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《北京协和医学院》 2011年
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系统性红斑狼疮外周血CD4~+T细胞Sirt1的表达及Resveratrol对CD4~+T细胞亚群及功能影响的初探

张国华  
【摘要】:背景和目的 系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus, SLE)是一种免疫复合物介导的以多系统受累和血清中多种自身抗体阳性为主要临床特征的弥漫性结缔组织病。CD4+T淋巴细胞异常活化增殖在SLE发病中起核心作用。根据分化和功能特征可将CD4+T细胞分为Th1、Th2, Th17及Treg细胞亚群,各细胞亚群分泌特征性的细胞因子。Th1细胞主要分泌IFN-y, Th2细胞主要分泌IL-4、IL-10,Th17细胞分泌IL-17等致炎因子,Treg细胞则主要起免疫抑制作用。各细胞亚群及其分泌的细胞因子的失衡在SLE发病中起了关键性的作用。 Sir2是在研究酵母菌转录沉默时发现的一个基因,具有高度保守性。在各物种中发现的Sir2的同源基因统称为Sirtuins家族。迄今为止,人类中发现的Sirtuins家族由7个成员组成,即Sirtl-Sirt7,其中Sirtl和酵母Sir2同源性最高,目前的研究最多。Sirtl蛋白具有NAD+依赖性组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase, HDAC)活性,可使组蛋白/非组蛋白的赖氨酸残基发生去乙酰化。随着表观遗传学的进展,近年来研究发现CD4+T细胞DNA低甲基化与SLE发病密切相关。然而关于乙酰化在SLE中的作用报道不一,有研究发现乙酰化可以促进SLE自身抗体的产生,也有研究认为SLE患者或MRL/lpr模型鼠中组蛋白H3和H4呈低乙酰化水平,并且乙酰化水平和疾病活动度水平呈负相关。故而去乙酰化酶Sirtl的异常表达可能参与了SLE的发病。Sirtl在胸腺淋巴细胞含量丰富,Jedon等报道Sirtl缺陷小鼠免疫球蛋白沉积于肾脏,类似狼疮肾炎的表现,以及血清中出现高低度的抗核抗体,提示Sirtl可能在SLE发病中起着重要的作用。 Res veratrol (Res)是植物在受到病原性进攻和环境恶化时产生的一种多酚类植物抗毒素,广泛存在于植物中,尤其在葡萄、虎杖和花生中含量高,具有抗炎、抗氧化、调节血脂及吞噬自由基等多种生物学活性。近年来研究发现Res具有广泛的抗肿瘤及免疫调节作用而再次掀起研究热潮。Res也是迄今发现最强的Sirtl天然激活剂。故而探讨SLE患者CD4+T细胞Sirtl的表达水平以及Res对SLE患者外周血CD4+T细胞亚群及其分泌的细胞因子和CD4+T细胞活化增殖的影响,可能为SLE的治疗提供新的思路。 方法 1荧光定量PCR法检测Sirtl mRNA在SLE患者和正常对照组间表达水平的差异,其中17例明确诊断的SLE患者,9例正常对照。收集患者资料,依据SLEDAI 2000评分体系评价患者的疾病活动度,按照活动vs稳定和脏器受累情况分组评价。并分析SirtlmRNA表达水平与SLE疾病活动的相关性。 2流式细胞仪检测CD4+T细胞亚群及其分泌的细胞因子在8例SLE患者和8例正常对照组间的差异。其中6例活动期SLE患者和6例正常对照外周血分离的PBMC经Res20μM和Res40μM干预后,比较不同浓度的Res对CD4+T细胞亚群及其分泌的细胞因子的影响。 3 4例活动期SLE患者和5例正常对照组外周血分离的PBMC和CD4+T细胞经CFSE标染后经抗CD3/CD28+IL-2刺激活化增殖,同时分别给予Res10、20和40μM共孵育96小时。5例活动期SLE患者和5例正常对照组外周血分离的PBMC经抗CD3/CD28活化,同时分别给予Resl0、20和40μM共孵育24小时。流式细胞仪检测细胞增殖情况以及T细胞中期活化标志CD25(CD4+CD25+)细胞的比例变化。 结果 1 SLE患者外周血CD4+T细胞SirtlmRNA表达水平低于正常对照,但是没有统计学意义;活动期SLE患者外周血CD4+T细胞SirtlmRNA表达水平较稳定期和正常对照相比明显下调;有面部红斑患者SirtlmRNA表达水平较无面部红斑患者明显上调;而在肾脏受累方面SirtlmRNA表达没有明显差异。SirtlmRNA表达水平与C3呈正相关。 2 SLE患者Th1、Th2、Th17细胞及其分泌的IFN-γ、IL-4和IL-10、IL-17均明显高于对照组,而Treg细胞无明显差异。Res对Th1、Th2细胞及其分泌的IFN-γ、IL-4无明显影响,40μM可明显降低Th17细胞和培养上清中的IL-10. IL-17; Res可降低Treg细胞比例,但是没有显著性差异。 3 Res可明显降低SLE患者和正常对照外周血经CD3/CD28+IL-2刺激活化增殖的PBMC和CD4+T细胞,低浓度即有明显的抑制作用,随着浓度的增加,抑制作用增强,呈现浓度依赖性。而且Res可明显降低SLE患者和正常对照经CD3/CD28活化的CD4+T细胞,随着浓度的增加抑制活化作用逐渐加强。 结论 该研究结果表明Sirtl可能在SLE发病中发挥重要作用,并与疾病活动度相关。有潜力成为治疗SLE新的药物干预靶点。Res可能通过降低Th17细胞以及细胞因子IL-10、IL-17的水平,抑制PBMC和CD4+T细胞活化增殖,是很有前景的免疫抑制剂。
【关键词】:系统性红斑狼疮 Sirtl CD4~+T细胞 Resveratrol
【学位授予单位】:北京协和医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R593.241
【目录】:
  • 英文缩略词4-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-11
  • 前言11-17
  • 参考文献14-17
  • 第一部分 SLE患者外周血CD4~+T细胞中sirt1的表达17-35
  • 背景17
  • 材料和方法17-24
  • 数据的统计学处理24-26
  • 结果26-30
  • 讨论30-33
  • 参考文献33-35
  • 第二部分 Resveratrol对SLE患者外周血中CD4~+T细胞亚群的影响35-56
  • 背景35
  • 材料和方法35-41
  • 统计学方法41-42
  • 实验结果42-51
  • 讨论51-54
  • 参考文献54-56
  • 第三部分 Resveratrol对SLE患者外周血PBMC和T细胞功能的影响56-71
  • 背景56
  • 材料和方法56-60
  • 统计学分析60-61
  • 结果61-67
  • 讨论67-69
  • 参考文献69-71
  • 全文小结71-72
  • 综述172-80
  • 参考文献77-80
  • 综述280-87
  • 参考文献84-87
  • 附录87-90
  • 个人简历90-91
  • 致谢91-93

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 宋清华,朱应葆,崔鸣,李枫,李世荫,陈学荣;Ku70和Ku80基因在系统性红斑狼疮患者皮肤上的表达[J];北京医科大学学报;2000年05期
2 丁雪芹;周康兴;孙凌云;;系统性红斑狼疮T细胞活化及其与病情活动的相关性研究[J];中华风湿病学杂志;2006年06期
3 陈琛;叶冬梅;邵淑娟;;转化生长因子-β/Smad信号通路研究进展[J];医学分子生物学杂志;2006年02期
4 唐玲丽,余平,陈新瑞,谢希;白藜芦醇对类风湿关节炎滑膜细胞增生及凋亡的影响[J];实用预防医学;2005年01期
5 俞瑜,曾耀英,季煜华,肇静娴,刘良;白藜芦醇对小鼠T细胞活化、增殖及细胞因子分泌的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年06期
6 田静;高洁生;陈进伟;李芬;谢希;杜金烽;王静;毛妮;;白藜芦醇对TNF-α诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的影响[J];中国中药杂志;2010年14期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜辉;高巍;尚伟;刘知勤;申旺;;中药有效成分防治类风湿关节炎研究进展[J];中医药临床杂志;2011年05期
2 郭春叶;龚月生;刘林丽;曹雨莉;;酵母菌生长曲线的测定及其转葡萄芪合酶基因重组菌遗传稳定性的检测[J];安徽农业科学;2007年07期
3 杨扬;何威;吴军;何云志;黄海;林自华;马宏民;;脂溢性角化病皮损中Smad4 mRNA表达水平的变化[J];重庆医学;2008年08期
4 杨扬;何威;李颖;何云志;黄海;林自华;吴军;杨进清;;脂溢性角化病皮损区受体活化Smad的变化[J];第三军医大学学报;2007年23期
5 宋清华,狄春晖,钟英城,陈学荣,李世荫;系统性红斑狼疮与TFAR19的相关性的研究[J];中华风湿病学杂志;2002年05期
6 宋清华,陈英玉,狄春晖,陈学荣,李世荫;TFAR19蛋白在系统性红斑狼疮患者血清中水平的检测[J];中华风湿病学杂志;2003年09期
7 丁雪芹;周康兴;孙凌云;;系统性红斑狼疮骨髓T细胞活化及其与病情活动的相关性分析[J];中华风湿病学杂志;2007年06期
8 杨麦贵;杨阳;蔡文科;张竹映;郑善銮;樊爱琳;屈玲;韦晓明;郝晓柯;;系统性红斑狼疮细胞与其病情活动性的相关性研究[J];中华风湿病学杂志;2007年08期
9 高永军;曹毅;廉坤;黄清;方绍龙;徐蔚;;深低温停循环对大鼠额叶皮质Smad2和Smad4表达的影响[J];昆明医学院学报;2011年06期
10 张瑶;于力;郝志宏;邓颖;王丽娜;张建青;;福辛普利对肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用[J];临床儿科杂志;2010年03期
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 刘莉莉;Th17/Treg免疫平衡在特发性膜性肾病发病中的作用及环孢素A对其影响[D];北京协和医学院;2011年
2 黄慧;结节病患者Th17细胞和Treg细胞的表达水平及糖皮质激素治疗干预的影响[D];北京协和医学院;2011年
3 任敏;芩丹胶囊对血管外膜成纤维细胞TGF-β1/Smad信号转导通路影响的研究[D];山东大学;2011年
4 李娜;丙酸睾酮治疗小鼠自身免疫性卵巢早衰及其机制的研究[D];中南大学;2011年
5 马剑英;冠状动脉微栓塞的基础研究[D];复旦大学;2007年
6 刘蔚;Abl酪氨酸激酶抑制剂对小鼠梗阻性肾病肾间质纤维化的影响及机制研究[D];华中科技大学;2007年
7 王卓龙;白藜芦醇对Pristane诱导狼疮鼠作用研究[D];北京协和医学院;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄建霞;急性白血病患者外周血Treg细胞与Th17细胞相关性研究[D];兰州大学;2011年
2 徐嵘嵘;Cripto-1,Nodal在宫颈癌中的表达及临床意义[D];安徽医科大学;2011年
3 伍星;免疫性血小板减少症T细胞免疫状态及临床分析[D];天津医科大学;2011年
4 李丹丹;抗纤维化短肽对大鼠矽肺纤维化TGF-β1和SMAD7表达影响的实验研究[D];华北煤炭医学院;2008年
5 杨璟;白藜芦醇对CIA大鼠的治疗作用及其对JAK-STAT信号通路作用的实验性研究[D];华北煤炭医学院;2009年
6 王迎宾;TGF-β1和Smad7在前列腺癌组织中的表达及临床意义[D];华北煤炭医学院;2010年
7 赵雅静;白藜芦醇对CIA大鼠成纤维样滑膜细胞Caspase-8、FLIP表达的影响[D];华北煤炭医学院;2008年
8 罗敏;Th17细胞和Treg细胞在系统性红斑狼疮外周血的表达及临床意义[D];广州医学院;2011年
9 李志章;TGF-β1/Smad4信号通路在喉鳞癌中的作用及意义[D];泰山医学院;2011年
10 江颖娟;喜树碱对淋巴细胞体外行为的药理学作用[D];暨南大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 李富荣,叶志中,戴勇,齐晖,任莉莉,洪小平,王新根;外周血单核细胞CD69/CD3比值在评估系统性红斑狼疮疾病活动性中的作用[J];中华风湿病学杂志;2002年05期
2 马晶波,李锋,冯树芳;系统性红斑狼疮患者外周血CD4~+ CD8~+和CD22~+淋巴细胞活化分子CD69的表达[J];中华风湿病学杂志;2003年02期
3 肖东杰,刘洋,黄平,李晓英,杨博,汪运山;淋巴细胞活化在系统性红斑狼疮发病中的意义[J];中国麻风皮肤病杂志;2004年06期
4 韩卫宁,李琦,张赟,曹云新,谢鑫,金伯泉;TLSF_(JM)对Th1/Th2样细胞亚群比率的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年03期
5 王秀丽,徐世正,熊腊元;红斑狼疮患者皮损中角朊细胞凋亡的初步研究[J];中华皮肤科杂志;1998年05期
6 王秀丽,徐世正,熊腊元,周慕先,何萍;Fas抗原及Fas配体在红斑狼疮患者皮损中的表达[J];中华皮肤科杂志;1999年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张鸿杰;;SLE并发下腔静脉及髂外静脉血栓1例[J];中外医疗;2008年18期
2 周广宇,杨永净;系统性红斑狼疮中T细胞作用的研究进展[J];国外医学.免疫学分册;2005年05期
3 孟锦焕;张晓;陆才生;余步云;;系统性红斑狼疮124例治疗的临床研究[J];中国实用医药;2010年27期
4 唐代明;余学明;;系统性红斑狼疮患者SFaS测定的探讨[J];中国社区医师(医学专业半月刊);2008年12期
5 任跃忠,戴巧定,徐荣臻;系统性红斑狼疮患者新的内源性逆转录病毒NP9基因表达及其蛋白功能预(英文)[J];中华医学遗传学杂志;2005年03期
6 李东辉,王锦德,董德寅,李蔚林,高青玲;中西医结合治疗对系统性红斑狼疮实验室指标的影响[J];西北国防医学杂志;1994年03期
7 钱先;中西医结合治疗系统性红斑狼疮提高生活质量的临床观察[J];实用中医药杂志;1998年03期
8 胡曼东;22例系统性红斑狼疮神经系统损害临床分析[J];现代中西医结合杂志;1997年01期
9 杨春莉,裘宇容;流式细胞仪对系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞亚群及NK细胞的检测[J];第一军医大学学报;2000年03期
10 李海珠,陈梅,于莹;16例系统性红斑狼疮的护理对策[J];黑龙江医药科学;2004年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 卢桂玲;;系统性红斑狼疮患者Th1/Th2相关转录因子的基因表达[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
2 黄卫华;;免疫吸附治疗重症系统性红斑狼疮[A];第十一届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2010年
3 潘海峰;叶冬青;;Th17及其相关细胞因子与系统性红斑狼疮的发病机制研究进展[A];华东地区第十次流行病学学术会议暨华东地区流行病学学术会议20周年庆典论文汇编[C];2010年
4 张闽光;张晓嫣;王建萍;邢东炜;苏晓;;系统性红斑狼疮胸部CT短期随访分析(附64例报告)[A];第十一次全国中西医结合影像学术研讨会暨全国中西医结合影像学研究进展学习班资料汇编[C];2010年
5 梁军亮;陈宏;;亲环素A mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达及其临床意义[A];第五届全国中西医结合变态反应学术会议论文集[C];2011年
6 王友莲;付强;桂小美;施春花;张娜;邹伏英;尚可;;系统性红斑狼疮患者血清C1q检测临床意义[A];2011年华东六省一市风湿病学学术年会暨2011年浙江省风湿病学学术年会论文汇编[C];2011年
7 吴凤霞;杨程德;袁国华;;趋化因子CXCL13在系统性红斑狼疮患者的血浆表达及其临床意义[A];2011年华东六省一市风湿病学学术年会暨2011年浙江省风湿病学学术年会论文汇编[C];2011年
8 李文先;陈贵梅;袁慧;李若洁;叶冬青;;TIM家族基因多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究[A];华东地区第十次流行病学学术会议暨华东地区流行病学学术会议20周年庆典论文汇编[C];2010年
9 刘钢;;类风湿关节炎及系统性红斑狼疮辅助检查路径分析与临床诊治[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
10 陈士伟;沈茜;;循环miR-189对系统性红斑狼疮的诊断意义和价值[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 邵建国;B细胞药物:靶向系统性红斑狼疮[N];医药经济报;2009年
2 俊英;中西医结合可延长系统性红斑狼疮稳定期[N];中国医药报;2009年
3 陈静;系统性红斑狼疮研究成果获国家科技进步二等奖[N];保健时报;2010年
4 本报记者 朱永基;首个SLE数据库助力规范化诊疗[N];健康报;2011年
5 孙维生;如何早期防治系统性红斑狼疮?[N];潮州日报;2009年
6 北京大学人民医院风湿免疫科教授 栗占国 本报记者 魏平 整理;解救系统性红斑狼疮:糖皮质激素治疗贯穿始末[N];医药经济报;2011年
7 记者 王丹;系统性红斑狼疮“中国数据”发布[N];健康报;2011年
8 通讯员 孙国根 记者 陈青;系统性红斑狼疮有新疗法[N];文汇报;2011年
9 孙国根;治疗系统性红斑狼疮有了“新钥匙”[N];中国医药报;2011年
10 本报记者 胡德荣;降伏红斑狼疮 “仁济”领跑[N];健康报;2010年
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1 程文静;高通量深度测序绘制系统性红斑狼疮CD4~+T细胞全基因组MicroRNAs表达谱[D];中南大学;2012年
2 张国华;系统性红斑狼疮外周血CD4~+T细胞Sirt1的表达及Resveratrol对CD4~+T细胞亚群及功能影响的初探[D];北京协和医学院;2011年
3 汤媚妮;白芍总苷对系统性红斑狼疮CD4~+CD25~+调节性T细胞作用及其机制研究[D];中南大学;2012年
4 张少然;T辅助细胞亚群联合检测对系统性红斑狼疮病情评估价值的研究[D];山西医科大学;2011年
5 陶金辉;滤泡辅助性T细胞与系统性红斑狼疮的相关性研究[D];安徽医科大学;2011年
6 张峻岭;系统性红斑狼疮遗传免疫特征及HLA基因与临床相关性分析[D];天津大学;2011年
7 韩建文;中国汉族人系统性红斑狼疮全基因组关联分析研究[D];安徽医科大学;2010年
8 邹延峰;安徽省农村人口系统性红斑狼疮患病率及其环境相关因素研究[D];安徽医科大学;2011年
9 张立民;系统性红斑狼疮MicroRNA表达谱和功能的初步研究[D];中国协和医科大学;2010年
10 周迪;膜联蛋白A5影响系统性红斑狼疮血栓形成倾向的研究[D];第三军医大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 宋维亚;地塞米松体内及体外诱导系统性红斑狼疮患者CD4~+CD25~-T淋巴细胞凋亡率的研究[D];安徽医科大学;2010年
2 周卫;女性系统性红斑狼疮外周血单个核细胞中雌激素受体的表达及其在炎性病变中的作用研究[D];川北医学院;2011年
3 张滔;汉族人群干扰素调节因子3基因多态性及环境因素与系统性红斑狼疮的关联性研究[D];安徽医科大学;2010年
4 朱立炜;系统性红斑狼疮患者生活质量与临床护理的相关研究[D];安徽医科大学;2010年
5 秦薇子;白细胞介素22在外周血CD4+/CD8+T细胞中的表达及其与系统性红斑狼疮的相关性研究[D];安徽医科大学;2011年
6 邓红宇;系统性红斑狼疮患者外周血内皮祖细胞数量及分化功能的研究[D];泸州医学院;2011年
7 王贞;高级氧化蛋白产物在系统性红斑狼疮早发动脉粥样硬化中的临床意义[D];福建医科大学;2010年
8 朱青青;3种基质金属蛋白酶与系统性红斑狼疮的相关性研究[D];安徽医科大学;2010年
9 吴凤霞;趋化因子及受体基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究[D];川北医学院;2010年
10 高飞;转录因子RFX1在系统性红斑狼疮发病中的作用研究[D];中南大学;2010年
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