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《中国协和医科大学》 2007年
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缺血性脑卒中诱发肠屏障改变的实验研究

齐志伟  
【摘要】: 目的:研究缺血性脑卒中对肠粘膜屏障功能的影响和可能机制。 方法:杂犬20只,随机分为实验组和对照组(即伪手术组),每组10只。实验组采用双硅柱置入法制作缺血性脑卒中模型。实验前、实验后0.5、3、6、12、24小时行血浆二胺氧化酶(DAO)活性和D-乳酸(D-lac)浓度检测;实验前、实验后12、24小时行血浆LPS浓度检测;光镜下对肠粘膜病理形态进行观察;免疫组化法分析肠粘膜紧密连接Occludin和ZO-1蛋白的表达;TUNEL法检测肠上皮细胞凋亡。两组动物在实验全过程中维持全身循环灌注、氧合稳定正常,并行胃肠营养。 结果:实验组动物均形成脑梗塞。和对照组比较,实验组血浆24hDAO活性、12h和24hD-lac浓度明显增高;12h和24hLPS明显增高;实验组紧密连接蛋白Occludin和ZO-1蛋白平均光密度明显降低;实验组凋亡指数明显增高;差异均有统计学意义。相关和回归分析显示,血浆24hDAO与24h、12h、6hD-lac呈正相关关系;血浆24hLPS与24h、12h、6h D-lac和24hDAO呈正相关关系,血浆12hLPS与24hD-lac呈正相关关系;Occludin蛋白平均光密度与血浆24hDAO、24hD-Lac、24hLPS和12LPS呈负相关,ZO-1蛋白平均光密度与24hDAO、24hD-Lac和24hLPS呈负相关,ZO-1与Occludin蛋白平均光密度呈正相关;凋亡指数与24hDAO、24hD-LAC、24hLPS和12LPS呈正相关,凋亡指数与ZO-1、Occludin蛋白平均光密度均呈负相关。光镜下观察,实验组存在小肠病理损伤,对照组小肠结构正常。 结论:(1)应用双硅柱法制作犬缺血性脑卒中模型,操作简便,成功率高,能满足实验要求。(2)血浆DAO活性、D-lac和LPS能有效反映缺血性脑卒中时肠屏障损伤程度。(3)缺血性脑卒中时,肠粘膜紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达降低,从而导致紧密连接破坏,这是肠屏障功能障碍的重要分子机制之一。(4)肠粘膜细胞凋亡上调是肠屏障障碍的细胞学基础,凋亡是缺血性脑卒中时肠上皮细胞死亡的重要形式。(5)通过本研究证实,缺血性脑卒中时,肠道屏障功能发生明确的损害。提示在体循环障碍、缺氧、营养代谢底物缺乏和感染之外还有重要的损害因素存在。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R743

【参考文献】
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