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《中国协和医科大学》 2006年
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Tyro 3家族受体与精子发生

王会珍  
【摘要】:Tyro 3家族受体由三个成员组成,即Axl,Tyro 3,和Mer。有报道称三个成员纯合突变的雄性小鼠完全丧失了生殖能力,然而它们调节精子发生的机理仍一无所知。本研究的重点为Tyro 3家族受体调节精子发生的机理。 首先,利用免疫组织化学和免疫细胞化学技术对Tyro 3家族受体成员及其它们的共同配体Gas6在小鼠出生后睾丸发育中的表达和定位进行了系统研究。结果显示所有三个受体及其配体均在小鼠睾丸中表达。Tyro 3只表达于Sertoli细胞,其分布随睾丸的发育而变化。在出生后3天到1周,Tyro 3分布于整个Sertoli细胞胞浆和胞膜;在生后2到5周,Tyro 3主要定位在Sertoli细胞近腔室包绕生殖细胞的突起上;在成年睾丸,Tyro 3的表达呈现阶段依赖性变化:在Ⅰ-Ⅷ期的曲细精管表达较强,而Ⅸ-Ⅻ期的曲细精管表达较弱。Axl的表达模式与Tyro 3相似。但在成年睾丸的Leydig细胞中也有表达。Mer的表达主要存在于原始的精原细胞和Leydig细胞中,而在Sertoli细胞中表达较弱。Gas 6在Leydig细胞中呈强阳性表达,而在原始的精原细胞和Sertoli细胞中呈弱阳性表达。利用RT-PCR方法检测Tyro 3家族受体在原代培养的不同周龄的Sertoli细胞中的表达显示,Axl和Tyro 3呈高表达,且随着Sertoli细胞的发育明显增强;而Mer的表达较弱,且随Sertoli细胞的发育无明显的改变。明确Tyro 3家族受体及其配体在睾丸中的表达为进一步研究它们在调节精子发生中的功能奠定了基础。 其次,利用Tyro 3家族受体基因敲除小鼠为模型,对Tyro 3家族受体敲除后对精子发生的影响进行研究。基因敲除雄性小鼠与正常雌性小鼠的交配实验表明:单基因敲除(A,T,M)和AT双基因敲除雄性小鼠的生育能力与野生型(WT)或三基因杂合突变鼠(atm)相比无明显差异;而AM,TM,aTM,ATm,AtM雄性小鼠虽具有生育能力,但出现不同程度的降低;当三个基因全被敲除(ATM)后,其生育能力则完全丧失。对睾丸发育及精子发生的分析发现:ATM小鼠的睾丸重量明显低于正常鼠;附睾中除了少量、畸形、活动度低下的精子外,多为圆形的未发育成熟的生殖细胞;从3周开始出现生精上皮组织紊乱,部分圆形的生殖细胞脱落进入附睾管,5周时生精上皮出现许多变性的生殖细胞和双核精子细胞,从8周开始,许多空泡和合胞
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:Q344

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