菌根真菌对两种药用石斛的生长发育和基因表达的影响

【摘要】：本文研究了菌根真菌对两种药用石斛的生长发育和基因表达的影响，包括铁皮石斛(Dendrobium candidum)原球茎液体培养工艺和真菌诱导子的作用、菌根真菌对两种药用石斛生长和形态的影响、菌根真菌对金钗石斛(Dendrobium nobile)基因表达的影响。 采用液体和固体培养基研究铁皮石斛原球茎的生长表明，无论鲜重还是干重，液体培养基均明显优于固体培养基(P＜0.001)。不同基本培养基对原球茎生长的作用是：对于鲜重，67-V极显著好于B_5(P＜0.01)，B_5极显著好于1／2MS(P＜0.01)，1／2MS显著好于MS(P＜0.05)；对于干重，67-V与B_5没有显著性差异(P＞0.05)，B_5极显著好于1／2MS(P＜0.01)，1／2MS极显著好于MS(P＜0.01)。进一步通过正交设计研究蔗糖浓度和马铃薯提取汁浓度、不同种类和浓度的氮源、不同接种量和培养液体积对原球茎生长的作用。结果表明，有利于原球茎生长的最佳培养基组合为：67-V基本培养基+30g／L蔗糖+200g／L马铃薯提取汁+100mg／L(NH_4)_2SO_4+800mg／LKNO_3，采用250ml三角瓶加入100ml培养液，接种量大于6g／flask，可获得较大的生物量。据TLC初步分析，原球茎样品有明显的次生代谢产物。14种真菌诱导子对原球茎生物量的增加均无显著性影响(P＞0.05)，真菌诱导子对原球茎样品中多糖的含量具有明显影响。 研究了瘤菌根菌属(Epulorhiza sp.)真菌AR-18或AR-15对铁皮石斛和金钗石斛生长的影响。在琼脂培养基上，真菌AR-18或AR-15对铁皮石斛和金钗石斛的鲜重和干重的增加均没有显著性影响(P＞0.05)。在蛭石基质上，真菌AR-18对金钗石斛鲜重