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《中国协和医科大学》 2002年
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人血管紧张素原基因和肾素基因多态性分析及与原发性高血压相关性研究

刘天承  
【摘要】:原发性高血压是一种复杂多基因疾病,近来流行病学研究揭示,血压变化中大约40%由遗传因素所决定。尽管家系连锁分析、群体关联分析和动物模型实验已被广泛用于对原发性高血压相关基因的研究,然而到目前为止,与原发性高血压相关联的致病基因仍未确定。 肾素-血管紧张素系统在血压调节和维持体内水、盐平衡方面起着重要作用。结合我们基因组扫描的初步结果,我们应用单链构象多态性分析技术,变性及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,PCR产物的直接测序和克隆测序等方法对血管紧张素原基因启动子区及增强子区、肾素基因的第一内含子序列中的多态性进行了系统的研究。 血管紧张素原基因多态性的研究最为广泛,其中T235M、M174T和A-6G多态性已被证实在多个群体中与高血压相关联。在研究的过程中,我们发现了三个新的单核苷酸多态性:-1179A/G(G等位基因频率:0.199)、+2054C/A(A等位基因频率:0.157)和+2127C/T(T等位基因频率:0.157)。在应用单链构象多态性分析-1074G/T多态性位点时,发现在非变性胶上,DNA双链分子的电泳迁移率不同,PCR产物经双向测序后,发现还存在另一个-1179A/G多态性,相应的序列已提交GenBank,获得注册号:AF424741。在中国北方汉族人群中-1179A/G、-1074G/T、-793G/A和-218G/A处于绝对的连锁不平衡,在所检测的416个样品中未发现重组现象。+2054C/A位于3′非翻译区,临近“AATAAA”加尾信号,而+2127C/T靠近第二个增强子核心序列。+2054C/A和+2127C/T也处于绝对的连锁不平衡。-776T/C、-6A/G两多态性表现出与西方白种人相反的等位基因频率分布(既主等位基因发生了颠倒)。我们的实验结果表明,位于血管紧张素原基因启动子区的多态性呈现出种族的特异性。我们应用SPSS中的卡方分析,对血管紧张素原基因调控区的九个多态性进行了群体关联分析,未发现与原发性高血压相关联。应用EH程序进行单体型分析,发现启动子区七个多态性处于紧密的连锁不平衡(P<0.005),但不与原发性高血压相关联。虽然-6A和-20C在体外表达实验中均可以增加基因的基础转录效率,但是我们的实验结果显示,由-6A和-20C所构成的单体型在正
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:Q987;R544.1

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