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《中国协和医科大学》 2002年
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抗凋亡基因survivin促进细胞转化的作用机制研究

朱红霞  
【摘要】:肿瘤的发生是一个多因素作用,多基因参与、经过多个阶段才最终形成的极其复杂的生物学过程。在大多数肿瘤中,细胞周期调节失控和细胞凋亡受阻是普遍存在的现象,同时在恶性肿瘤的发生发展中起着非常重要的作用。人们对此进行了大量的研究,近年来取得了重大进展。而survivin则是其中最令人兴奋的发现之一。survivin最初克隆时,被描述成一个抑制凋亡的基因,可以通过抑制caspase的功能而拮抗细胞凋亡。但低等生物中surviVin的同源基因显示,survivin的功能主要是调节细胞分裂,它在细胞分裂后期定位于中间体,保证胞质的正常分裂。因此,survivin很可能处于细胞凋亡和细胞分裂的交叉路口,可以控制这两个重要的细胞生命活动过程。 survivin之所以从克隆之日起就备受关注,主要原因在于其表达的高度特异性。survivin在胚胎发育时期有较高的表达,在正常成体组织一般很少表达。而在大多数肿瘤组织中均可见survivin的异常高表达,成为肿瘤细胞的一个标志,可以作为诊断的重要辅助指标。而且,survivin的高表达还预示着治疗效果不佳且预后不良。但是,survivin在肿瘤发生中的真正作用是什么,目前还没有明确的答案。一些肿瘤组织的免疫组化结果表明,survivin的高表达经常会伴随有一些癌基因的高表达和抑癌基因的低表达现象,这提示survivin与癌基因和抑癌基因可能有某种联系。 为了更直接地观察survivin的作用,我们克隆了人survivin基因,将其分别重组到原核和真核表达载体,并携带不同的标签HA和myc。经过DNA测序,与GeneBank中序列比较,证明序列完全相同。survivin在原核系统可以正确表达为GST融合蛋白,并且为可溶蛋白,经过GST-4B纯化后可以用于蛋白相互作用的研究。而真核表达载体可以在真核细胞中正确表达,Western Blot分析,
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R730.2

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