收藏本站
《北京协和医学院》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人参皂甙Rb1联合磷酸川芎嗪对扩张型心肌病的治疗作用及机制研究

邵海涛  
【摘要】:目的扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)以左心室或双心室扩张和心功能减退为特征,其发病原因与病毒感染、自身免疫、酒精中毒、妊娠、家族遗传等因素有关,其人群发病率约为1/2500,占所有心肌病的60%。迄今缺乏有效治疗,是心血管疾病的重要死因。为寻找安全高效的治疗DCM的药物,我们把作用于不同靶点的中药单体人参皂甙Rbl (Ginsenoside-Rbl, Rbl)和磷酸川芎嗪(Tetramethylpyrazine phosphate, TMPP)联合应用,以本室建立的cTnTR141w扩张型心肌病转基因小鼠为模型,研究本中药单体复方对DCM的治疗效果并探讨其作用机理。 方法对2.5月龄的cTnTR141w转基因小鼠进行心脏超声检查,计算左心室收缩末期内径(the left ventricular end-systole diameter, LVESD)的平均值和95%的可信区间。我们将95%的可信区间的上限作为心脏扩张的标准,将LVESD值于95%可信区间内的转基因小鼠随机分成七组:模型对照组,Rb1 (40 mg/kg/day)+TMPP (20 mg/kg/day)联合组1,Rb1(40mg/kg/day)+TMPP (40mg/kg/day)联合组2, Rbl (20mg/kg/day)+TMPP (40 mg/kg/day)联合组3,Rb1 (40mg/kg/day),TMPP (40mg/kg/day)组,阳性对照组[卡托普利(180mg/kg/day)],用同龄的阴性鼠作为正常对照组。各组小鼠连续给药2个月并且于2.5,3.5及4.5月龄时进行超声检查。在给药终点即4.5月龄时,进行Kaplan-Meier生存分析,同时各组部分小鼠心脏组织取材,进行HE染色和Masson染色观察心肌显微结构变化,透射电镜观察心肌超微结构,RT-PCR (reverse transcription PCR)检测Ⅰ型胶原(COL1α1),Ⅲ型胶原(COL3α1),钙调素1 (Calm1),钙/钙调素依赖蛋白激酶ⅠI b (Camk2b)的表达,Western blot检测心脏HB-EGF表达水平。 结果根据4.5月龄时死亡率及超声分析结果,联合应用组1,即Rb1 (40mg/kg/day)+ TMPP (20mg/kg/day)组(Rb+TMPP),对模型小鼠扩心表型改善最好,与Rb1和TMPP单方治疗组相比,Rb1+TMPP组在心肌细胞排列,间质纤维化及心肌超微结构方面具有更好的改善作用。RT-PCR和Western blot检测结果显示与Rb1及TMPP单方相比,Rb1+TMPP组可同时抑制COLlαl, COL3αl, Calml,Camk2b和HB-EGF的表达,而Rb1治疗组主要抑制HB-EGF的表达,TMPP治疗组主要抑制Calm1和Camk2b的表达。 结论与Rb1及TMPP单方相比,Rb1与TMPP联合应用在改善模型小鼠死亡率,心室扩张,收缩功能失调,间质纤维化及超微结构损伤方面具有协同作用,且协同作用部分是通过抑制HB-EGF和Ca2+/CaM/CaMKII信号通路而实现的。Rb1与TMPP联合应用可作为治疗遗传性DCM的候选药物。 目的利用NOL3(nucleoar protein3)心脏特异性的转基因小鼠模型,通过蛋白质组技术筛选NOL3抗凋亡相关的功能蛋白,为进一步探讨NOL3在心脏发挥抗凋亡作用的机制提供依据。 方法采用双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离NOL3转基因和野生型心脏总蛋白,免疫印迹寻找差异蛋白质点,考马斯亮蓝G250(CBB-G250)染色,从胶中选取分离差异蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。为了确定2-DE结果的可靠性,Western blot进一步验证差异的蛋白质点。 结果获得重复性和分辨率较好的双向凝胶电泳图谱,免疫印迹发现3个磷酸化水平差异显著的蛋白质点,质谱分析获取3张肽质量指纹图谱,通过查询数据库鉴定出了3个蛋白:热休克蛋白27(Hsp27),8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1),NADH脱氢酶(辅酶Q)黄素蛋白2(Ndufv2)。western blot结果显示,与野生小鼠相比,Hsp27在NOL3心脏特异性转基因小鼠的心脏中的磷酸化和表达水平均升高,与2-DE结果一致。 结论磷酸化和非磷酸化的Hsp27都是在凋亡中具有细胞保护功能的活性形式,心脏特异NOL3转基因小鼠心脏中磷酸化和非磷酸化的Hsp27的水平都显著高于野生型,表明激活Hsp27可能是NOL3发挥抗凋亡作用的一个途径。
【学位授予单位】:北京协和医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吕干;;参附注射液治疗扩张型心肌病31例疗效分析[J];中国实用医药;2010年20期
2 杜惠荣;扩张型心肌病的心电图特征[J];实用心电学杂志;1995年04期
3 王东,崔景晶,高云秀,张爱红;扩张型心肌病的临床鉴别分析[J];齐齐哈尔医学院学报;2005年01期
4 宋治远;;缺血性心肌病的诊断和鉴别诊断[J];中国医师进修杂志;2006年28期
5 张静;郑兴;;核纤层蛋白基因及其致扩张型心肌病的研究进展[J];实用医药杂志;2008年02期
6 畅芳叶;;实时三维超声心动图在扩张型心肌病中的诊断价值[J];山西医药杂志(下半月刊);2009年12期
7 余希文;吴宁波;;茯苓杏仁甘草汤加味配合西药治疗扩张型心肌病58例[J];湖北民族学院学报(医学版);2010年03期
8 苏代泉;;特发性扩张型心肌病的室性心律失常[J];心血管病学进展;1985年01期
9 刘建华;程祖亨;;酷似心包病变的扩张型心肌病一例报告[J];新疆医科大学学报;1987年02期
10 章冬琴;孙经荣;周永明;;充血性扩张型心肌病一家系5例报告[J];临床内科杂志;1988年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙敏;田家玮;姜双全;何宁;;应用QTVI技术评价阿霉素所致兔扩张型心肌病模型的实验研究[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
2 赵世华;;MRI在心肌病诊断和鉴别诊断中的应用价值[A];中华医学会第16次全国放射学学术大会论文汇编[C];2009年
3 蒋锦琪;娄樱;袁方;谢文晖;张鹏;樊济海;;扩张型心肌病患者双嘧达莫负荷心肌201T1 SPECT显像的分析[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
4 刘奇才;欧启水;;NPPB基因5'侧翼端CTTT重复序列多态性与肥厚型心肌病及扩张型心肌病发病的关系[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
5 许瑞生;;真武汤治疗扩张型心肌病[A];全国中西医结合教育学术研讨会论文集[C];2000年
6 刘晓伟;李治安;;速度向量成像技术评价扩张型心肌病心脏扭转运动[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
7 陆赛君;;扩张型心肌病心室、左房大小与ST-T波改变、房颤的关系探讨[A];第四届全国心功能学术研讨会论文摘要集[C];1994年
8 孙敏;田家玮;姜双全;何宁;;应用QTVI技术评价阿霉素所致兔扩张型心肌病模型的实验研究[A];庆祝中国超声诊断50年暨第十届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2008年
9 彭冬迪;曾春燕;;36例扩张型心肌病患者随访分析[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年
10 罗素红;赵茂林;陶礼;;硫酸镁联合替米沙坦治疗扩张型心肌病心力衰竭32例[A];2011年全国医药学术论坛交流会暨临床药学与药学服务研究进展培训班论文集[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 黄登喜;扩张型心肌病有望治愈[N];医药导报;2004年
2 刘启明;治疗扩张型心肌病有新法[N];大众卫生报;2001年
3 何德功;基因疗法可治疗动物扩张型心肌病[N];农民日报;2004年
4 吴强;外科治疗扩张型心肌病[N];福建科技报;2000年
5 彭晓兰;扩张型心肌病与自身免疫相关[N];健康报;2003年
6 ;我国“扩张型心肌病”诊断治疗取得重大进展[N];今日信息报;2003年
7 张沙沙;市医院为一例扩张型心肌病患者成功实施手术[N];太行日报;2010年
8 本报记者 张向永 李忠峰;东北人参“折戟”品牌战[N];市场报;2007年
9 吴力勇 衣晓峰;“牛心”回缩有望了[N];中国医药报;2000年
10 衣晓峰;硬膜外阻滞对付扩张型心肌病[N];健康报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陆政峰;人参皂甙Rg1强化嗅鞘细胞生物学行为的实验研究[D];苏州大学;2010年
2 赵海苹;中药单体对cTnT~(R141W)转基因扩张型心肌病小鼠模型的治疗作用及机理研究[D];中国协和医科大学;2009年
3 曹发昊;复方人参皂甙纳米乳的制备及其免疫增强作用的研究[D];西北农林科技大学;2012年
4 曾小莉;人参皂甙Rh_2诱导人肝癌细胞分化及机理研究[D];重庆医科大学;2002年
5 巩丽;人参皂甙Rg1对绝经后妇女阿尔茨海默病细胞模型的神经保护作用及机理研究[D];山东大学;2010年
6 孙莉萍;遗传性扩张型心肌病LMNA基因突变的致病机理研究[D];中国协和医科大学;2010年
7 吕丹;Dkk3与Wif1对扩张型心肌病的调节机制研究[D];北京协和医学院;2009年
8 胡立强;人参皂甙Rb_1对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究[D];中南大学;2010年
9 廖进喜;核苷、碳苷、Daphnodorin B和人参皂甙的合成研究[D];中国科学技术大学;2011年
10 黄飞;人参皂甙Rb1调节AQP4表达在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中作用的实验研究[D];吉林大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 邵海涛;人参皂甙Rb1联合磷酸川芎嗪对扩张型心肌病的治疗作用及机制研究[D];北京协和医学院;2011年
2 马展成;钙网蛋白及基质金属蛋白酶在扩张型心肌病发病机制中的作用[D];汕头大学;2010年
3 黄斯斯;扩张型心肌病患者外周血单个核细胞白细胞介素-34、白细胞介素-35表达及分泌的初步研究[D];广西医科大学;2010年
4 钱伶凌;人参皂甙Rg3对乳腺癌细胞系的抑制作用[D];浙江工业大学;2010年
5 李欣;人参皂甙-Rg3的制备研究[D];南京工业大学;2003年
6 晏娟娟;自体骨髓间充质干细胞移植治疗扩张型心肌病的临床观察[D];郑州大学;2012年
7 王海燕;心电图在扩张型心肌病患者猝死危险性评估的价值[D];河北医科大学;2012年
8 杜秀丽;人参锈腐菌中人参皂甙Rb_1水解酶的分离与性质研究[D];东北师范大学;2010年
9 孙婧;杨积武教授中西医结合治疗扩张型心肌病伴心力衰竭经验[D];辽宁中医药大学;2010年
10 巩秀丽;人参皂甙预处理对大鼠急性肺损伤的影响[D];河南科技大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026