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《北京林业大学》 2005年
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根癌农杆菌介导的AP1基因转化菊花的研究

吕晋慧  
【摘要】:菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.)是我国的传统名花和四大切花之一,花期相对集中,大都在秋季。春菊、夏菊品种少。花分生组织特征基因AP1的异源表达可以加快花发育进程,使菊花花期提前。利用基因工程技术导入AP1基因改变现有观赏性较高的菊花花期有重要意义,国内外尚未见相关报道。本研究是在国家科技部转基因研究与开发专项(JY03-B-28)项目支持下完成的。作者通过近4年的研究从9个品种中筛选出三个菊花品种‘紫妍'、‘黄秀芳'、‘玉人面'的高频再生体系。建立并优化了遗传转化体系,首次把花分生组织特征基因AP1转入地被菊‘玉人面'中,获得了11株转基因植株,并在此基础上筛选出两株花期提前的株系。主要研究结果如下: 1.以MS为基本培养基,采用了4种不同类型的生长调节剂组合,从中筛选出适合菊花叶片外植体再生的生长调节剂组合是6-BA和NAA,并在此基础上比较探讨了不同激素配比、不同基因型、不同生理状态的叶片、外植体类型、继代培养时间及添加剂AgNO_3等因素对不定芽再生的影响。研究结果表明:菊花再生对基因型具有依赖性,9个品种中只有3个品种:‘紫妍'、‘玉人面'、‘黄秀芳'可以高频再生,再生率分别为93%、96%、95%;不同生理状态的叶片再生能力不同,15~25d苗龄的菊花无菌苗中上部充分展开的幼嫩叶片再生率最高;不同菊花品种的同种外植体再生能力不同,同品种的不同外植体再生能力也不同,其中‘紫妍'、‘黄秀芳'、‘玉人面'、‘L12M57'的叶片再生能力显著高于‘神马'叶片再生能力。‘黄秀芳'的茎段、叶片、叶柄均可高频再生,其它品种的叶片再生能力高于其它外植体的再生能力;继代培养时间影响菊花叶片外植体的形态发生能力的保持或丧失。总体规律是随着继代次数增加叶片外植体形态发生能力下降。但不同品种保持高的形态发生能力的时间不同;AgNO_3对不同品种的再生率影响不同,但都未能提高再生率和不定芽数量;不适宜的培养条件和不同来源的外植体影响‘紫妍'叶片的再生能力。Vc、活性炭未能克服‘紫妍'外植体的褐化现象,而高浓度的生长素(NAA)有效抑制紫妍外植体的褐化现象,再生率提高。 2.构建了植物表达载体pBI-AP1,并通过液氮冻融法将植物表达载体pBI-AP1导入农杆菌EHA105、LBA4404中。 3.研究讨论了不同菊花品种对不同抗生素的敏感性,研究认为10mg/L的G418是菊花品种‘紫妍'、‘玉人面'叶片外植体筛选培养的临界耐受浓度。20mg/L的卡那霉素是‘黄秀芳'叶片筛选培养的临界浓度和生根筛选的临界浓度。400mg/L以上浓度抑菌素均不同程度影响叶片外植体的再生率和平均再生不定芽数,其中头孢霉素比羧卞青霉素抑制作用强。两种抑菌抗生素对菊花苗生长的影响总体规律是随抗生素浓度的递增,菊花苗生根数量递增、根长递减、苗高降低。其中头孢霉素对菊花的抑制
【学位授予单位】:北京林业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S682.11

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前4条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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3 刘石娟;郑庆祥;;甘露碱合成酶基因启动子研究进展[J];山东农业科学;2006年06期
4 郭淼;张廷婷;高建强;崔德才;;拟南芥PLDα1突变体的繁殖及形态和生理特性分析[J];山东农业科学;2007年02期
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 任洪艳;孙霞;郑成淑;束怀瑞;;利用cDNA-AFLP技术筛选菊花开花相关基因[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
4 胡昊;熊威;毛静;王彩云;;蚜虫高感大菊品种叶片离体再生体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 程潇;水稻细胞分裂素双元信号系统分析及反应调节因子的分子调控研究[D];安徽农业大学;2010年
2 曾建新;拟南芥隐花素CRY1在亚细胞结构的功能分析及激活标签突变体库的构建[D];湖南大学;2010年
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9 孙宇涵;秋水仙素诱导银杏2n雄配子低得率的机理研究[D];北京林业大学;2011年
10 张荻;百子莲花芽分化及开花机理研究[D];东北林业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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6 于军伟;苹果α-法尼烯合成酶基因转化番茄研究[D];山东农业大学;2010年
7 任勇攀;外源RNA导入普通小麦中国春后的变异分析[D];山东农业大学;2009年
8 陈鹏彦;朝鲜野菊再生系统建立的研究[D];辽宁师范大学;2010年
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑丽;根癌农杆菌介导SAG_(12)-ipt和3DN-iaaL基因转化切花菊及抗早衰研究[D];西南农业大学;2003年
2 刘军侠;转基因741杨的抗虫效应及生态安全性评价[D];东北林业大学;2004年
3 马月萍;甘菊LEFAY同源基因的克隆与表达分析[D];北京林业大学;2005年
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6 吴月亮;根癌农杆菌介导的PEAMT基因转化菊花的研究[D];北京林业大学;2006年
7 王冬梅;毛白杨花芽分化规律与开花调控的分子基础研究[D];北京林业大学;2007年
8 马丽萍;基于水稻全长cDNA的大豆种质创新技术体系的构建[D];中国农业科学院;2006年
9 赵宏波;东亚春黄菊族系统演化及栽培菊花与矶菊属间杂交研究[D];南京农业大学;2007年
10 王晓宇;Harpin_x蛋白定点突变和密码子优化研究[D];南京农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 于鑫;花期可控型菊花新种质的研究[D];山西大学;2011年
2 何淼;露地栽培菊新品种的选育[D];东北林业大学;2001年
3 晁岳恩;根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入[D];西南农业大学;2002年
4 牛卫宁;银杏果仁中抗菌蛋白的分离纯化及性质鉴定[D];西北农林科技大学;2003年
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7 刘军;菊花再生体系的建立及农杆菌介导绿色荧光蛋白(GFP)基因转化的研究[D];山东农业大学;2004年
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9 卢毕生;石斛兰高效再生体系的建立与抗冻蛋白(AFP)基因转化的研究[D];华南热带农业大学;2005年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 张文;李振萍;王艳;徐娜;姜长阳;;泥胡菜的组织培养及高效无性系建立的研究[J];安徽农业科学;2009年06期
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 牛雅静;李青;戴思兰;;切花菊‘神马'和‘黄秀芳'成熟花瓣再生体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
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中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【相似文献】
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6 徐清燏;5个重要菊花品种高效不定芽再生体系的研究[D];北京林业大学;2005年
7 晁岳恩;根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入[D];西南农业大学;2002年
8 任永霞;利用农杆菌介导法将类胡萝卜素合成酶基因LycB导入番茄、菊花的研究[D];中国人民解放军军需大学;2003年
9 田素波;菊花开花时间基因CmCO和CmFT的克隆与表达分析和遗传转化[D];山东农业大学;2011年
10 刘彦泓;雪花莲凝集素基因转化菊花及转基因植株抗蚜性研究[D];辽宁师范大学;2003年
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