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《北京林业大学》 2009年
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几种百合组织培养及多倍体育种技术的研究

段超  
【摘要】: 百合(Lilium spp.)是单子叶植物亚纲百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生球根植物,适合用作切花、盆花和园林布景,有很高的观赏和商业价值,深受人们的喜爱。开展多倍体育种,是提高百合观赏品质和抗性的一条非常重要的途径。我国有着丰富的野生百合资源,却尚未充分开发利用,本试验对10种中国原产野生百合和进口商品品种的组织培养体系进行了比较研究,并利用秋水仙素和oryzalin对其中观赏价值较高而未见成功诱导多倍体报道的野生种青岛百合(Lilium tsingtauense)、通江百合(Lilium sargentiae)、细叶百合(Lilium pumilum)进行了多倍体诱导,希望可以得到花径更大、植株更强健的百合新种质,新材料,丰富我国百合资源的基因库,为百合的倍性育种和我国拥有自主知识产权的百合品种的培育奠定基础,并对目前是市场上应用广泛但抗性较差的百合品种‘西伯利亚'(‘Siberia')进行多倍体诱导,期望可以获得观赏价值高、抗性强的新种质。主要结果如下: (1)通过研究,建立了10种百合的离体再生体系。‘西伯利亚'(‘Siberia')、‘元帅'(‘Acapulco')、‘黄色风暴'(‘Yelloween')最适诱导分化和增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L,诱导率、增殖系数分别达到92.16%、90.09%、85.56%,3.87、3.54、3.70。有斑百合(L.concolor var.pulchellum)、细叶百合和最适诱导分化和增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率和增殖系数分别为68.26%、60.21%,4.34、4.56。‘白天堂'(‘White-heaven')最适诱导分化培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率为80.43%,兰州百合(L.davidii var.unicelor)最适诱导分化培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L,诱导率为95.23%,卷丹(L.lancifolium)、通江百合珠芽最适诱导分化培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率为87.44%、92.00%。青岛百合、兰州百合最适增殖培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系数分别为1.49、5.97,卷丹最适增殖培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L,增殖系数为2.48,通江百合和‘白天堂'最适增殖培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系数为3.02、3.00。1/2MS+NAA0.1mg/L为较适宜的百合生根培养基。 (2)对有斑百合、细叶百合、通江百合、‘白天堂'进行了愈伤组织的诱导试验。得到有斑百合、细叶百合鳞片愈伤发生的最佳培养基为MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L,出愈率为57.00%、60.67%通江百合和‘白天堂'鳞片愈伤发生的最佳培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L,出愈率为60.93%、67.6%。通过三因素三水平正交试验得到MS+KT1.5mg/L+2,4-D1mg/L+NAA1.5mg/L为细叶百合、通江百合最适叶片愈伤组织的培养基,其中KT浓度对叶片愈伤组织的诱导影响最大。有斑百合、细叶百合愈伤组织最适增殖分化培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L,通江百合和白天堂合愈伤增殖分化的最佳培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。 (3)秋水仙素和oryzalin浸泡法对进行百合多倍体诱导的研究表明:为尽量提高诱变植株的成活率,0.02%秋水仙素加2%DMSO、处理24h,0.006%Oryzalin加2%的DMSO、处理24h,为百合染色体加倍较为适宜的浓度和时间。诱变率分别为:‘西伯利亚'22.22%、18.89%,青岛百合28.89%、18.33%,通江百合15.56%、11.11%,细叶百合11.11%、8.89%。Oryzalin诱变率相对较低,但对植物毒害也较小,诱变后植株死亡率低,可替代秋水仙素诱导百合产生多倍体。多倍体在表观形态上均与正常植株有较大差别,表现为巨大粗厚,可作为多倍体早期鉴定的依据。采用流式细胞仪分析鉴定多倍体所需试材少,速度快,检测较为准确,适用于多倍体的鉴定。通过对‘西伯利亚'、青岛百合、细叶百合、通江百合进行诱导并鉴定,证实获得多倍体株系。
【学位授予单位】:北京林业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S682.29

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