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《中国协和医科大学》 2005年
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BAC介导ApoCⅢ增强子删除的人载脂蛋白apoAⅠ/CⅢ/AⅣ/AⅤ基因簇突变株转基因鼠系的建立以及其与完整基因簇转基因小鼠的比较研究

韦玉生  
【摘要】:迄今已知人载脂蛋白基因家族包括19个成员,主要基因分布在5条染色体上,其中apoAI、apoCIII、apoAIV和apoAV基因于11号染色体q23区约50kb的区域内形成一个基因簇,簇内apoCIII的转录方向与另3个基因相反。ApoAI簇基因表达呈现相对组织特异性:apoAI、apoCIII、apoAV基因以肝脏表达为主;apoAIV基因以小肠表达为主。apoCIII增强子作为基因簇的共调控元件调节apoAI、apoCIII和apoAIV的肝肠组织特异性表达。ApoAI簇基因成员均在脂类代谢系统中发挥重要作用,并通过多种不同机理参与动脉粥样硬化等复杂心血管疾病的发生、发展过程。简单归纳:基因簇中apoAI和apoAIV促进胆固醇的逆转运,与动脉粥样硬化的发生、发展关系密切;而另外两个成员apoCIII和apoAV强力调节机体甘油三酯水平,但发挥增高与降低的相反作用,它们与高甘油三酯血症密切相关并与动脉粥样硬化有联系。因此从整个基因簇水平研究簇内基因的表达调控机理和各基因在脂类代谢与动脉粥样硬化中的整体作用有重要意义。 转基因动物是指以实验方法导入的外源基因在其染色体基因组中稳定整合并能遗传给后代的实验动物。利用转基因动物研究真核基因的表达调控既可以在分子水平上设计实验,又能包括基因表达的诸多影响因素,以调控系统的基本特征为线索,从四维时空观察转基因的整体效应。利用转基因动物技术可以建立人类疾病相关基因的转基因动物模型,以探讨异常基因的表达调控规律。大容量载体技术可以模拟机体天然染色质微环境,克服以往小片段重组体转基因实验中忽略基因间或调控元件之间相互作用的缺陷,从而可以研究大范围基因簇的表达调控规律。近年发展起来的细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)遗传特性稳定,不易发生缺失和重组;制备和纯化方法简便快速;可直接进行DNA测序分析;载体上的稀有限制性内切酶位点NotI可以方便地线性化BAC DNA并去除载体片段,这些优点使其被广
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:Q78

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