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《北京协和医学院》 2011年
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万古霉素耐药肠球菌分子特征及遗传背景研究

许宏涛  
【摘要】:研究背景 万古霉素耐药肠球菌(VRE)是重要的医院内感染病原菌,由于治疗选择严重受限经常伴有较高的致病率和致死率。近年大量研究显示,VRE菌株主要来自抗生素的压力对肠道菌的筛选,这种抗生素筛选出的定植VRE菌株更易引起医院内感染及播散。甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)也是一类重要的医院内感染菌,其具有临床分离率高、致病力强等特点,MRSA一旦接受VRE的vanA基因发展为VRSA,将会给现有的抗感染治疗体系带来巨大困难。 研究目的 1.我们对从2008年3月至2009年3月卫生部北京医院临床标本中分离得到32株VRE菌株进行了分子特征及遗传背景研究。 2.2010年底至2011年初我们对北京医院住院处病人进行了VRE的定植研究,以明确我院VRE菌株的定植情况,及VRE易于出现定植的临床病例特征。 3.对我院同一病人同时感染和/或定植MRSA和VRE菌株的病例及菌株进行了研究和分析,以期为医院内感染控制措施的制定提供一定理论依据。 研究方法 1.对2008年3月至2009年3月临床标本中出现的VRE菌株的研究: 1)应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型技术(MLST)进行遗传背景研究。 2)采用重叠PCR技术对转座子Tn1546的结构进行分析,同时检测常见毒性基因esp、hyl,及主要耐药基因van基因和aac(6')-aph(2")。 3)在对菌株进行分子特征及遗传背景研究的同时,收集病人的临床资料并对病房 环境进行监测。 4)应用转移接合试验对转座子Tn1546的转移接合活性进行研究分析。 2.对VRE定植菌株的研究: 1)评价自制的含6μg/ml万古霉素血琼脂培养基和法国生物梅里埃公司的chromIDVRE筛选培养基。方法:选取已知VRE菌株30株、VSE菌株30株、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA) 20株、其它链球菌20株分别接种两种筛选培养基,评价两种培养基的准确度和特异性;然后应用两种培养基对350份住院处病人便标本进行VRE菌株的筛选,对确证的定植VRE菌株我们应用Etest进行药物敏感试验。 2)应用PCR和测序技术对定植VRE菌株的MLST、转座子Tn1546结构、耐药基因及毒性基因等主要分生物学特征进行研究。 3)收集病例分析出现VRE定植的病例的主要特征。 3.对我院近期临床发现的具有金黄色葡萄球菌及VRE感染和/或定植的病例的研究: 1)收集和分析病例资料。 2)应用Etest法对金黄色葡萄球菌及VRE进行药物敏感试验。 3)采用PCR和测序技术对VRE的主要分子生物学特征进行研究。 4)应用接合试验研究Tn1546转座子的转移接合活性。 研究结果 1.对2008年3月至2009年3月临床标本中出现的VRE菌株的研究: 1)32株VRE菌株有21株来自感染病人,11株为定植菌株;从病房分布来看有21株分离自急诊重症监护病房,9株来自老年病房,另2株散在于其它病房。 2)所有菌株均为vanA基因阳性,其它基因阴性,但有4株菌表现为VanB表型,即万古霉素耐药,替考拉宁敏感;转座子Tn1546结构分析显示:ISEfa4的插入和vanY或vanZ基因的缺失与基因型与表型不一致相关。 3)PFGE分析显示VRE菌株存在一定程度的院内播散;MLST分析提示所有菌株均为CC17克隆复合体,CC17菌株近年已造成了全球的播散。 4)对感染病房环境的监测未发现环境污染现象。 2.对定植VRE菌株的研究: 1)对已知菌株,两种培养基准确度、特异性均可以达到100%。 2)对350份临床便标本进行VRE筛查,共筛选出15株VRE菌株,菌株均为屎肠球菌,VRE定植率为4.3%,15株定植VRE菌株全部表现为多重耐药,所有菌株均表现为VanA表型,并拥有vanA基因。 3) MLST分型显示所有菌株亦均属于更适合医院内生长的CC17克隆复合体,易形成医院内感染。 4)所有检出VRE菌株定植的病人均具有较严重基础疾病,并接受过头孢菌素和糖肽类药物的治疗。 3.对同一病人同时感染/定植VRE和MRSA的研究: 1)2010年10月-2011年2月我院共发现8例同时感染和/或定植VRE和金黄色葡萄球菌的病例,药敏结果显示:8株金黄色葡萄球菌全部为MRSA,并对多种药物呈现多重耐药,VRE菌株全部为VanA表型并vanA基因。 2)VRE菌株毒性基因esp全部阳性,hyl只有1株菌表现阳性;转移接合试验中,有7株VRE菌株含vanA基因的质粒转移接合成功,只有1株菌失败。 3)8例病人全部接受过糖肽类药物的治疗,并具有较严重基础疾病。 结论 1.我们应该重视VRE菌株的监测,同时制定更严格、有效的医院内感染控制措施,以有效降低医院内感染的出现。 2.发现了我国罕见的VanB表型-vanA基因型VRE菌株,Tn1546结构的改变影响了vanA基因的表达。 3.在国内首次对定植VRE菌株的定植率及定植菌株分子生物学特征进行了研究,结果表明医院内定植VRE菌株比例不能忽视,应该对定植VRE菌株进行严密监测,以有效减少VRE菌株的院内播散。 4.对同时感染和/或定植VRE和MRSA的病例的研究国内可查到的文献极少,我们的研究表明这种共感染的现象在我国已不罕见,应该进一步规范抗生素的应用,降低VRE和MRSA比例;并采取适当措施,以阻止或延缓VRSA在我国的出现。
【学位授予单位】:北京协和医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R446.5

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴敏;陈义忠;胡簇琼;江凌晓;陈清;;肠球菌毒力岛基因的检测[J];南方医科大学学报;2008年06期
2 张致平;抗耐药菌药物研究进展[J];中国临床药理学杂志;2003年01期
3 郑波;王珊;李耘;薛峰;肖永红;;万古霉素耐药肠球菌基因及水平转移研究[J];中国临床药理学杂志;2007年02期
4 许宏涛;唐曼娟;陈东科;陶凤蓉;艾效曼;胡云建;张秀珍;;替加环素对临床常见菌的体外抗菌活性[J];中国临床药理学杂志;2011年02期
5 朱德妹;张婴元;汪复;;2006年上海地区细菌耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2007年06期
6 汪复;;2006年中国CHINET细菌耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2008年01期
7 汪复;朱德妹;胡付品;阮斐怡;倪语星;孙景勇;徐英春;孙宏莉;胡云健;艾效曼;俞云松;杨青;孙自镛;简翠;贾蓓;黄文祥;卓超;苏丹虹;魏莲花;吴玲;张朝霞;季萍;王传清;薛建昌;张泓;李万华;;2007年中国CHINET细菌耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2008年05期
8 汪复;朱德妹;胡付品;阮斐怡;倪语星;孙景勇;徐英春;张小江;胡云健;艾效曼;俞云松;杨青;孙自镛;简翠;贾蓓;黄文祥;卓超;苏丹虹;魏莲花;吴玲;张朝霞;季萍;王传清;薛建昌;张泓;李万华;;2008年中国CHINET细菌耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2009年05期
9 汪复;朱德妹;胡付品;阮斐怡;倪语星;孙景勇;徐英春;张小江;胡云健;艾效曼;俞云松;杨青;孙自镛;李丽;贾蓓;黄文祥;卓超;苏丹虹;魏莲花;吴玲;张朝霞;季萍;王传清;薛建昌;张泓;李万华;徐元宏;沈继录;单斌;杜艳;;2009年中国CHINET细菌耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2010年05期
10 刘健慧,王丹华;NICU常见院内感染耐药菌的定植与感染[J];新生儿科杂志;2004年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 卜丽;老年门诊病人耐万古霉素肠球菌(VRE)定植率及相关危险因素研究[D];中国医科大学;2006年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨家强;宋宝安;;紫金标提取物抗菌活性的研究[J];安徽农业科学;2011年06期
2 方亚平;沈继录;沈阳;刘周;;某院2010年革兰阴性杆菌分布及耐药性监测[J];安徽医学;2011年10期
3 刘安怡;费广鹤;;多重肺部感染的菌群分布及细菌耐药性分析[J];安徽医学;2011年11期
4 汪滢;李家斌;;238株肺炎克雷伯菌的临床分布和耐药分析[J];安徽医学;2012年06期
5 丁晓红;邵宜波;沈继录;;整形外科病房分离菌株的种类及常见菌株的耐药性分析[J];安徽医药;2011年04期
6 桂和翠;王中新;沈纪录;;流感嗜血杆菌的耐药性及耐药机制[J];安徽医药;2011年12期
7 茆海丰;秦岭;杨晋;赵勇;营丽娟;;头孢西丁和拉氧头孢纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的方法比较[J];蚌埠医学院学报;2010年05期
8 方自国;汪金利;程玫;;855株革兰阴性分离杆菌分布及耐药性分析[J];蚌埠医学院学报;2010年08期
9 时花;都鹏飞;;儿科败血症分离菌582株细菌谱及耐药性分析[J];蚌埠医学院学报;2011年12期
10 邓俊;杨艳;;2010年临床感染性疾病分离出病原菌种类及耐药性分析[J];北方药学;2012年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 梁蓓蓓;周家军;裴广胜;韩宇扬;白艳;白楠;蔡芸;王睿;;利奈唑胺与万古霉素对MRSA抗生素后效应的研究[A];2011药物代谢及药代动力学研讨会论文集[C];2011年
2 陈如寿;钟佳芳;王艺融;方炎亮;;肠球菌感染的临床分布及耐药性分析[A];2009年海南省微生物学检测及质量保证研讨会论文集[C];2009年
3 符生苗;;做好细菌耐药监测,正确合理选择抗生素[A];2011年海南省细菌学检验室间质评工作会议资料汇编[C];2011年
4 魏雪;潘莹;刘韬;黄红兵;刘庆;;结直肠癌围术期喹诺酮类药物使用与吻合口瘘相关性评价[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
5 梁蓓蓓;周家军;裴广胜;韩宇扬;白艳;白楠;蔡芸;王睿;;利奈唑胺与万古霉素对MRSA抗生素后效应的研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
6 应华永;卜黎红;朱以军;赵硕;张丽英;徐瑞龙;;金华市中心医院2009年细菌耐药性监测[A];2011年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2011年
7 何梅;;ICU老年肺炎患者抗感染治疗病案分析1例[A];2010年临床药学学术年会暨第六届临床药师论坛论文集[C];2010年
8 邓丽菁;毕津莲;李湘斌;;南华大学附一医院抗菌药物利用与细菌耐药性趋势分析[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
9 卓超;肖书念;邱桂霞;钟南山;;哌拉西林-舒巴坦对非发酵菌体外抗菌活性研究[A];第二届全国药物性损害与安全用药学术会议——抗感染药物不良反应与临床安全应用专题研讨会论文汇编[C];2010年
10 尚静;王培昌;李燕;白书媛;张丽丽;王育英;张晓耕;;2187株病原菌耐药性分析[A];第二届全国药物性损害与安全用药学术会议——抗感染药物不良反应与临床安全应用专题研讨会论文汇编[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 于旭红;夫西地酸与磷霉素对MRSA生物被膜感染联合效应研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
2 张雷;利奈唑胺在中国人群的群体药代/药效动力学研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
3 李渊;痰热清注射液对产ESBLs大肠埃希菌耐药性影响的研究[D];北京中医药大学;2011年
4 曹颖;双黄连及清开灵对产ESBLs大肠埃希菌抑菌作用的研究[D];北京中医药大学;2011年
5 王杰;中国部分地区碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌耐药机制及分子流行病学研究[D];浙江大学;2011年
6 高斌;天津某医院医院感染监测与抗菌药物使用策略的研究[D];天津医科大学;2009年
7 马筱玲;金黄色葡萄球菌耐药性、耐药机制与分子流行病学研究[D];安徽医科大学;2009年
8 陈媛媛;粘附分子MAdCAM-1/VCAM-1在奶牛乳腺炎作用中的初步研究[D];吉林大学;2012年
9 瞿婷婷;多重耐药肠球菌耐药基因筛选及传播机制研究[D];浙江大学;2007年
10 徐志豪;不可分型流感嗜血杆菌(NTHI)致宿主细胞炎症反应的分子发病机制研究[D];浙江大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 关晓宣;米诺环素与头孢哌酮/舒巴坦联合应用多重耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌活性的研究[D];中国医科大学;2010年
2 曲燕燕;鲍曼不动杆菌Diversilab(?)系统分型方法的建立与评价[D];浙江大学;2011年
3 徐建国;临床分离肠球菌耐药性、毒力基因及多位点序列分型研究[D];浙江大学;2010年
4 陈丽华;清瘟败毒饮治疗医院获得性肺炎临床观察及其部分作用机理的研究[D];成都中医药大学;2010年
5 李靓;山西太原地区铜绿假单胞菌的调查分析及产金属酶基因型研究[D];山西医科大学;2011年
6 高亚静;山西临汾地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及蛋白A基因同源性分析[D];山西医科大学;2011年
7 郭佳;呼吸内科下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析[D];吉林大学;2011年
8 焦玲;金黄色葡萄球菌万古霉素敏感性变迁及分子流行病学分型研究[D];吉林大学;2011年
9 李蔼文;黄芩等中药颗粒剂的抗菌研究[D];广州中医药大学;2011年
10 王敏;重症监护病房革兰阳性菌感染的临床调查及部分葡萄球菌耐药性研究[D];安徽医科大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 申正义,孙自镛,王洪波;湖北地区临床分离菌耐药性监测[J];中国抗感染化疗杂志;2004年05期
2 朱德妹,汪复,张婴元;2003年上海地区细菌耐药性监测[J];中国抗感染化疗杂志;2005年01期
3 杜小幸;张幸国;周华;俞云松;陈亚岗;李兰娟;;亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶研究[J];中国感染与化疗杂志;2006年04期
4 汪复;;2005中国CHINET细菌耐药性监测结果[J];中国感染与化疗杂志;2006年05期
5 朱德妹;汪复;张婴元;;2005年上海地区细菌耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2006年06期
6 骆俊;沈继录;徐晓刚;胡付品;朱德妹;汪复;;耐碳青霉烯类抗生素不动杆菌的β内酰胺酶研究[J];中国感染与化疗杂志;2007年02期
7 汪复;;2006年中国CHINET细菌耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2008年01期
8 汪复;朱德妹;胡付品;阮斐怡;倪语星;孙景勇;徐英春;孙宏莉;胡云健;艾效曼;俞云松;杨青;孙自镛;简翠;贾蓓;黄文祥;卓超;苏丹虹;魏莲花;吴玲;张朝霞;季萍;王传清;薛建昌;张泓;李万华;;2007年中国CHINET细菌耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2008年05期
9 孙宏莉;王辉;陈民钧;孙自镛;俞云松;胡必杰;褚云卓;廖康;雷金娥;张兵;曹彬;何启勇;徐英春;谢秀丽;;2007年中国10所教学医院革兰阳性球菌耐药性研究[J];中国感染与化疗杂志;2009年02期
10 杨青;俞云松;倪语星;孙景勇;徐英春;孙宏莉;孙自镛;简翠;汪复;朱德妹;胡付品;阮斐怡;王传清;薛建昌;卓超;苏丹虹;胡云健;艾效曼;黄文祥;贾蓓;张朝霞;季萍;张泓;李万华;魏莲花;吴玲;;2007年中国CHINET肠球菌属耐药性监测[J];中国感染与化疗杂志;2009年03期
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1 胡苏球;黄金莲;;267株肠球菌分布及耐药性分析[J];中国微生态学杂志;2006年06期
2 张文英;邓淑文;;粪肠球菌和屎肠球菌的耐药分析[J];齐齐哈尔医学院学报;2009年01期
3 张玲;王厚照;尚碧莲;王玮玮;周友泉;;临床分离肠球菌的耐药性特征[J];职业与健康;2010年14期
4 孙冰梅;濮跃晨;林斌;;61株肠球菌的耐药性分析[J];医学研究通讯;2000年07期
5 吕婉飞;王卫华;;尿液标本中分离的肠球菌耐药性分析[J];江西医学检验;2006年05期
6 刘海燕;梁华英;刘伟;;147株肠球菌分布及耐药性分析[J];云南医药;2009年05期
7 陈淑娟;谢志勇;胡丽娟;;208株肠球菌菌种的分布及耐药性分析[J];福建医药杂志;2008年06期
8 李建升;;243株肠球菌感染菌种分布及其耐药性观察[J];南华大学学报(医学版);2006年01期
9 邱华红,钟海萍;福州市134株肠球菌的耐药性分析[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2005年06期
10 吴爱武,李红玉,蔡燕娜;HLGR肠球菌的检测及肠球菌耐药性变迁的分析[J];热带医学杂志;2005年04期
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1 黎四平;;肠球菌感染的检测及耐药性分析[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
2 高迎春;魏秀丽;张传津;苏梅;杨修镇;肖永霞;都业良;;地锦草等中药提取物对大肠杆菌耐药消除作用的初步研究[A];中国畜牧兽医学会动物药品学分会第四届全国会员代表大会暨2011学术年会论文集[C];2011年
3 范建中;周田美;董晓勤;王贤军;;HLAR肠球菌医院感染的危险因素及氨基苷类耐药相关基因研究[A];2011年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2011年
4 张士玲;高玲;;危重症患者与肠球菌感染的关系[A];中国医院协会第十三届全国医院感染管理学术年会论文汇编[C];2006年
5 钱培芬;李和姐;胡洁;倪语星;;医院内肠球菌感染危险因素研究[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(上册)[C];2002年
6 周霞;魏斌;王东;;不同来源肠球菌毒力因子基因的检测[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(下册)[C];2010年
7 陈开森;黎进;林时荣;杨福明;;万古霉素分别联合4种中药对肠球菌作用的实验研究[A];第二届全国药物性损害与安全用药学术会议——抗感染药物不良反应与临床安全应用专题研讨会论文汇编[C];2010年
8 林素珍;张满娥;毛平;赖善城;;我院2009年临床分离主要病原菌耐药预警通报[A];第二届全国药物性损害与安全用药学术会议——抗感染药物不良反应与临床安全应用专题研讨会论文汇编[C];2010年
9 郑波;王珊;李耘;薛峰;肖永红;;万古霉素耐药肠球菌基因型及水平传递研究[A];第六届全国抗菌药物临床药理学术会议论文集[C];2006年
10 李耘;王珊;薛峰;郑波;刘健;吕媛;;大环内酯耐药肺炎链球菌分子特性研究[A];第8届全国抗菌药物临床药理学术会议暨北京大学临床药理研究所成立三十周年论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 任吉民 陈蕾 李雅琳;耐药菌让“万古”重焕青春[N];医药经济报;2003年
2 本报记者 刘正午 胡永忠;盯着耐药菌起跑[N];医药经济报;2003年
3 刘伯宁;揭开“末日病菌”的面纱[N];南方周末;2010年
4 傅德明;为耐药菌度身定做[N];医药经济报;2001年
5 庄愉;不让BlaR1得逞[N];医药经济报;2002年
6 ;抗耐药菌药物研究的三大策略[N];中国医药报;2004年
7 北京大学第一医院临床药理研究所 郑波 博士;对抗耐药菌 此药显身手[N];医药经济报;2001年
8 本报特约撰稿人 陆志城;与耐药菌的战争在继续[N];医药经济报;2004年
9 易运文;深圳医生全球首次发现耐药基因[N];光明日报;2007年
10 王雪飞;拿什么对付“超级细菌”[N];健康报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 许宏涛;万古霉素耐药肠球菌分子特征及遗传背景研究[D];北京协和医学院;2011年
2 王亚宾;猪肠球菌病病原分离鉴定及其分子致病机制研究[D];河南农业大学;2009年
3 斯庆图娜拉;不同慢性胃病来源HP的耐药特征及抗HP嗜酸乳杆菌的抑制效应分析[D];吉林大学;2011年
4 郭长伟;万古霉素耐药模型的建立以及抗耐药菌化合物的分离[D];上海医药工业研究院;2003年
5 李力韬;耐药脊柱结核个体治疗的疗效评价及基因芯片检测结核耐药的应用研究[D];第三军医大学;2012年
6 陈军;武汉地区结核分枝杆菌药物敏感性及氟喹诺酮耐药分子机制的研究[D];华中科技大学;2011年
7 陈军;武汉地区结核分枝杆菌药物敏感性及氟喹诺酮耐药分子机制研究[D];华中科技大学;2011年
8 宋秀杰;左氧沙星与磷霉素联合对金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度及用PK/PD参数预测体内细菌耐药变异的动物实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
9 梁蓓蓓;PK/PD参数预测金黄色葡萄球菌感染的疗效和抑制细菌耐药突变的系列研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
10 胡付品;碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐药机制及其所致医院感染控制研究[D];复旦大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 姚杰;临床分离肠球菌的耐药性分析及相关耐药机制的研究[D];安徽医科大学;2011年
2 李茹;耐万古霉素肠球菌分子特性研究[D];复旦大学;2010年
3 罗小青;圈养野生动物肠球菌耐药分子流行病学研究[D];福建农林大学;2010年
4 郑远鹏;动物源性高水平庆大霉素耐药肠球菌流行病学研究[D];福建农林大学;2009年
5 赖宝色;玉米粉对水源性肠球菌抗生素耐药形成的影响[D];福建农林大学;2011年
6 徐建国;临床分离肠球菌耐药性、毒力基因及多位点序列分型研究[D];浙江大学;2010年
7 高晓览;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌主动外排耐药机制的研究[D];安徽医科大学;2010年
8 程序;万古霉素耐药靶酶VanX抑制剂及金属-β-内酰胺酶检测试剂Nitrocefin的合成与表征[D];西北大学;2011年
9 杨帆;葡萄糖对水源性肠球菌抗生素耐药形成的影响[D];福建农林大学;2012年
10 李强;化学疗法与结核分枝杆菌细菌学关联性的初步研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2010年
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