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《中国协和医科大学》 2006年
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M14黑素瘤细胞培养上清液对单核吞噬细胞系统影响的研究

宋宁静  
【摘要】:近半个世纪以来,全球范围内皮肤恶性黑素瘤的发病率和死亡率逐年增加。单核/巨噬细胞是参与机体特异性和非特异性免疫的重要效应细胞,它们通过直接吞噬或分泌细胞因子等多种途径对循环的和组织中的病原体进行有效清除。免疫调节细胞因子白介素12主要由活化的单核/巨噬细胞分泌,有进一步促进机体特异性免疫应答的作用。研究显示:①受肿瘤细胞影响的单核吞噬细胞系统易于发生免疫无能;②荷瘤动物和肿瘤患者其循环的和肿瘤局部浸润的单核/巨噬细胞往往功能受损:③肿瘤细胞能够产生抑制PBMC分泌IL-12和诱导PBMC早期凋亡的物质。因此,各种肿瘤细胞均可通过不同途径妨碍单核吞噬细胞的正常功能,并因此逃逸机体免疫系统的监视和清除。由此我们推测,MM可能也会影响单核吞噬细胞的成熟和功能,通过这一途径,MM得以逃逸机体免疫系统的监视和清除。本研究内容共分两部分四章节。 第一章:黑素瘤细胞培养上清液对人单核细胞体外IL-12产生和CD14、CD1a表达的影响 探讨M14黑素瘤细胞培养上清液(MCS)在体外对人外周血单核细胞分泌白介素12(IL-12)以及单核细胞向树突状细胞分化的影响。分离获得人外周血单核细胞,在富含干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4的完全细胞培养液中,添加不同量的MCS与单核细胞共培养,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测共培养18h后上清液中IL-12的分泌量;用流式细胞术检测连续5d共培养后单核细胞CD14、CD1a的表达情况。结果显示:MCS明显抑制单核细胞分泌IL-12,其抑制效应呈浓度依赖关系;MCS妨碍单核细胞由CD14表型向树突状细胞CD1a表型转化;MCS的以上作用均能被细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂(PD98059)所逆转。总结以上我们发现:体外,①MCS抑制单核细胞分泌IL-12;②MCS妨碍单核细胞向树突状细胞分化;③MCS分泌ERK刺激因子。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R739.5

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【参考文献】
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