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《北京协和医学院》 2011年
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黄檗落叶化感物质的初步研究

戴灵超  
【摘要】:黄檗为芸香科黄檗属植物,是常用中药材关黄柏的基源植物。由于野生黄檗资源遭到严重破坏,并且通过野外调查发现黄檗种群自我更新不良,现已成为濒危物种。课题组早期研究证实黄檗果皮和落叶中均存在影响黄檗种子萌发和幼苗生长的物质。本实验通过天然产物化学结合生物活性检测的研究方法,对黄檗落叶中存在的化感物质进行分离鉴定及活性检测,并对黄檗生长地域土壤中的化感物质含量进行了初步的探索。 实验采用小麦种子作为受试植物进行活性筛选,通过天然产物化学的研究方法,从落叶中分离得到一个影响小麦和黄檗种子萌发及幼苗生长的物质,经波谱解析和文献比对,确定该化合物为黄柏苷。生物活性测定结果表明,黄柏苷能显著抑制小麦幼苗的生长,但是对小麦种子的萌发影响较小。黄柏苷在浓度大于0.4mg/ml时对黄檗种子的发芽率具有极显著抑制作用,在浓度大于0.2mg/ml时,能显著抑制黄檗种子发芽指数和活力指数,对黄檗幼苗的生长具有极显著的抑制作用,并随浓度的增加抑制作用加强。在自然环境中,黄檗落叶中的物质可能会随雨雪淋洗进入黄檗种子所处的土层中,黄檗种子低温后熟过程可能会受黄柏苷的影响。本实验在预处理黄檗种子时以黄柏苷的水溶液浸种再进行低温8℃处理。实验结果表明,黄柏苷溶液浸种低温处理的种子发芽率和发芽指数极显著低于蒸馏水浸种低温处理的种子发芽率和发芽指数,提示黄柏苷可能会影响黄檗种子的后熟过程。 文献报道黄柏苷在黄檗属植物落叶中是一种含量较高的成分,实验测得北京地区黄檗落叶中黄柏苷的含量为12.12mg/g。黄檗落叶100mg/ml水浸液中黄柏苷的含量为0.89mg/ml,远高于其单体化合物在水中的溶解度。对黄檗生长地域土壤中黄柏苷的含量进行测定,结果表明10、11月份土壤中黄柏苷的含量较低,经过雨雪淋洗和冻土期后,3月份黄柏苷的含量有所升高。4月份黄柏苷的含量又出现下降。实验结果提示雨雪淋溶等方式,可能有助于落叶中的黄柏苷释放到土壤中 通过对黄檗落叶中的化学成分进行分析,从中分离得到20个化合物,鉴定了其中18个化合物的结构。其中黄酮类化合物9个,香豆素类化合物7个,甾体化合物2个。通过波谱解析及文献比对确定这18个化合物的结构分别为:6-甲氧基-7-羟基香豆素(scopoletin,1):伞形花内酉旨(umbelliferon,2);phellodenol-A (3);neophellamuretin(4);山柰酚(kaempferol,5):槲皮素(quercetin,6):胡萝卜苷(daucosterol,7):山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempfero-3-O-β-D-glucoside,8);槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(quercetin-3-O-β-D-galactoside, 9); hexandraside E(10);6-(2'-羟基-3'-甲基-3'-丁烯基)香豆素-7-O-β-D-葡萄糖苷(7-O-β-D-glucopyranosyl-6-(2-hydroxy-3-methl-3-butenyl) coumarin,11);7-(3'-甲基-2'-己烯基-6'-O-β-D-葡萄糖基)香豆素(7-(6'-O-β-D-glucopyranosyl-3'-methyl-2'-hexenyl)coumarin,12);茵芋苷(skimmin,13); phellodenol E (14);黄檗苷(amurensin,15);黄柏苷(phellamurin,16); (2R)-phellodensin-F (17); clerosterol-3-O-β-D-galactopyranoside (18)。其中化合物化合物11、12为新化合物,化合物4、14、17为首次从黄檗中分离得到,化合物18为首次从黄檗属中分离得到。文献资料表明落叶中的化合物6-甲氧基-7-羟基香豆素;伞形花内酯;山柰酚:槲皮素:山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷:槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷都具有一定的化感作用,黄檗落叶中这些化合物能否产生化感作用,仍需对其量效关系进一步研究。 结论:黄柏苷可能是黄檗落叶产生化感作用的化合物之一。
【学位授予单位】:北京协和医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R284

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