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《中国协和医科大学》 1993年
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内毒素休克狗肝脏蛋白激酶C、钙、钙调素依赖性蛋白激酶和蛋白激酶A的酶动力学改变

陶永平  
【摘要】:感染性休克是临床上常见的一种急性综合症。虽然使用广泛的预防治疗措施,包括扩容,高效抗菌素、严格监护和外科手段等,至今感染性休克病人的死亡率仍很高。休克的病理过程涉及循环系统血液动力学的紊乱和多种器官组织代谢的改变,最终产生多器官功能衰竭。目前对休克病理变化的细胞和分子学机理不完全清楚。其中肝脏功能异常在感染性/内毒素休克代谢紊乱过程中起重要作用,且决定病情的发展和预后。因此,探讨肝功能异常的机理将为临床上有效治疗休克提供生化学的依据。正常情况下肝脏的代谢水平受多种激素的控制。这些激素主要通过二条信息传导通路,调节细胞内第二信使如cAMP,Ca~(2+)和甘油二酯(DG)的含量和活性的变化。这二者均激活多种不同的蛋白激酶,通过催化蛋白磷酸化以调控细胞内一些调节酶和受体蛋白的活性。以往的研究表明感染性或内毒素休克肝功能紊乱和激素调控系统的损害有关,但对具体受损环节尚无一致的认识。至今有关休克时肝脏几种蛋白激酶的变化尚未见详细的报道。在此,我们系统地研究了内毒素休克狗肝脏三类蛋白激酶的酶动力学变化,包括:1、胞浆和膜结合蛋白激酶C(PKC);2、Ca~(2+)、CaM依赖性蛋白激酶(Ca~(2+)/CaM Kinase);3、Ⅰ型和Ⅱ型蛋白激酶A(PKA),进一步探讨感染性休克时肝功能异常的病理生理学基础。 一、内毒素休克狗肝脏PKC的酶动力学改变 (一)肝脏PKC的提取和活性测定。实验用雄性杂种狗,体重15到20公斤。随机分成两组:对照组和休克组,每组狗6至8条。休克组一次静脉注射0.5毫克/公斤大肠杆菌内毒素,该组狗显示典型的休克症状。注射内素素后4小时,麻醉,取肝脏分析蛋白激酶C的酶动力学。 肝脏除去脂肪和血管胆管组织,切碎、匀浆,高速离心。收集的上清液为胞浆PKC粗捉物。收集的膜沉淀用0.1%的Triton
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:1993
【分类号】:R363

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