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《中国协和医科大学》 1993年
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两种与生育有关的人精子膜蛋白基因的研究

刘孟元  
【摘要】:精子细胞膜(简称“精子膜”)蛋白在受精过程中占有十分重要的地位,尤其是对精子运动、精卵识别、融合及早期胚胎发育等起着重要的作用。因此精子膜蛋白的研究一直受到人们的极大关注。我们在国际上较早地开展了这一方面的工作。目前已分离纯化了数种家兔和人的精子膜蛋白,并制备了其单克隆抗体,利用抗体表位筛选法从大鼠和人睾丸表达型λgtll cDNA库中筛选获得了数种相应的精子膜蛋白的cDNA片段,并进行了核苷酸的序列分析。 本研究是在本实验室以前工作的基础上,对两种人精子膜蛋白基因做进一步的研究,是精子膜蛋白研究课题中部分工作的继续。论文分为两部分: 1.人精子膜YWK-Ⅱ抗原的cDNA克隆、序列分析及其同源性比较 本实验室过去曾用抗人精子单克隆抗体YWK-Ⅱ,从大鼠睾丸λgtll表达型cDNA库中筛选获得一个eDNA片段—RSD-2。为了进一步研究人精子中编码该蛋白基因的特征,本研究又以RSD-2为探针对人睾丸λgtll cDNA库进行筛选。所获得的7个阳性克隆其插入子的大小分别为:R171:1.2kb,R321:0.7kb,R514:0.5kb,R642:1.0kb,R721:1.8kb,R915:1.4kb和R921:1.6kb。 选择其中一个克隆(R921)进行研究,首先绘制其插入子的限制性内切酶酶切物理图谱,制备测序亚克隆进行DNA序列测定分析。核苷酸序列测定根据Sanger双脱氧终止法原理,同时使用了同位素掺入的人工测序和荧光素标记的全自动测序两种方法,对各个测序片段重复测定以保证测序结
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:1993
【分类号】:R321

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【参考文献】
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