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《中国协和医科大学》 1999年
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小鼠胸腺衰老相关新基因的克隆及鉴定

苏华  
【摘要】:特异性免疫应答依赖于T淋巴细胞,而胸腺是T淋巴细胞发育和分化的重要场所。T细胞的前体细胞从骨髓迁移至胸腺,在胸腺经历了阴性选择和阳性选择,最终只有5%的T细胞发育成熟并输出到外周淋巴器官发挥免疫应答功能。对于免疫系统而言,胸腺处于十分重要的地位,在机体衰老过程中,胸腺比其它器官表现出更明显的增龄性改变—退化(萎缩)。我们推测这一过程必然与代谢过程一样受控于遗传,该过程势必伴随众多基因的参与。然而,迄今为止我们对其基因调控机制还所知甚少。从胸腺中寻找与衰老相关的未知或已知基因并探讨它们与T淋巴细胞分化发育及衰老的关系将有助于更深入的了解免疫与衰老之间的密切关系。 本文采用差异显示反转录PCR技术(DDRT-PCR)对1月和10月龄小鼠胸腺mRNA的差异表达情况进行了分析,共获得差异表达的cDNA片段108条,其中90条主要表达于1月龄小鼠胸腺中,只有18条表达于10月龄小鼠胸腺中。我们选择了50条差异片段将其纯化并标记成探针分别与1月和10月龄小鼠胸腺总RNA进行Northern杂交,结果有30条为杂交阳性,约为70%左右。将它们克隆到pGEM-T easy载体上,选择其中9条cDNA片段,对它们进行测序,并通过国际互联网与Genbank、EMBL和DDBJ的DNA数据库比较序列的同源性,发现有4个克隆为新的EST,分别命名为MT46,MT42S,MT38和MT⑥。将上述序列送到Genbank的dbEST分部,均给予了序列编号,分别为MT46—AW086505,MT42S—AW086506,MT38—AW086507和MT⑥—AW086508。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:1999
【分类号】:R392

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