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《中国协和医科大学》 2007年
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解整合素—金属蛋白酶12作为子痫前期筛查标志物的初步研究

张明  
【摘要】: 研究背景 子痫前期是孕产妇和胎儿病率、死亡率的主要原因,由于病因未明,其早期诊断和预防仍是我们面临的巨大挑战。ADAM 12属ADAM家族成员之一,目前已有的研究结果预示其极可能成为一种新的、重要的产前筛查标志物。 研究目的 初步建立定量检测人血清ADAM 12-S的间接竞争法ELISA,并利用这一方法初步评价孕中期血清ADAM 12可否作为子痫前期筛查的一种标志物。 研究方法 采用多肽合成的方法,选择ADAM 12-S最具特异性的34个氨基酸的C-末端作为包被抗原和标准品,标本中ADAM 12-S水平通过分子量比例换算来定量反映。多肽与载体偶联后,免疫家兔,制备并纯化抗ADAM 12-S多克隆抗体作为一抗。确定包被抗原浓度、一抗工作稀释度,以此优化条件绘制标准曲线,从而初步建立检测人血清ADAM 12-S的间接竞争法ELISA。利用这一方法,通过病例-对照研究检测2002年至2006年间在北京协和医院行产前检查,并住院分娩的100例子痫前期患者与200例正常妊娠妇女的孕14~18周血清标本中ADAM 12水平,将其转换成MoM值后比较其有无明显差异。 结果 确定包被抗原浓度为0.25μg/ml,抗ADAM 12-S多克隆抗体工作稀释度为1:6,000,以此优化条件初步建立检测人血清ADAM 12-S间接竞争法ELISA,最低检测限0.137μg/L(多肽),定量检测区间0.137~100μg/L(多肽),标准曲线回归系数R~2=0.984。以此方法检测得到正常孕妇孕14~18周血清ADAM 12中位数分别为680μg/L、738μg/L、801μg/L、849μg/L和900μg/L,子痫前期患者孕14~18周血清ADAM 12中位数分别为598μg/L、664μg/L、729μg/L、791μg/L和839μg/L。正常孕妇和子痫前期患者这一时期血清ADAM 12水平逐渐上升,且上升的趋势相近。子痫前期组患者血清ADAM 12 LogMoM平均值-0.05242,明显低于正常孕妇组血清ADAM 12 LogMoM平均值-0.00368(P<0.001)。 结论 本研究初步建立了定量检测人血清ADAM 12-S的间接竞争法ELISA;得到了正常孕妇和子痫前期患者孕14~18周血清ADAM 12中位数,正常孕妇和子痫前期患者这一时期血清ADAM 12水平逐渐上升,且上升的趋势相近;子痫前期组患者孕14~18周血清ADAM 12水平明显低于正常孕妇,孕中期血清ADAM12可能作为子痫前期筛查的一种标志物,但其在预测子痫前期的价值尚需大样本的前瞻性研究予以证实。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R714.2

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