 张吉宇,袁庆华,张文淑,鲁挺;多花胡枝子基因组DNA提取与RAPD反应体系优化[J];草地学报;2004年03期
5 杨成民,王宏芝,孙振元,魏建华;利用基因枪共转化法获得转bar与P5CS基因黑麦草[J];草地学报;2005年01期
6 张吉宇;袁庆华;王彦荣;张文淑;;胡枝子属植物野生居群遗传多样性RAPD分析[J];草地学报;2006年03期
7 鱼小军,王彦荣,孙建华,王芳,刘志义;无芒隐子草和条叶车前种子萌发特性的研究[J];草原与草坪;2004年04期
8 郇庚年;;甘肃张掖主要野生草坪植物[J];草业科学;1989年05期
9 吴錡,胡鸢雷,倪挺,贾炜珑,林忠平;转基因草坪草的研究概况与展望[J];草业科学;2004年01期
10 陈福;范彦;秦华;;扁穗牛鞭草RAPD影响因素的研究[J];草业科学;2006年09期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 霍秀文;冰草组织培养再生体系建立及耐旱转基因研究[D];内蒙古农业大学;2004年
2 任清;早熟禾中DREB基因的克隆及特性分析[D];中国农业科学院;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 孙志民;冰草属植物的收集与遗传多样性研究[D];中国农业科学院;2000年
2 马媛媛;抗旱基因LEA的克隆及其序列解析[D];东北林业大学;2003年
3 胡繁荣;狗牙根农杆菌介导转化体系的优化及除草剂抗性基因bar的导入与应用[D];浙江大学;2004年
4 陈东;农杆菌介导的gshI和pcs基因转化翦股颖和烟草研究[D];浙江大学;2004年
5 梁蕊芳;利用基因枪轰击法将NHX1、CBF耐逆相关基因导入高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)[D];内蒙古农业大学;2005年
6 吴桂胜;黑麦草、剪股颖再生体系的建立及农杆菌介导cry8C基因的导入[D];南昌大学;2006年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 苏青峰;;草坪草转基因发展技术对社会的潜在影响[J];北方园艺;2011年23期
2 樊金娟;刘广文;阮燕晔;;冷季型草坪草基因转化研究进展[J];江苏农业科学;2009年04期
3 魏睿;许兴;麻冬梅;;草坪草转基因研究进展[J];农业科学研究;2011年02期
4 张吉宇;王彦荣;南志标;;相对定量和绝对定量—以CsSAMDC基因表达分析为例[J];中国生物工程杂志;2009年08期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 王康;董洁;周禾;;转基因技术对草坪草育种的影响[A];中国草学会草坪专业委员会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 王怡杰;转基因草地早熟禾(Poa pratensis L.)抗逆性研究[D];北京林业大学;2011年
2 安惠惠;农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖转化和表达的研究[D];甘肃农业大学;2011年
3 吴翔;匍匐翦股颖高效再生体系的建立及农杆菌介导的溶菌酶-GFP基因的转化[D];甘肃农业大学;2009年
4 魏学;无芒隐子草种子产量与植株密度的关系及坪用特性的研究[D];兰州大学;2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王娟;;草地早熟禾高效丛生芽体系的建立[J];草业与畜牧;2009年06期
2 张玉霞,李志刚,李美娟,杜晓艳;四种草地早熟禾抗盐碱生理生化特性的研究[J];中国农学通报;2004年05期
3 赵桂琴;早熟禾育种的研究进展与现状[J];甘肃农业大学学报;2000年02期
4 孙建华,王彦荣,郭玉霞;草地早熟禾种子产量构成因素的品种差异[J];应用生态学报;2002年08期
5 佘建明,张保龙,陈志一,倪万潮;草地早熟禾成熟胚离体培养植株再生技术的研究[J];草地学报;2003年01期
6 何春梅,胡林,张福锁,董爱香,边秀举;北京地区草地早熟禾的生长特性与养分吸收规律[J];中国农业科技导报;2003年02期
7 杨新林;;草地早熟禾根茎再生性在生产实践中应用[J];现代农业;2008年11期
8 赵桂琴,曹致中;草地早熟禾无融合生殖的细胞学鉴定[J];草业学报;1997年04期
9 晓红,刘及东;草地早熟禾宜牧性状的研究[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);1998年01期
10 张永亮,张淑艳,李志刚;草地早熟禾主要经济性状间的灰色关联分析[J];哲里木畜牧学院学报;1998年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 赵桂琴;曹致中;;草地早熟禾无融合生殖细胞学鉴定初探[A];中国草地科学进展:第四届第二次年会暨学术讨论会文集[C];1996年
2 李存福;李晓芳;贠旭疆;苏红田;;草地早熟禾种质资源考察与收集[A];中国草学会草坪专业委员会2010年学术年会论文集[C];2010年
3 杨晓华;杨燕;孙彦;;速效氮肥与缓释肥混施对夏季草地早熟禾的影响[A];中国草学会草坪专业委员会2010年学术年会论文集[C];2010年
4 李海霞;;草地早熟禾常见病害及其综合防治措施[A];2009北京生态园林城市建设[C];2010年
5 秦玉杰;赵筱萌;陈瑶;王树雪;赵晓燕;刘正坪;;菌肥灌根对草地早熟禾的促生与抗病诱导作用[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
6 闫洪唯;孟涛;李国卿;;草地早熟禾对腐霉枯萎病的抗性评价[A];中国风景园林学会2011年会论文集(下册)[C];2011年
7 樊文瑞;武勇;;草地早熟禾的养护管理及病虫害防治措施[A];全国园林植保第十三次学术讨论会论文摘要集[C];2004年
8 杨时海;马玉寿;施建军;董全民;王彦龙;王柳英;孙小弟;盛丽;;青海草地早熟禾(Poa pratensis L.cv.Qinghai)近10年的研究进展[A];2009中国草原发展论坛论文集[C];2009年
9 杨爱芳;王娟;王婷婷;何影;张举仁;;利用农杆菌介导法将热激蛋白基因hsp101转入草地早熟禾[A];2006年中国植物逆境生理生态与分子生物学学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
10 杨燕;杨晓华;孙彦;;不同遮荫强度对草地早熟禾草坪质量的影响[A];中国草学会草坪专业委员会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 大农;草地早熟禾[N];山西科技报;2002年
2 潘全山;草地早熟禾[N];农民日报;2001年
3 冯俊;自由三号草地早熟禾[N];中国花卉报;2004年
4 马其东;草地早熟禾的类型(下)[N];中国花卉报;2003年
5 程霞;大跃进草地早熟禾[N];中国花卉报;2004年
6 马其东;草地早熟禾的类型(上)[N];中国花卉报;2003年
7 马其东;草地早熟禾的类型(中)[N];中国花卉报;2003年
8 钱振权   ;草地早熟禾种子价涨四成 [N];中国花卉报;2003年
9 李保军;优秀草坪草种--草地早熟禾(一)[N];中国花卉报;2004年
10 李保军;优秀草坪草种--草地早熟禾(三)[N];中国花卉报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 段碧华;草地早熟禾高频再生体系的建立及基因枪导入甜菜碱脱氢酶基因的研究[D];北京林业大学;2005年
2 许立新;草地早熟禾适应干旱以及干旱后复水恢复机理研究[D];北京林业大学;2011年
3 胡龙兴;草坪草抗旱生理及相关基因的分析[D];上海交通大学;2010年
4 韩蕾;太空环境对草地早熟禾的诱变效应及其诱成突变体的生物学变化[D];中国林业科学研究院;2005年
5 邓小梅;乐东拟单性木兰、华木莲、红叶石楠‘红罗宾’的组织培养及快繁技术研究[D];南京林业大学;2004年
6 张晓波;草地早熟禾根际促生菌(PGPR)特性及根际微生物区系研究[D];北京林业大学;2008年
7 刘香利;小麦遗传转化体系建立及高分子量麦谷蛋白14亚基基因的转化[D];西北农林科技大学;2009年
8 何亚丽;冷季型草坪草耐热基因型的选育和水杨酸调控耐热性的机理[D];南京农业大学;2002年
9 柴琦;坪用草地早熟禾抗旱性评价及硅对减轻其水分胁迫效应的研究[D];兰州大学;2007年
10 张小猛;Nipradilol对视网膜神经节细胞保护作用的研究[D];吉林大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗莉;草地早熟禾再生体系的建立及其遗传转化的研究[D];北京林业大学;2005年
2 柴琦;坪用草地早熟禾不同品种扩展性比较研究[D];甘肃农业大学;2001年
3 朱钦;不同冠层结构对草地早熟禾(Poa pratensis)蒸散量及二氧化碳交换的影响[D];北京林业大学;2011年
4 花梅;栽培条件下不同菭草(Koeleria cristata(L.))种群生活史特征与抗旱特性的比较研究[D];内蒙古大学;2010年
5 祝长龙;哈尔滨市冷季型草坪草筛选及应用的试验[D];东北林业大学;2004年
6 刘帅;施肥对草地早熟禾草坪质量及土壤中硝态氮动态的影响[D];中国农业大学;2004年
7 牛海珍;VA菌根在草地早熟禾草坪草中应用的研究[D];东北林业大学;2006年
8 蔡丰;大庆地区草地早熟禾引种筛选及应用技术的研究[D];东北林业大学;2004年
9 孙碧坡;抗盐草地早熟禾高效转基因体系的研究[D];中国农业大学;2005年
10 刘迪;保水剂对草地早熟禾生长及抗旱性的影响[D];东北林业大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026