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《北京协和医学院》 2010年
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中国生殖器疣和子宫颈癌HPV感染型别流行病学研究

陈汶  
【摘要】:研究背景HPV (Human Papillomavirus人乳头状瘤病毒)病毒是危害人类健康的重要感染因素之一,它是引发生殖器疣和子宫颈癌的主要病因。2003年中国疾病预防控制中心发表数据显示,生殖器疣新发病例数为154,922,发病率为12.02/10万。世界卫生组织IARC 2004年发表的数据显示中国每年有45689例新发子宫颈浸润癌,占全世界子宫颈新发病例的十分之一。随着医学科技进展,已经研发出有效的针对HPV感染的基因重组疫苗(recombinant vaccine),目前疫苗主要针对的HPV型别包括HPV16、18、6和11型。由于还没有采用标准化的、高灵敏度检测方法获得全国HPV型别分布的流行病学数据,尚不能对该疫苗推广后可能产生的预防效果做出准确的评价。 研究目的在中国不同地区开展以医院为基础的现况研究,调查具有生殖器疣、浸润性子宫颈癌(ICC)和CIN2以上的病例中HPV感染的流行情况和HPV的型别分布。 材料与方法采用分层抽样方法选择研究对象,按照地理分布将全国分为东北、华北、西北、华中、西南、华南和华东7个大区,在每个大区遴选合作医院,共选择18家医院提供确诊生殖器疣病人及其标本和19家医院提供确诊子宫颈病变病人及其组织蜡块。 疣体组织标本的HPV型别判定:采用酚-氯仿方法抽提DNA,使用通用引物MY09/11,MY09/GP5+和GP5+/GP6+以及巢式PCR扩增140-bp目标DNA。电泳分离后直接测序,如果是单一感染,直接用BLAST 2.0判定HPV型别;如果是多重感染,使用T-vector转化E.coli.,随机挑选五个克隆后测序,判定HPV型别。 宫颈病变组织蜡块标本的HPV型别判定:用三明治切片法,第一张和最后一张蜡卷用于HE染色,中间蜡卷用于DNA提取。HE切片由病理专家组完成诊断。将经过病理确认合格的蜡卷与蛋白酶k溶液混合,70度过夜消化,以SPF10为引物扩增,用DNA酶免疫分析(DEIA)判定是否存在HPV感染,用SPF10 LiPA25 (version1)试剂盒对扩增产物进行型别判断。 结果本研究获得1295例确诊的生殖器疣病人及其福尔马林固定的标本。因PCR扩增抑制或没有提取出足够量DNA,排除290例病人的标本,余下1005例病人标本符合本次实验的要求,用于本次的生殖器疣HPV感染的分析研究。生殖器疣患者的平均年龄为32岁,女性占55.3%(556/1005)多于男性的44.7%(449/1005)。1005例生殖器疣病人中HPV阳性者为891例,感染率为88.7%。在HPV阳性病例中,HPV6和HPV11分别占46.6%和42.4%,是最常见的HPV型别,其次是HPV16占11.8%;其它型别在HPV阳性病例中的比例均小于1%。891例病人中,单一型别HPV阳性率为97.2%,而多重感染比例仅为2.8%。多重感染的型别包括HPV6、11和16。HPV6、11和16型感染占全部生殖器疣HPV阳性病例的97.9%。未发现不同大区、城市和农村、不同性别和年龄组间HPV6和11型别分布存在统计学意义的差别。 本次研究共获得664例ICC病人,其中鳞癌(SCC)630例、腺癌(ADC)34例,并获得CIN 2/3病人569例。SCC病人HPV感染率为97.6%,ADC为85.3%,CIN2/3为98.9%。HPV16(76.7%)和HPV18(7.8%)是SCC病人中最常见的感染型别,两者合计占SCC病人的84.0%;其次是HPV31占3.2%,HPV52占2.2%,HPV58占2.2%。在不同地区间SCC病人HPV感染率差别没有统计学显著意义。但是,SCC病人中,≤49岁年龄组的HPV16感染率大于50岁年龄组(P=0.003),而HPV52,58和39在高年龄组有更高的感染率;相反在CIN2和CIN3病人中,≤34岁和35-49岁年龄组HPV16感染率小于50岁年龄组(P=0.01),而HPV52、58和39在低年龄组感染率更高。与SCC病人相比,CIN2/3病人有更高的HPV31、52和58感染率,而HPV16和18的感染率则低SCC病人。 结论HPV16和18是子宫颈病变病人中的最常见的型别,HPV6、11和16是生殖器疣病人中最常见的型别。提示目前的预防性疫苗能够达到很好的效果。
【学位授予单位】:北京协和医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R737.33

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【参考文献】
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