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《中国协和医科大学》 2006年
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基于热力学表达的黄连炮制与配伍变化的生物活性差异及化学表征研究

樊冬丽  
【摘要】: 中药药性理论是中药研究与应用的基础,也是当今中医药研究的热点和难点之一。作为可表征中药生物活性之一的药性理论是中药的基础与核心,传统炮制和复方配伍可不同程度地改变中药药性,从而改变中药的生物活性,这也是中医用药的两大特色。为了客观地评价中药炮制和配伍对中药活性/药性的改变,探明其作用机理及其可能的物质基础,本论文以临床常用、在药性表达上有代表性意义的中药黄连炮制品及其配伍类方为研究对象,应用生物热力学方法,并结合常规药理和化学分析法,对黄连炮制与配伍变化的生物活性差异及化学表征进行了较系统的研究。主要研究结果如下: 1.采用生物热力学方法,定性定量地刻画了黄连、黄连不同炮制品(醋制黄连、胆汁制黄连、盐制黄连、吴萸黄连、姜制黄连、酒制黄连)及其与吴茱萸配伍系列经典方(左金丸、甘露散、茱萸丸、反左金丸)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及痢疾杆菌等微生物生长代谢的作用。研究结果表明:黄连不同炮制品和不同配伍复方,寒热药性不同,其作用于细菌生长代谢的热谱及热动力学参数有不同程度的改变,具体表现为细菌在寒凉药作用下的生长速率常数k减小,且代谢产热量Q也趋于下降,这与传统中医对方药的赋性基本吻合。此外,首次用生物热力学方法研究了黄连的主要活性部位——生物碱成分的的抑菌活性,结果显示,小檗碱的抑制活性最强。 2.采用常规药理实验方法,分别考察了黄连不同炮制品和不同配伍类方的抑菌和解热作用及其差异。常规药理试验也支持了生物热力学法试验所得结果,提示生物热力学法可作为抗菌活性筛选方法之一。 3.采用高效液相色谱法,同时测定了黄连不同炮制品中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱五种生物碱成分的含量;还同时测定了黄连与吴茱萸配伍系列经典类方中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱及吴茱萸次碱的含量;最后,分别建立了黄连不同炮制品和不同配伍类方的HPLC指纹图谱。 4.采用多元统计分析方法,综合分析了黄连不同炮制品和不同配伍经典方的生物热谱图与常规药理活性、化学组分之间的相关性,结果表明:黄连不同样品作用于细菌的热力学结果与常规药理实验得到的最小抑菌浓度(MIC)相关性非常显著,相关系数所对应的P值小于0.0001;黄连不同炮制品作用于细菌的热动力学参数与其所含的的小檗碱、巴马汀及黄连碱的含量典型相关;而黄连与吴茱萸配伍系列经典类方作用于细菌的热动力学参数与其所含的小檗碱和药根碱的含量典型相关,这可能是黄连经炮制与配伍后,体现其生物活性差异的主要物质基础之所在。提示生物热力学方法可作为评价中药活性/药性的新的有效手段,且该方法具有普适性好、实时、在线、微量、高效等特点。 本文初步阐明了中药黄连炮制与配伍变化的生物活性差异及其可能的物质基础,为探讨炮制机理和配伍规律提供了理论依据。本文所建立的方法可望在中医药现代化研究特别是中药四性、中医治则、复方配伍、品质评价、药效物质筛选和新药开发等方面发挥独到的作用。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R283

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