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《北京协和医学院》 2009年
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Aurora B对Bacp/Nlp的磷酸化调控及其参与胞质分裂的机制研究

晏杰  
【摘要】:胞质分裂是细胞有丝分裂的最后完成阶段,是将倍增的细胞内容物分配到两个独立的子代细胞的最后步骤。胞质分裂是一个有许多因子共同参与的复杂过程,胞质分裂异常,可以导致细胞的染色体不稳定性和细胞癌变等恶性表型。 Bacp/Nlp (BRCA1相关中心体蛋白/Ninein样蛋白)是我室通过酵母双杂交实验自行定位克隆的与BRCA1相关的蛋白,多项研究结果表明,Bacp/Nlp在细胞的有丝分裂过程中参与微管的生发以及纺锤体的形成等重要过程。 在本课题的研究中,我们发现Bacp/Nlp也参与了胞质分裂的过程,当抑制细胞中Bacp/Nlp的表达时,细胞的胞质分裂过程被干扰进而导致细胞多核现象的发生。本研究发现,Bacp/Nlp在胞质分裂过程中的功能发挥依赖其与Aurora B(一种在胞质分裂过程中起重要作用的激酶)的相互作用,干扰它们的相互作用,胞质分裂不能正常进行。通过一系列的体外激酶实验,我们发现Bacp/Nlp是Aurora B的磷酸化底物,其磷酸化反应主要发生在Ser185、Ser448和Ser585三个保守位点。AuroraB对Bacp/Nlp的磷酸化具有两个方面的调控意义:(1)Ser448和Ser585位点的磷酸化对Bacp/Nlp具有募集作用,是Bacp/Nlp在胞质分裂期定位于中间体的前提; (2)Ser185位点的磷酸化能够稳定Bacp/Nlp,抑制其泛素化降解。 综上所述,本文研究了Aurora B对Bacp/Nlp的磷酸化调控作用,并探讨其对胞质分裂的影响,为深入阐明胞质分裂的调控机制以及认识胞质分裂异常导致基因组不稳定性提供理论基础。
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