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《北京林业大学》 2006年
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胡杨再生体系的建立及rolB-pttGA20ox基因的遗传转化研究

丁霞  
【摘要】: 本研究以胡杨当年生枝条的带芽茎段为外植体,首先建立了它的离体快繁及植株再生体系,并就植物生长调节剂等因素对胡杨叶片再生不定芽的影响进行了详细的研究;然后利用NPTⅡ筛选基因对影响根癌农杆菌介导胡杨遗传转化的条件进行了深入探索,通过优化转化条件,建立了胡杨遗传转化系统;最后在此基础上,进行rolB-pttGA20ox双价基因的转化,并由PCR、PCR-Southern杂交分子检测,验证rolB-pttGA20ox基因的插入情况。 研究结果摘要如下: 1.胡杨组培再生体系的建立 消毒的最佳方法为:夏季采集的材料: 70%的酒精浸泡30sec后,以0.1%氯化汞分别灭菌7min、8min;初春水培枝条:试剂同上,茎尖灭菌0.5min,茎段灭菌1.0min。最适宜的启动培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+糖20 g/L为增殖培养的最佳配方,生根培养的最适培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+糖25g/L+琼脂6g/L+AC 0.2 g/L,生根率达到81%。移栽炼苗以蛭石:珍珠岩(2:1)或者沙子:土壤(1:1)作为最佳基质。 2.在组培中黄化现象产生的规律以及避免的方法 在一个继代周期内,随着时间的推移,试管苗的黄化率越来越高,整体呈现线性上升的趋势;经生理生化指标研究发现,当继代时间超过20d后,叶绿素含量尤其以叶绿素a的降幅较大,建议可以接种20d为一个继代周期;ABA为IAA、ZR的拮抗物,它的消长过程大体上与生长过程是相反的;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对蛋白质进行分析,发现黄化试管苗电泳谱带均出现缺失等异常现象。这说明黄化苗在基因表达调控上出现差异,其内部机制可能已发生变化。研究影响胡杨黄化率的培养条件因子发现:培养基的pH值在6.0~7.0之间、昼夜变温处理、不同波段的光质中以蓝光对降低胡杨黄化率有较好效果。 3.胡杨遗传转化体系的建立 胡杨叶片再生的最适培养基是MS+BA0.5mg/L+NAA0.1~0.2mg/L+腺嘌呤40mg/L+水解乳蛋白500mg/L +白砂糖25g/L+琼脂6.0g/L,再生频率达100%;叶片培养的最佳取材位置是自茎尖展叶始第1~3片叶;叶片正面向上或正面向下接种培养,对其
【学位授予单位】:北京林业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S792.11

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张桂花,王洪梅,王连祥;牡丹组织培养技术研究[J];山东农业科学;2001年05期
2 潘磊庆,屠康,贾明敏,陆兆新;臭氧水处理对芹菜保鲜效果的研究[J];安徽农业大学学报;2004年03期
3 朱大保;国外杨树组培微繁技术的进展[J];北京林业大学学报;1990年01期
4 丁霞,陈晓阳,李云,李伟;胡杨叶片不定芽再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2003年02期
5 张平冬,康向阳,高鹏,韩锦;胡杨离体培养分化增殖途径的比较研究[J];北京林业大学学报;2003年06期
6 罗晓芳,田砚亭,李云,牛辰;金丝小枣组织培养快速繁殖的研究[J];北京林业大学学报;1996年02期
7 郝贵霞,朱祯,朱之悌;毛白杨叶片组培再生芽的玻璃化问题探讨[J];北京林业大学学报;1999年01期
8 管志文,张清杰,庄楚雄,黄自然,谭智达,孔令汶, 陈爱玉,倪国孚;农杆菌携带柞蚕抗菌肽基因转入桑树的研究[J];蚕业科学;1994年01期
9 王勇,陈爱玉,夏志松,李雪明,倪国孚;抗生素对桑树外植体生长与分化的影响[J];蚕业科学;1996年02期
10 刘桂丰,杨传平,温绍龙,刘关君,王玉霞;盐逆境条件下三个树种的内源激素变化[J];东北林业大学学报;1998年01期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 郑丽;根癌农杆菌介导SAG_(12)-ipt和3DN-iaaL基因转化切花菊及抗早衰研究[D];西南农业大学;2003年
2 吴延军;桃组织培养及遗传转化的研究[D];浙江大学;2004年
3 尹淑萍;草莓栽培品种离体再生及遗传转化的研究[D];中国农业大学;2004年
4 李伟;转双价基因促进植物生根及顶端优势的研究[D];北京林业大学;2004年
5 梁机;转rolB基因改良毛白杨生根能力的研究[D];北京林业大学;2004年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 范志强,杜希华,蹇兆忠,李景涛,解孝满;辣椒组织培养中褐变问题的研究[J];山东农业科学;2000年06期
2 王照红,于振博,杜建勋,孙日彦,梁明芝;桑树保护研究的现状及展望[J];山东农业科学;2005年01期
3 张海燕;张立明;王庆美;邢同胜;李爱贤;侯夫云;董顺旭;;甘薯耐盐性及遗传转化研究进展[J];山东农业科学;2007年02期
4 陈奕吟;陈玉珍;;低温锻炼对胡杨愈伤组织抗寒性、可溶性蛋白、脯氨酸含量及抗氧化酶活性的影响[J];山东农业科学;2007年03期
5 王照红;衣葵花;周象海;杜建勋;孙日彦;李竹林;;几种药物抑制桑树组培苗褐化的研究[J];山东农业科学;2008年07期
6 孙庆春;郑成淑;丰震;;菊花玻璃化苗与正常苗的生理特性比较[J];山东农业科学;2009年05期
7 魏国芹;戴洪义;孙玉刚;梁美霞;安淼;;榅桲离体培养繁殖的研究[J];山东农业科学;2010年01期
8 张晓东;李利斌;宋宜现;李化银;刘立峰;高玲;高建伟;;大白菜高效稳定遗传转化体系的建立[J];山东农业科学;2010年02期
9 孙洪雁;孙清荣;单公华;刘庆忠;周广芳;;鲁枣1号组织培养和植株再生体系研究[J];山东农业科学;2012年01期
10 赵月玲,夏海武,万永霞,马秀兰,李芳;西瓜茎尖快繁技术及其问题探讨[J];山东农业科学;1999年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈洁敏;周玉卿;赵九洲;种楠;;AC、HY和PN对野生四季兰迁地保护繁殖的应用效果研究[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
2 刘建福;李雪;王明元;黄雨花;范燕萍;;‘飞来凤'蔓绿绒的组织培养与快速繁殖[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
3 黄自然;张卫民;黄亚东;;蚕抗菌肽研究开发三十年的回顾与展望[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
4 李军;刘喜才;张丽娟;张文英;李长辉;曹淑敏;;土壤疏松性对马铃薯产量的影响及其生理机制[A];中国马铃薯学术研讨会与第五届世界马铃薯大会论文集[C];2004年
5 秦文;辛松林;肖岚;薛文通;;芹菜贮藏品质变化与介电特性关系的研究[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(三)[C];2007年
6 师校欣;陈四维;马宝焜;高仪;;苹果砧木离体培养中玻璃化问题的研究[A];中国园艺学会成立六十周年纪念暨第六届年会论文集(Ⅰ果树)[C];1989年
7 王然;戴洪义;周爱芹;孙太娟;斑玉秋;;矮樱桃的茎尖培养与快速繁殖[A];中国园艺学会首届青年学术讨论会论文集[C];1994年
8 牟咏花;阙瑞芬;张德威;;不同形态和浓度铁盐对基质培番茄生长发育的影响[A];中国园艺学会首届青年学术讨论会论文集[C];1994年
9 高丽红;李式军;裴孝伯;;生菜根系活力对缓解地上部高温伤害的机理[A];中国园艺学会首届青年学术讨论会论文集[C];1994年
10 郭志雄;潘东明;;李的坐果机理及调控研究现状与展望[A];中国科协第3届青年学术年会园艺学卫星会议暨中国园艺学会第2届青年学术讨论会论文集[C];1998年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 马英姿;药用植物蚬壳花椒化学成分分析及繁殖技术研究[D];中南林业科技大学;2010年
2 黄志;丛枝菌根真菌对甜瓜抗旱性的生理效应及分子机制的研究[D];西北农林科技大学;2010年
3 孙健;胡杨响应盐胁迫与离子平衡调控信号网络研究[D];北京林业大学;2011年
4 蔡肖;青杨原生质体培养及叶片离体染色体加倍研究[D];北京林业大学;2011年
5 姜中珠;逆境条件下植物苗期适应性研究[D];东北林业大学;2009年
6 赵鑫;优质蓝莓转LEA基因及耐寒性分析研究[D];东北林业大学;2011年
7 艾育芳;早晚熟油菜成花机理的初步研究[D];福建农林大学;2011年
8 袁飞荣;转rol ABC基因枳橙砧木的评价[D];湖南农业大学;2011年
9 王士杰;茉莉酸甲酯诱导的人参发根培养及SSH文库构建研究[D];吉林农业大学;2011年
10 张玉;农杆菌介导菊苣遗传转化体系的建立及富硫氨基酸基因的导入和表达定位[D];四川农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙源蔚;中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导、保存及植株再生研究[D];华中农业大学;2010年
2 刘冉冉;枫香遗传转化体系的优化及转化PaFT基因的研究[D];华中农业大学;2010年
3 殷巍;澳大利亚扇子花Scaevola crassifolia的繁殖技术研究[D];华中农业大学;2010年
4 梁梅荣;澳大利亚扇子花Scaevola nitida R.Br的组织培养研究[D];华中农业大学;2010年
5 闫恒超;棉花纤维发育伸长期和次生壁加厚期数字表达谱分析[D];华中农业大学;2010年
6 卢小三;两个杨树无性系再生体系的建立及抗虫基因Cry1C+9C转化的初步研究[D];华中农业大学;2010年
7 周莹;佛手的引种栽培及繁殖技术的研究[D];中南林业科技大学;2009年
8 刘小云;楸树优良类型—圆基长果楸组织培养技术的研究[D];安徽农业大学;2010年
9 杨珍珍;桉树在合肥地区的引种栽培与抗寒性研究[D];安徽农业大学;2010年
10 李晓东;茶树体细胞胚发生的影响因素及超微结构和几种内含物质变化的研究[D];山东农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙清荣,孙洪雁,石荫坪;青州蜜桃、冬桃成熟胚子叶再生不定植株的研究[J];山东农业科学;2000年02期
2 万娅琼,夏静,姚自鸣;臭氧及负氧离子技术在果蔬贮藏保鲜上的应用[J];安徽农业科学;2001年04期
3 裴保华,郑均宝;用NAA处理毛白杨插穗对某些生理过程和生根的影响[J];北京林学院学报;1984年02期
4 朱大保;国外杨树组培微繁技术的进展[J];北京林业大学学报;1990年01期
5 田砚亭,王红艳,牛辰,罗晓芳;枣树脱除类菌原体(MLO)技术的研究[J];北京林业大学学报;1993年02期
6 高亦珂,赵勃,丁国勋,张启翔;菊花茎叶外植体再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2001年01期
7 吴鸿锦,刘志光,韩克展,许鹏;新杂交种沙毛杨的选育[J];北京林业大学学报;1996年03期
8 张金凤,朱之悌,张志毅;黑白杨派间杂交试验研究[J];北京林业大学学报;1999年01期
9 郑均宝,张玉满,杨文芝,裴东,田颖川,莽克强;741杨离体叶片再生及抗虫基因转化[J];河北农业大学学报;1995年03期
10 李丹青,徐飞,黄自然,陈章良;人工合成柞蚕抗菌肽D基因转入根癌农杆菌[J];蚕业科学;1990年02期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 郭维明;陈素梅;安小芹;蒋甲福;;中国切花采后生理与技术研究近览[A];中国花卉科技进展——第二届全国花卉科技信息交流会论文集[C];2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 赵华燕;毛白杨木质素合成相关基因分离和转基因杨树植株获得[D];新疆农业大学;2001年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张录霞;郝青南;马超;段小瑜;牛建新;马兵钢;;加工番茄遗传转化再生体系的建立[J];西北农业学报;2008年03期
2 李大超;王义;蒋世翠;韩秀文;张美萍;;黄芪遗传转化受体系统的建立及aFGF转化黄芪的研究[J];中国中药杂志;2009年19期
3 贾婉琪;王玉富;郝冬梅;邱财生;郭媛;邓欣;龙松华;陈信波;;亚麻再生体系建立与遗传转化研究进展[J];中国麻业科学;2011年03期
4 杨扬;何胜江;吴凯;李兴美;付婷婷;;高羊茅再生体系及其遗传转化研究进展[J];现代农业科技;2009年01期
5 赵福永;;棉花茎尖培养及高效植株再生体系的建立[J];长江大学学报(自然科学版)农学卷;2008年04期
6 余永亮;梁慧珍;王树峰;练云;位艳丽;王庭峰;;中国转基因大豆的研究进展及其产业化[J];大豆科学;2010年01期
7 林凤,张春宇,王洪岩,陈丹,石太渊;抗生素对高粱茎尖再生的影响及再生体系的建立[J];中国生态农业学报;2005年02期
8 王华,张继澍,卢江,马春花;葡萄基因工程研究进展[J];西北植物学报;2004年09期
9 信金娜,韩烈保,张华方;转基因技术在草地早熟禾育种中的应用及展望[J];草业科学;2004年06期
10 武术杰;李邱华;;矮牵牛Tidal Wave品种遗传转化受体再生体系的建立[J];东北林业大学学报;2007年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 钱雪艳;郭东全;杨向东;赵桂兰;;大豆体细胞胚性愈伤悬浮培养体系的建立及超声介导遗传转化的研究[A];全国植物分子育种研讨会摘要集[C];2009年
2 王丽娜;明军;刘春;穆鼎;黄三文;;百合遗传转化再生体系的建立[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
3 刘航空;张荷;韩明玉;王安柱;赵彩平;田玉命;;桃叶片及胚性器官再生研究[A];中国园艺学会桃分会第三届学术研讨会论文集[C];2011年
4 沈晓岚;王炜勇;俞信英;;观赏凤梨国内外研究进展[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
5 覃铭;李玲;;花生再生体系的建立及AhNCED1基因过表达遗传转化[A];2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编[C];2007年
6 姚娜;韩烈保;曾会明;徐冰;;草坪草转基因育种技术的应用和发展[A];中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会论文集[C];2007年
7 黄文江;刘庆忠;;果树作物叶片再生的研究进展[A];植物组织培养与脱毒快繁技术——全国植物组培、脱毒快繁及工厂化生产技术学术研讨会论文集[C];2001年
8 关宁;李聪;;γ-zein基因改良紫花苜蓿品质的研究初报[A];中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会论文集[C];2007年
9 赵寿经;杨振堂;李昌禹;藏埔;赵家平;;发根农杆菌介导的人参遗传转化及人参皂甙工厂化生产[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
10 闫硕;宋玉;王广东;;农杆菌介导的观赏向日葵高效遗传转化体系的建立[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 通讯员 陈永刚;巴楚县 大力饲养“胡杨生态”鸡[N];喀什日报(汉);2008年
2 王艳梅;金秋踏访胡杨节[N];中国航天报;2001年
3 记者 谢国苍;万余株胡杨“安居”石市[N];宁夏日报;2009年
4 冯东良 刘谦 本报特约记者 朱建军;“胡杨精神”进课堂[N];解放军报;2010年
5 本报记者 李易峰;做一棵大漠胡杨[N];国家电网报;2010年
6 本报记者 邱曙东;忠诚,一如昆仑胡杨……[N];解放日报;2009年
7 本报记者 周海霞;“长枪短炮”传扬胡杨美景[N];巴音郭楞日报;2009年
8 本报记者 薛志刚 马晓红 阮景云;戈壁胡杨[N];哈密报(汉);2009年
9 本报记者 董博;戈沙:胡杨的品格[N];吉林日报;2008年
10 特约通讯员 王忠辉 云俊德 本报特约记者 覃照平;胡杨哨兵:边防军人的“精神名片”[N];解放军报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 丁霞;胡杨再生体系的建立及rolB-pttGA20ox基因的遗传转化研究[D];北京林业大学;2006年
2 张明洲;农杆菌介导高梁转化体系的建立与Bt(Bacillus thuringiensis)抗虫基因的导入[D];浙江大学;2002年
3 王萍;大豆组织培养体系优化与双价抗虫基因遗传转化的研究[D];东北农业大学;2002年
4 李杰;渗透胁迫信号传导关键基因的克隆及DREB1A基因对水稻的遗传转化[D];东北农业大学;2003年
5 武丽敏;小麦遗传转化参数优化及其应用研究[D];四川农业大学;2005年
6 Abdul Razzaq;[D];河北农业大学;2005年
7 张磊;几种草坪草转基因及体细胞无性系变异的研究[D];安徽农业大学;2005年
8 杨怀义;草莓果实膜联蛋白基因的cDNA克隆及其遗传转化的研究[D];沈阳农业大学;1999年
9 梁机;转rolB基因改良毛白杨生根能力的研究[D];北京林业大学;2004年
10 霍秀文;冰草组织培养再生体系建立及耐旱转基因研究[D];内蒙古农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 卢毕生;石斛兰高效再生体系的建立与抗冻蛋白(AFP)基因转化的研究[D];华南热带农业大学;2005年
2 郭晓琳;大麦成熟胚高效再生体系的建立和改良直链淀粉的转基因研究[D];华中农业大学;2005年
3 许继飞;欧美杨108再生体系的优化及转天花粉蛋白基因的研究[D];东北林业大学;2006年
4 郁萌萌;光叶楮再生体系的建立及农杆菌介导的AtNHX1基因转化光叶楮的初步研究[D];南京师范大学;2005年
5 刘珊;Vgb基因转化薰衣草愈伤组织及转化体耐涝性研究[D];新疆农业大学;2009年
6 张亚林;桃再生体系的优化与反义PG基因遗传转化的研究[D];甘肃农业大学;2010年
7 王晓春;大豆体细胞胚再生体系的优化与双价抗虫基因的遗传转化[D];中国人民解放军军需大学;2003年
8 彭细桥;番茄高效离体再生体系的建立与番茄COI1同源基因的转化[D];湖南农业大学;2005年
9 宋刚;油离体再生体系建立及遗传转化的初步研究[D];福建农林大学;2001年
10 聂明珠;白桦再生体系的优化及相关材质改良基因4CL、UGPA、UGPase的遗传转化[D];东北林业大学;2003年
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