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《中国协和医科大学》 1997年
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绿脓杆菌外膜通透性与耐药性关系及其在新药筛选中初步应用的研究

左联  
【摘要】:绿脓杆菌是一系列严重的化脓性感染的重要致病菌,具有天然的和后天获得的耐药性,临床治疗很棘手。本论文了解了绿脓杆菌外膜微孔蛋白的性质,研究了绿脓杆菌外膜通透性与耐药性之间的关系,探讨了临床分离的多重耐药绿脓杆菌的耐药机制,并在此基础上首次建立了作用于外膜的抗绿脓杆菌药物的定向初筛方法,具有较重要的理论与实际意义。 在研究绿脓杆菌外膜微孔蛋白性质时,选用了绿脓杆菌标准菌株PAO1,以EDTA-溶菌酶法与超速离心法提取其外膜蛋白,SDS-PAGE分析外膜蛋白图谱,并利用DEAE离子交换高压液相色谱柱加以纯化,通过重建蛋白脂质体测定了不同药物对外膜的通透作用。该部分实验结果证实了绿脓杆菌外膜微孔蛋白OprC(分子量70KD)、OprD_2(46KD)和OprE(43KD)能够形成小孔道,具有通透功能。但小分子亚胺培能(碳青霉烯类)为选择性通过OprD_2通道进入胞内,头孢菌素类和氨基糖苷类药物进入细菌体内的途径仍不十分清楚。 在探讨临床分离的多重耐药绿脓杆菌的耐药机制过程中,以绿脓杆菌标准菌株PAO1为对照,应用SDS-PAGE外膜蛋白图谱和β-内酰胺酶测定方法,研究了临床分离的四株多重耐药绿脓杆菌对碳青霉烯类等β-内酰胺类抗生素的耐药机制。结果表明,四株绿脓杆菌分离株均缺失了外膜蛋白OprD_2,其中有两株菌产生了较高水平的β-内酰胺酶,提示其多重耐药机制可能是OprD_2的缺失和大量β-内酰胺酶的共同作用结果,其中对亚胺培能耐药的主要原因可能是OprD_2丢失。 碳青霉烯类为β-内酰胺类化合物,对β-内酰胺酶稳定,对绝大多数致病菌尤其是引起医院内感染的多重耐药菌株包括绿脓杆菌具有较强的抗菌活性。本初筛方法的建立有助于寻找到作用于绿脓杆菌外膜的碳青霉烯类抗生素,并且可用于抗菌药物的作用机制研究及药物应用前景的评价。 在建立初筛方法的过程中,首先选择了绿脓杆菌外膜OprD_2专一缺陷菌株7208,利用耐药菌株绿脓杆菌7208、绿脓杆菌标准菌株PAO1和PAO1(含50ug/ml氨苄青霉素)为检定菌,通过不同类型抗生素的验证,证明了该方法对碳青霉烯类化合物有较高的特异性,可用于初筛。另外,利用本初筛模型也可筛选到与β-内酰胺类抗生素有协同作用的活性物质或造成外膜缺损的化合物。 应用所建立的初筛方法,从1255株放线菌中筛选到11株阳性菌株,但要说明其作用机制是否对外膜有作用,需要作进一步研究。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:1997
【分类号】:R965.1

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1 许萍;绿脓杆菌与难治性下呼吸道感染[J];医学综述;2000年11期
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1 杜佩英;人体对绿脓杆菌外膜蛋白菌苗的免疫应答[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1999年05期
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6 张昭馥;;抗生素的通道[J];国外医学.药学分册;1991年06期
7 敖翔;唐爱国;;绿脓杆菌主动外排泵抑制剂的研究现状[J];实用预防医学;2007年03期
8 (广了)镇江;;烧伤脓毒症:绿脓杆菌的相互干扰[J];国外医学(创伤与外科基本问题分册);1982年02期
9 郭晓奎;马佳毓;王玉兰;齐左臣;李绍贤;;哈尔滨市112株绿脓杆菌的血清学分型和耐药性测定[J];中国微生态学杂志;1991年01期
10 王济兴;夏瑞雪;;144株绿脓杆菌药敏结果分析[J];河北医药;2010年16期
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1 刘前桂;冯俐;李金红;康丽君;;重症肺结核合并严重绿脓杆菌感染40例临床分析[A];中国防痨杂志2003第25卷增刊——2003年中国防痨协会全国学术会议论文集[C];2003年
2 曹国芳;许涌;沈华美;;浅析特重度烧伤绿脓杆菌感染的临床特点与护理[A];全国神经内外科专科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2004年
3 薛光辉;任丽君;;乙酰胺法快速检定绿脓杆菌在医院制剂中的应用[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
4 袁琳;金华芳;乐知;王艺峰;陈红;;C_6硫酸酯化壳聚糖对绿脓杆菌增殖的抑制作用[A];2007年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2007年
5 艾启俊;于庆华;张红星;张馨如;瓢金港;;PCR技术检测编码绿脓杆菌外毒素A基因[A];中国食品科学技术学会第五届年会暨第四届东西方食品业高层论坛论文摘要集[C];2007年
6 陆国平;陆铸今;吴芳;张灵恩;王岱明;;儿童社区获得性绿脓杆菌败血症[A];2006(第三届)江浙沪儿科学术会议暨浙江省儿科学术年会论文汇编[C];2006年
7 蔡加昌;周宏伟;陈功祥;张嵘;;KPC-2型碳青霉烯酶合并外膜蛋白缺失引起阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药[A];2007年浙江省医学检验学学术年会论文汇编[C];2007年
8 王多宁;白刚;;绿脓色素的抗菌作用及其与临床感染的关系[A];全国第三届烧伤外科学术交流会议论文摘要[C];1991年
9 张雅萍;肖光夏;秦孝健;刘晓禄;;十四年烧伤绿脓杆菌、沙雷氏菌和金葡菌的监测及其药敏变化[A];中华医学会第五次全国烧伤外科学术会议论文汇编[C];1997年
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1 陈金伟;如何合理使用抗生素(上)[N];医药经济报;2005年
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3 ;武汉发明新一代抗生素[N];中国高新技术产业导报;2002年
4 季平;抗生素不是“万能药”[N];中国消费者报;2005年
5 驻沪记者 张莉;先声药业重拳出击高端抗生素[N];医药经济报;2008年
6 项铮;先声药业重拳“出击”高端抗生素[N];科技日报;2008年
7 湖南省妇幼保健院药剂科 江慧星;茶可与抗生素同服[N];大众卫生报;2002年
8 徐铮奎;培南类抗生素前景看好 国内4AA产能放大[N];中国高新技术产业导报;2009年
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10 本报特约撰稿人 朱军生;一季度抗生素市场更趋理性[N];医药经济报;2005年
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1 左联;绿脓杆菌外膜通透性与耐药性关系及其在新药筛选中初步应用的研究[D];中国协和医科大学;1997年
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