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《北京林业大学》 2005年
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芦荟次生代谢物质离体培养技术的研究

杨婷婷  
【摘要】:珍贵药用植物芦荟,含有以蒽醌类物质为主的次生代谢物质,具有极高的医疗、美容和保健价值。以芦荟为材料生产次生代谢物质具有广阔的开发前景。本文利用植物细胞组织培养技术,对库拉索芦荟的离体快繁培养、愈伤组织和悬浮细胞培养及葸醌类物质的含量和分步规律做了初步的研究,为大规模蒽醌类次生代谢物质离体培养提供依据。 外植体消毒以含有效氯1.5%的次氯酸钠溶液消毒15min(外植体长度2cm)和含有效氯2%的次氯酸钠溶液消毒20min(外植体长度2cm)的效果较好,成活率分别为84%和95%。增殖过程中BAP起主要作用。IBA的生根效果比NAA好,移栽后5个月成活率为90%。愈伤组织诱导的最佳外植体为2cm左右的茎段和茎尖,最佳培养基为ER+NAA15mg/L+2,4-D4.0mg/L+KT0.1mg/L+Sugar 30g/L(pH值为5.8、暗培养),出愈率最高为92.48%,添加Vc(5mg/L)能在一定程度上减轻褐化,添加AgNO_3(10mg/L)作用较大,能增大愈伤组织的生长量并改善愈伤组织生长状态,25d达到最大生物量20.8 mg/LDW;悬浮细胞生长的最佳培养基为ER+NAA 2.00 mg/L+KT 0.02 mg/L+Sugar45 g/L(pH值为5.8、暗培养),12d达到最大生物量22.83 mg/LDW。愈伤组织中蒽醌含量为0.134 mg/gFW,悬浮细胞中葸醌含量较高,接近叶片中的葸醌含量,为0.201 mg/gFW。蒽醌含量的积累期主要是在愈伤组织和悬浮细胞的生长平稳期和静止期。利用石蜡切片和组织化学定位相结合的方法对蒽醌类物质在库拉索芦荟叶片及愈伤组织中分布定位的研究结果表明,叶片中葸醌类次生代谢物质主要分布在同化薄壁组织中的芦荟素细胞及其胞间隙中,储水组织中没有蒽醌类物质的分布,愈伤组织中主要分布在少数大型薄壁细胞中。
【学位授予单位】:北京林业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S567.239

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