子宫内膜异位症病灶组织克隆性的研究

【摘要】：背景：子宫内膜异位症(EM)是妇科的常见疾病,是指子宫内膜组织(包括腺体和间质)在子宫内膜以外的部位生长。EM的病因尚不明确,目前的诸多学说均不能完全解释临床上多种类型内异症的发病。因此,进一步探究内异症的病因对于深入理解该病的发病机制、寻找更准确的诊断方法以及探索更有效的治疗途径,都有十分重要的意义。随着对EM临床基础研究的不断深入,子宫内膜异位症是一种干细胞疾病的假说被提出,并逐渐成为内异症发病机制研究的新方向和新热点。 目的：本课题拟通过检测X-连锁的人类雄激素受体(HumAR)基因的杂合缺失情况,验证EM病灶是否具有干细胞的单克隆特性,以及不同类型EM病灶的克隆性是否存在差异,从单克隆性的角度验证内异症干细胞起源假说。 方法：本研究对象为各种类型EM病灶的新鲜组织标本,利用聚合酶链反应(PCR)和基因片段分析技术,对EM病灶组织限制性核酸内切酶Hhal酶切前后的HumAR基因进行扩增和分析,检测该基因的杂合缺失情况,验证组织的克隆性。并对部分内异症病灶组织进行显微切割,检测单个腺体以及间质的克隆性,分析不同腺体之间、腺体与间质之间的克隆性是否存在差异。 结果：大部分子宫内膜异位症整个病灶均来源于单个克隆(55.1%),不同类型EM的单克隆比例有所差异,其中巧囊为44.9%(31例/69例),盆腔腹膜EM为84.6%(11例/13例),DIE为100%(6例/6例),腹壁EM为64.3%(10例/14例),会阴EM为40%(2例/5例)。巧囊、盆腔腹膜EM、DIE、腹壁EM与自体对照(子宫内膜/正常卵巢上皮／正常腹壁会阴组织)相比,单克隆比例明显增高(P0.05)。会阴EM与自体对照相比,单克隆比例无显著差异(P0.05)。同一患者不同EM病灶各自表现单克隆特性,但可以来源于不同克隆。对多克隆的巧囊和会阴EM组织进行显微切割,发现单个EM腺体为单克隆,但不同腺体可以来源于不同克隆。 结论：大多数EM病灶表现为单克隆,某些特殊类型EM(如DIE)具有显著的单克隆性；同一患者不同部位EM病灶可以各自呈现单克隆特性；多克隆EM组织其单个腺体亦来源于单一克隆。证明子宫内膜异位症病灶具有单克隆特性,但同一患者不同病灶,或同一病灶不同的腺体可以来源于不同克隆。我们的研究提示EM具有干细胞的主要特征之一,即单克隆性。关于EM干细胞的其它特性和EM病灶的干细胞来源,尚待更深入的探索。

【关键词】：子宫内膜异位症 干细胞 克隆性 聚合酶链链反应 杂合缺失
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R711.71
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