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《北京协和医学院》 2010年
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严重急性呼吸综合征(SARS)康复者长期的体液免疫记忆反应

刘利锋  
【摘要】:经过采取传统的隔离和对症治疗等措施,SARS疫情在2003年6月份得到控制,但SARS(?)可能从动物宿主跨种传播导致SARS再次爆发。抗体尤其是抗体的中和活性滴度以及维持时间决定着机体对SARS病毒的再次感染是否具有免疫保护力,SARS-COV体液免疫研究还有些未知领域:针对结构蛋白的抗体动态变化规律,抗体抵御病原体的作用机制等。 为了揭示SARS康复者长期的体液免疫记忆反应规律,在SARS康复者康复后的第3个月、12个月、18个月、24个月、36个月,我们连续留取了19个康复者的血清标本(还留取了其中4名康复者第5年的标本)。用优化的S蛋白、N蛋白、受体结合区(RBD)蛋白间接ELISA方法,与商品化试剂盒一起对上述标本进行了IgG抗体检测。用假病毒中和方法进行了抗体的中和活性检测。 我们的研究有以下发现:(1)S蛋白、N蛋白特异抗体下降趋势有所不同。N蛋白特异抗体在第3个月到第12个月下降快,之后在稍高于阈值的低水平缓慢下降,而S蛋白特异性抗体从第3个月到第36个月在较高水平(相对于N蛋白)缓慢下降。(2)商品化的试剂盒检测和S蛋白间接ELISA检测的血清稀释度分别为1:10和1:100,但是,在第36个月,商品化试剂盒检测的抗体阳性率是42%,低于S蛋白间接ELISA检测的阳性率100%,以上结果表明S蛋白间接ELISA的灵敏度高于商品化试剂盒。(3)在康复后的第36个月,89%(17/19)的随访者能检测到中和性抗体,平均抑制率为48%。(4)S蛋白特异抗体与中和活性的相关系数为0.717,明显高于SARS-CoV抗体与中和活性的相关系数0.571。(5)RBD蛋白IgG抗体和S蛋白特异抗体变化趋势类似,平均OD值缓慢下降。RBD蛋白间接ELISA勺灵敏度也高于商品化的试剂盒。RBDIgG抗体和抗体的中和活性相关系数是0.737,高于S蛋白抗体与中和活性的相关系数0.717。 总之,本研究揭示了SARS-CoV及其病毒成分的抗体动态变化规律,证实了体液免疫记忆反应能维持3年,RBD蛋白是产生中和抗体的主要区域,抑制与受体结合是抗体具有中和活性的主要机制。SARS康复者长期的免疫记忆反应研究将有助于理解SARS-CoV感染的机制,有助于疫苗和诊断试剂的研制。
【学位授予单位】:北京协和医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R511.9

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