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《中国协和医科大学》 1997年
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DCS细胞肿瘤相关膜蛋白的初步研究

段德义  
【摘要】:恶性肿瘤的两个主要特征是其细胞无节制性生长和向其邻近组织侵袭或远隔部位的转移。一百多种肿瘤相关基因参与肿瘤的起源和发展,它们的表达产物多种多样,其中有些位于细胞膜。肿瘤相关细胞膜蛋白单克隆抗体在肿瘤诊断、治疗以及探索肿瘤相关基因等研究领域中有重要意义。 用本室新近建立的小鼠树突状细胞肉瘤(DCS)细胞系10~7细胞腹腔注射免疫大鼠,取其脾与大鼠骨髓瘤细胞IR983F融合,制备了与小鼠正常组织未见明显交叉反应的单抗983D4,其亚类类为lgG2a,该抗体还与某些小鼠肿瘤MFC,LA795,B22等有交叉反应,其抗原分子量约38kD,28kD。用983D4单抗处理DCS细胞,观察DCS细胞体外生长速度、软琼脂克隆形成、运动能力、水解酶活性,粘附性,侵袭性和和体内转移率等生物学行为,结果发现:983D4能轻度抑制DCS生长和软琼脂克隆形成,但对DCS自身粘附及对FN、LN基质粘附、运动、水解、侵袭转移能力等方面均未发现明显作用,为了进一步认识该抗原的性质,首先构建DCS细胞cDNA表达文库,然后用983D4进行筛选。 用异硫氰酸胍-酚-氯仿抽提一步法提取DCS细胞总RNA 1.13mg,甲醛变性胶电泳分析其质量。利用oligo-dT纤维素层析柱分离poly(A)mRNA 8.4ug,逆转录酶作用下合成cDNA第一链,E coli DNA polymerase I催化合成cDNA第二链,α~(32)p掺入碱性凝胶电泳分析cDNA 片段大小,分布范围集中于400-3000bp。SephacrylS400离心柱除去小分子量cDNA片段后,双链DNA与E coR1 adaptor相连,磷酸化adaptor,再与EcoRl酶切的脱磷酸化的λgt11 arms相连,E coli extract包装重组DNA即为cDNA表达文库。文库总滴度1.11×10~6pfu,兰斑数10%。在1.5%LB琼脂平板上行文库的铺平板培养,硝酸纤维素滤膜
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:1997
【分类号】:R730.2

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 刘扬;单克隆抗体在肿瘤导向治疗中的应用价值[J];国外医学(肿瘤学分册);1994年01期
2 李存玺,顾蓓,高进;小鼠树突状细胞肉瘤细胞系的建立及形态学鉴定[J];解剖学报;1997年01期
3 李存玺,顾蓓,高进;小鼠树突状细胞肉瘤细胞系的细胞功能鉴定[J];解剖学报;1997年01期
4 刘西平,袁恬莹;介绍一种简便的RNA分离制备方法[J];生物化学与生物物理进展;1990年01期
5 董志伟,万文徽,李振甫,邱万荣,魏淑敏;抗胃癌细胞系单克隆抗体PD4的初步研究[J];生物化学杂志;1985年02期
6 王易伦,孙仑泉,万芷芳,苏成芝;人胃癌组织cDNA文库的建立[J];生物化学杂志;1991年06期
7 李存玺,顾蓓,高进;癌细胞粘附、位移和水解酶活性综合测定方法的建立[J];中华病理学杂志;1996年05期
【共引文献】
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1 吴丛梅,黄天华,吴德生,谢庆东,徐小虎;pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
2 阮烨,王晓云,谢庆东,黄天华;外源DNA转染精子的实验研究[J];癌变.畸变.突变;2004年03期
3 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
4 谢永芳,舒坤贤,梁亦龙,袁帅,张继承;小鼠胚胎发育中期肠细胞增殖与凋亡的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
5 陈传德,吴中亮,陈家堃;乙酸镍诱导的人支气管上皮细胞系转化细胞基因组不稳定性分析[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
6 王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
7 熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
8 康振桥;季艳霞;杨志勇;苏光;崔彦芝;;血管内皮生长因子亚型在人乳腺癌细胞中的表达差异[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
9 安刚;黄天华;谢庆东;王德刚;;pCXN2-mIZUMO对C57BL/6小鼠生育能力的影响[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
10 朱斌;杨罗艳;赵晓昆;;膀胱癌多药耐药基因MDR-1与金属硫蛋白-3表达的关系[J];癌变.畸变.突变;2007年05期
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1 王春花;成军;郎振为;吴煜;杨艳杰;张黎颖;刘妍;;基因表达谱芯片技术筛选XTP3蛋白反式调节基因[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
2 唐南洪;王晓茜;李秀金;陈燕凌;;构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因(hGS)的肝细胞[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
3 黄家强;卜夏;李卓娅;龚非力;;人TNFα分泌型、跨膜型和跨膜稳定型重组体的构建表达及杀瘤效应[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
4 郭昱嵩;王中铎;刘楚吾;陈志明;刘筠;;勒氏笛鲷(Lutjanus russellii)线粒体DNA全序列的测定与分析[A];中国海洋学会2007年学术年会论文集(下册)[C];2007年
5 樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;子房注射法获得转基因甜瓜植株[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
6 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫表面抗原SAG2基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
7 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫致密颗粒蛋白GRA4基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
8 唐小江;马争;黄建勋;黄汉林;李来玉;牛侨;;正己烷引起红细胞膜血影蛋白交联的研究[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年
9 商庆龙;谷鸿喜;;HPV16 L1蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性研究[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年(1993—2003)论文集[C];2003年
10 陈振文;赵太云;孙贺娟;路静;王迎;孟霞;曹争和;王钜;;微卫星DNA与生化标记分析对长爪沙鼠群体遗传分析的比较[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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2 于双妮;胰腺癌差异表达microRNAs的鉴定及功能研究[D];北京协和医学院;2008年
3 方晨;Her2全人源抗体的制备及生物学功能研究[D];第二军医大学;2011年
4 陈其华;前癃通胶囊治疗良性前列腺增生症临床观察及其对间质细胞作用的实验研究[D];湖南中医药大学;2011年
5 马丽菊;云南宣威肺癌细胞系侧群细胞特征分析[D];昆明医学院;2011年
6 许雷;大青杨纤维素合酶基因的克隆与遗传转化的研究[D];东北林业大学;2011年
7 朱伟;摄食抑制因子NUCB2/Nesfatin-1对机体胰岛素敏感性的影响[D];重庆医科大学;2011年
8 王金鹏;4α糖基转移酶环化活性定向控制及其大环糊精产物的分离及应用研究[D];江南大学;2011年
9 程光平;巴马繐唇鲃生物学及遗传学研究[D];中国海洋大学;2011年
10 宋娜;西北太平洋两种海洋鱼类的分子系统地理学研究及分子标记在褐牙鲆增殖放流中的应用[D];中国海洋大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 朱晓娟;重组免疫毒素抗c-Met/PE38KDEL的构建、表达、纯化及初步鉴定[D];南京医科大学;2009年
2 钱静;携带Apoptin双调控溶瘤腺病毒治疗肝癌的研究[D];浙江理工大学;2010年
3 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
4 陆玉成;AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析[D];郑州大学;2010年
5 吕文兵;杜氏盐藻异养转化藻株的鉴定及初步功能分析[D];郑州大学;2010年
6 李静;父源性HLA-A基因与子痫前期相关性研究[D];郑州大学;2010年
7 张燕松;肾移植术后患者PBMCs中NF-κB的活性和TNF-α mRNA的表达研究[D];郑州大学;2010年
8 张磊;杜氏盐藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗体的制备及其在MDCK细胞中的定位[D];郑州大学;2010年
9 冯玖玲;杜氏盐藻RbcS基因家族新成员的克隆及功能研究[D];郑州大学;2010年
10 成琳;粘着斑激酶在急性白血病中的表达及其临床意义[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
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1 孙仑泉,王易伦,毛积芳,万芷芳;改良酸性胍一步法提取RNA技术[J];第四军医大学学报;1989年05期
【相似文献】
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1 李洪涛;马波;王君伟;;抗鸭胸腺细胞单克隆抗体的制备及其免疫组织化学研究[J];中国免疫学杂志;2008年01期
2 裴秀英;文润玲;戴寿芝;;酶联免疫离心法筛选B细胞杂交瘤[J];宁夏医学杂志;1992年05期
3 陈红杰,刘德文,张悦红,沃兴德,赵革平,何─中;─株特异抗人血浆Lp(a)单克隆抗体(A5g3)的制备及特征分析[J];中国免疫学杂志;1996年05期
4 马可为,袁育康,范桂香,吕卓人,王军阳,李建国,任会勋;抗哇巴因单克隆抗体的制备及初步鉴定[J];西北药学杂志;2005年05期
5 潘晓蔚;苏艳阳;曾艳;;应用抗真菌药物处理染菌杂交瘤细胞对抗体产生的影响[J];沈阳医学院学报;2007年01期
6 王燕琴;李克生;杜蕙芬;胡永浩;;抗大肠杆菌O157单克隆抗体制备过程中杂交瘤细胞的观测[J];甘肃农业大学学报;2008年03期
7 颜苹苹;李文展;张子伯;林文光;叶庆林;;肿瘤坏死因子单克隆抗体(TNF—McAb)的制备获得成功[J];福建医科大学学报;1989年03期
8 葛曰萍;陈尊器;陈维洁;邹东霆;丘翠芳;;二株抗人原发性肝癌AFP—McAb杂交瘤的建立[J];广州医学院学报;1993年03期
9 孙靖;李筱荣;孙慧敏;袁佳琴;;白内障术后后囊浑浊的防治和抗人晶状体上皮细胞单克隆抗体的制备[J];眼外伤职业眼病杂志(附眼科手术);2007年03期
10 吴炜;滕巧泱;吴佳俊;黄振宇;周继勇;;抗鸡CD25单克隆抗体的制备与鉴定[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2007年05期
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1 侯淑萍;刘原君;姚卫峰;胡春燕;齐蔓莉;王惠平;刘全忠;;抗衣原体噬菌体衣壳蛋白VP1单克隆抗体的制备和应用研究[A];中华医学会第十五次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2009年
2 侯淑萍;刘原君;马璟玥;刘全忠;;衣原体GPIC噬菌体衣壳蛋白Vp1的单克隆抗体的制备及鉴定[A];中华医学会第16次全国皮肤性病学术年会摘要集[C];2010年
3 王凤鸣;刘彤;孙中文;张学光;;一株新的鼠抗人GL50单克隆抗体及其生物学功能的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
4 郑骏年;武艺;吴阳;李望;刘俊杰;温儒民;朱海涛;孙晓青;;抗人肾癌G250单克隆抗体的制备及其功能鉴定[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
5 刘兢;王深;李昀;李平;杨正洪;吕源刚;朱德厚;张荣兴;姚阳;吴强;管伟宁;杨枫;;抗P185neu/cerbB-2单克隆抗体的制备及性质研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
6 于翠;施曼铃;王桂珍;吴建祥;周雪平;;几种重要植物病毒单克隆抗体的制备和快速检测方法的建立[A];第三次全国植物病毒和病毒防治学术研讨会论文集[C];2003年
7 张寄南;潘世扬;黎青;刘志忠;卞智萍;徐晋丹;顾春荣;杨笛;;氧化低密度脂蛋白单克隆抗体的制备与鉴定1[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年
8 刘怀然;秦海斌;刘家森;司昌德;韩凌霞;姜骞;曲连东;;兔出血症病毒单克隆抗体的制备及鉴定[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
9 徐敏;马伟斌;;单克隆抗体靶向给药系统[A];浙江省药剂学术会议论文集[C];2006年
10 刘健宏;王标;庄向生;王长兵;周伦江;刘玉涛;;单克隆抗体与免疫荧光染色技术[A];福建省科协首届学术年会卫星会议——畜牧业持续发展对策学术研讨会论文集[C];2001年
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1 贾超时李德成;单克隆抗体产业研发项目将落户大庆[N];大庆日报;2008年
2 小许;市领导会见美国生物医药巨头[N];无锡日报;2010年
3 主持人:宋莉 王迅;一切为了中国的医药事业[N];科技日报;2006年
4 姜海;英科学家发现单克隆抗体[N];科技日报;2007年
5 本报特约撰稿人 李朝;单抗:生物医药发展的主旋律[N];医药经济报;2006年
6 石岩;“协和”公司被判侵权[N];中国知识产权报;2006年
7 记者 项铮;赛诺菲巴斯德研制抗狂犬病单克隆抗体[N];科技日报;2008年
8 记者 杨俊坚;单抗药物:站在同一起跑线[N];医药经济报;2011年
9 张蕾;治疗用单克隆抗体[N];光明日报;2002年
10 李晓;“苏州系列”单克隆抗体走向世界[N];苏州日报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 段德义;DCS细胞肿瘤相关膜蛋白的初步研究[D];中国协和医科大学;1997年
2 李英;大鼠抗肝癌单域抗体与力达霉素强化融合蛋白的构建及其抗肿瘤活性研究[D];中国协和医科大学;2005年
3 曹伟;ULBPs的免疫识别机制、其剪切变体的功能以及相关的肿瘤免疫逃逸机制的研究[D];中国协和医科大学;2007年
4 杨光;卵巢癌免疫治疗的实验研究[D];中国协和医科大学;2001年
5 马凤蓉;编码人新分化抗原5C5与5D4全长cDNA的克隆、序列分析及表达[D];中国协和医科大学;1998年
6 崔永春;类脂A活化人类γδT细胞的机制与效应研究[D];中国协和医科大学;2006年
7 彭燕蓁;光动力学人卵巢癌细胞裂解物的免疫源性及比较蛋白质组学研究[D];中国协和医科大学;2005年
8 潘雪娜;抗人膀胱癌单抗BDI-1的制备、鉴定及~(99m)Tc-标记的放射免疫显像实验研究[D];吉林大学;2007年
9 齐锦;MICA反应性γδT细胞抗肿瘤作用的研究[D];中国协和医科大学;2003年
10 秦迎松;人促血液血管细胞生成素(Haemangiopoietin, HAPO)单克隆抗体的制备、鉴定及应用[D];中国协和医科大学;2004年
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1 潘娜;联合应用DNA免疫和细胞加强制备CD55单克隆抗体及抗体生物学活性分析[D];中国协和医科大学;2006年
2 胡晓林;重组鼠抗人纤维蛋白单链抗体的构建和表达[D];中国协和医科大学;2007年
3 张磊;淋巴结树突状细胞对肾癌预后的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
4 杨玉萍;(一)猪鼻支原体免疫胶体金快速检测卡的研制 (二)抗念珠状链杆菌单克隆抗体的制备和鉴定[D];中国协和医科大学;2007年
5 赵鲁汀;增殖诱导配体(APRIL)与人类γδT细胞的功能相关性研究[D];中国协和医科大学;2006年
6 王玉平;玉米赤霉烯酮ELISA定量检测试剂盒研制高效液相色谱法的建立及标准比对研究[D];河北医科大学;2005年
7 郑佳;T-2毒素抗独特型多抗的制备及无毒ELISA定量检测试剂盒的初步研制[D];郑州大学;2006年
8 毕立清;抗人胰岛素样生长因子-1单克隆抗体的制备与鉴定[D];南京医科大学;2008年
9 屈浩;小鼠抗人CD52单克隆抗体HI186的生物学功能研究及其单链抗体的构建[D];中国协和医科大学;2006年
10 易婷婷;抗人蛋白酶激活受体3单克隆抗体的制备与鉴定[D];汕头大学;2007年
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