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《北京协和医学院》 2010年
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A549细胞和Hep-2细胞表面糖链类型鉴定及其与H5N1型禽流感病毒结合的特性

黄丽  
【摘要】:背景:高致病性禽流感病毒H5N1可以感染人类并引起致命的呼吸道疾病。一旦禽流感病毒获得在人际传播的能力将很可能导致人类流感大流行。一般认为禽流感病毒对人类上呼吸道细胞亲和力低,可能是限制H5N1病毒人与人之间传播的因素。然而,禽流感H5N1病毒对人类呼吸道的亲嗜性和致病机理迄今仍不清楚。因此,研究H5N1病毒对人呼吸道上皮细胞的侵袭作用,对理解禽流感病毒的传播和致病具有重要的意义。 目的:建立Hep-2细胞和A549细胞模型,研究H5N1型禽流感病毒对人呼吸道的亲嗜性和黏附作用。 方法:用凝集素染色技术和流式细胞术检测A549细胞和Hep-2细胞表面流感病毒唾液酸受体SAa2,3Gal和SAa2,6Gal的表达。用FITC标记的H5N1病毒和间接免疫荧光法,检测H5N1病毒进入细胞情况。用western blotting法分析病毒进入A549细胞和Hep-2细胞的效率。用MTT法检测H5N1病毒处理后细胞的存活状况。结果:A549细胞和Hep-2细胞表面有大量SAa2,3Gal链,但SAa2,6Gal链含量却很少。Hep-2细胞表面SAa2,3Gal受体的表达水平高于A549细胞。H5N1病毒能够进入A549细胞和Hep-2细胞,而且H5N1病毒对A549细胞的亲嗜性更强。与A549细胞相比,Hep-2细胞对H5N1流感病毒诱导的细胞死亡更敏感。H5N1诱导的细胞死亡是非Caspases依赖性的,并且与PI3K活化无关。
【学位授予单位】:北京协和医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S852.65

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