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BACP在细胞基因组稳定性中的作用研究

高华  
【摘要】:BACP(BRCA1 Associated Centrosome Protein)是同BRCA1相互作用的中心体蛋白。生物信息学分析表明,BACP基因位于20p11.22-p11.1,编码155,910Da的蛋白质分子。BACP蛋白结构中包含三个coiled-coils、两个SMC和三个EF手等结构域。通过GST pull-down和免疫共沉淀实验,证实BACP蛋白与BRCA1存在相互作用。借助细胞免疫荧光染色技术,确定BACP蛋白与gamma-tubulin共定位于中心体,而且BACP蛋白与BRCA1存在共定位。在细胞周期的推进过程中,BACP蛋白在细胞中心体上的定位基本维持稳定。通过RNA干扰技术抑制内源性BACP蛋白表达后,发现细胞基因组稳定性受到极大影响,表现为细胞出现微核,而且有丝分裂纺锤体结构与功能、染色体分离和胞质分裂均出现异常,最终形成多核细胞。在鉴定了NIH 3T3 BACP高表达细胞所致的裸鼠肿瘤后,使用BACP全长表达质粒转染食管癌KYSE150细胞系建立了BACP稳定高表达细胞株。在该细胞的裸鼠致瘤实验中,BACP高表达食管癌细胞的肿瘤转移率与对照组相比没有差异。通过细胞流式分析发现,BACP蛋白参与细胞周期调控以及DNA损伤应答。UV照射细胞后,BACP蛋白的高表达能够促进G2/M期细胞比例的增加和细胞凋亡的发生。因此,BACP蛋白在细胞分裂和维持染色体稳定性中具有重要功能,BACP表达异常在肿瘤发生、发展过程中具有一定生物学作用。


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