收藏本站
《中国协和医科大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

马兜铃酸通过膜转运蛋白进入肾小管上皮细胞的研究

王艳艳  
【摘要】: 研究背景 含马兜铃酸(AA)成分的中草药可引起马兜铃酸肾病,其发病机理尚未完全明确。目前的研究表明肾小管上皮细胞是AA的主要作用靶点之一,AA可导致肾小管上皮细胞坏死、凋亡、活化或转分化。但AA是如何对细胞产生作用?是通过与受体结合的方式发挥作用,还是直接进入细胞发挥作用?如果进入细胞发挥作用的话,又是通过何种途径呢?我们利用体外细胞生物学实验对上述问题进行了研究。 研究目的 1)以人肾小管上皮细胞(HKC)为研究对象,观察AA是否能进入HKC细胞; 2)观察AA通过何种途径进入HKC细胞; 3)观察抑制AA进入细胞对其刺激CTGF表达作用的影响。 研究方法 1)采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术检测HKC细胞裂解液中AA。 2)利用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验,①检测有机阴离子转运蛋白(OATs)抑制剂丙磺舒和有机阳离子转运蛋白(OCTs)抑制剂四乙基铵对AA细胞毒性作用的影响;②构建pCMV5-HA-hOAT1/3表达质粒并进行转染,检测过量表达hOAT1/3对AA细胞毒性作用的影响。 3)实时荧光定量聚合酶链反应和免疫印迹法检测OATs抑制剂丙磺舒对HKC细胞CTGF mRNA和蛋白表达的影响。 研究结果 1) AA-Na刺激组细胞破碎液中可检测到AA,对照组检测不到;依据峰面积粗略估算AA-Na刺激组细胞破碎液中AA浓度可达到1×10~(-3)h/L。 2) 60mg/L AA-Na可致HKC细胞LDH释放率显著升高,OATs抑制剂丙磺舒可抑制上述LDH释放(抑制率达27.5%,P<0.05),而OCTs抑制剂四乙基铵无此抑制作用。 3) pCMV5-HA-hOAT1/3表达质粒转染HKC细胞后,AA对HKC的细胞毒性作用增强,且细胞毒性作用随转染质粒量的增大而增强。 4) 40mg/L AA-Na能显著上调HKC细胞CTGF mRNA及蛋白表达,OATs抑制剂丙磺舒可抑制上述CTGF高表达(mRNA及蛋白表达抑制率分别为16%和21%,P<0.05)。 结论 1) AA可以进入HKC细胞。 2) AA可能通过hOAT1/3进入HKC细胞,AA细胞毒性作用与hOAT1/3表达水平相关。 3) OATs抑制剂丙磺舒可抑制AA对HKC的细胞毒性作用,并可抑制AA诱导的HKC细胞CTGF高表达。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R692

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谢放;;马兜铃酸肾病(中草药肾病)40例临床分析[J];时珍国医国药;2011年06期
2 刘妍;张碧丽;;儿童急性肾小管间质性肾炎的研究进展[J];临床儿科杂志;2011年06期
3 陈咏梅;邹世海;陈咏梅;彭鑫;朱赛香;;晚期氧化蛋白产物对肾小管上皮细胞表型转分化影响的基础研究[J];中国医药指南;2011年20期
4 邓超男;于燕妮;杨丹;朱海振;;氟对大鼠肾脏NF-κB相关蛋白及mRNA表达影响[J];中国公共卫生;2011年08期
5 季文萱;黄俊彦;孟冬梅;刘凤娟;;马兜铃酸对肾小管上皮细胞氧化应激效应的作用[J];山东医药;2011年25期
6 杨波;王志娣;蒋云生;段绍斌;费良玉;颜天铭;;普罗布考对1-甲脲乙醇酸酐诱导HK-2细胞表达纤维化相关因子的影响[J];中南医学科学杂志;2011年04期
7 孟雪;郭汉城;关天俊;;全反式维甲酸对高糖诱导HK-2细胞FN、LN表达的影响[J];临床医学工程;2011年07期
8 余理;党西强;何小解;何庆南;易著文;;尿酸上调肾小管上皮细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酶蛋白水平对肾小管上皮细胞凋亡的影响[J];实用儿科临床杂志;2011年17期
9 马玉宝;白浩斌;李建红;;如何看待中药的毒副作用[J];中国中医药现代远程教育;2011年16期
10 田蕾;孙洞箫;;p21和PCNA在大鼠肾缺血再灌注损伤中的表达及氟伐他汀对其表达的调节[J];中国老年学杂志;2011年13期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王巍巍;张金元;;马兜铃酸对肾小管上皮细胞凋亡信号蛋白caspase-3、Bcl-xL表达的影响及rHuEP0的干预作用研究[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年
2 王巍巍;张金元;;EPO对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损伤的影响[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年
3 雷荣辉;吴纯启;廖明阳;;马兜铃酸诱导人近曲小管上皮细胞转分化的研究[A];2006年全国药物毒理学会议论文集[C];2006年
4 王巍巍;张金元;;EPO对马兜铃酸致肾小管上皮细胞凋亡的影响[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年
5 宫丽崑;薛翔;戚新明;武元峰;邢国振;陈敏;任进;;肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白与马兜铃酸肾病密切相关[A];中国毒理学会第五次全国学术大会论文集[C];2009年
6 王巍巍;张金元;;EPO对马兜铃酸对肾小管上皮细胞再生作用的研究[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年
7 王巍巍;张金元;;马兜铃酸对肾小管上皮细胞TGF-β_1、Ang-ⅡmRNA表达的影响和EPO的干预研究[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年
8 赵班;郑法雷;吴华;李慧凛;刘建春;;MCP-1诱导肾小管上皮细胞转分化的作用及其与ILK表达的关系[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年
9 罗洁;李晓忠;;马兜铃酸Ⅰ对人脐静脉内皮细胞的影响及其机制(中文摘要)[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年
10 宦红娣;张军力;张景红;陆扬;;地灵丹对马兜铃酸肾病防治作用的研究[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 徐亚静;或可走出马兜铃酸阴影[N];中国医药报;2009年
2 焦珞珈;清火良药“清”出肾病[N];大众卫生报;2003年
3 本报记者陈楫宝;马兜铃酸事件“遗产”:中药界厉行“修宪运动”[N];21世纪经济报道;2003年
4 曹宝成 张国民;马兜铃酸事件对中药标准管理的启示[N];中国医药报;2003年
5 韦绍锋 康义瑶;马兜铃酸的“红牌”震荡[N];医药经济报;2004年
6 本报记者 刘福兴;中医药产业沉默吞下“马兜铃酸苦果”[N];中国经营报;2003年
7 本报记者 夏金彪;“马兜铃酸事件”凸现中药产业安全瓶颈[N];中国经济时报;2003年
8 北京农学院 吴国娟 张中文 沈红 王典仁;马兜铃酸肾毒性为动物保健药敲响警钟[N];中国畜牧报;2004年
9 记者朱玉、张建平;龙胆泻肝丸,慎用![N];人民日报;2003年
10 白毅;中科院上海药物所发现P450酶参与马兜铃酸代谢解毒[N];中国医药报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李丽;PAX2基因沉默在梗阻性肾病肾小管上皮细胞转分化中作用机制的研究[D];中国医科大学;2010年
2 王光兰;IL-1β诱导肾小管上皮细胞转分化及其与细胞骨架的关系[D];吉林大学;2010年
3 何春梅;血管内皮生长因子(VEGF)对肾小管上皮—间充质细胞转化的作用及机制探讨[D];中国协和医科大学;2007年
4 谢恺庆;C-反应蛋白在慢性肾脏病进展中的作用及机制的研究[D];南方医科大学;2010年
5 何玉华;肾康注射液对白蛋白诱导活化的肾小管上皮细胞表型转化的实验研究[D];成都中医药大学;2005年
6 汤珣;siRNA抑制CTGF表达对高糖诱导肾小管上皮细胞肥大和转分化的影响及机制[D];南方医科大学;2009年
7 聂静;衔接蛋白p66Shc对糖尿病肾病肾小管上皮细胞氧化损伤及凋亡的影响与机制研究[D];中南大学;2009年
8 宁建平;肾小管上皮细胞转分化在DN发病中的作用及大黄酸对其影响的研究[D];中南大学;2007年
9 唐荣;Klotho基因在高血压肾损害肾小管上皮细胞凋亡中的作用及冬虫夏草对其的影响[D];中南大学;2009年
10 裴秀丛;镉对肾小管上皮细胞E-cadherin影响及氯丙嗪和异搏定对镉毒性影响的研究[D];中国医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王梓华;BMP-7对马兜铃酸致人肾小管上皮细胞损伤的保护作用研究[D];第三军医大学;2010年
2 沈水娟;肾康注射液拮抗马兜铃酸对人近端肾小管上皮细胞的作用[D];中国协和医科大学;2006年
3 曲矿云;大黄酸对转化生长因子β_1诱导的肾小管上皮细胞转分化及核因子κB活性的影响[D];兰州大学;2007年
4 马琳娜;高糖对肾小管上皮细胞表达RANTES、TGF-β的影响及霉酚酸干预研究[D];苏州大学;2007年
5 陈艳杰;CD40信号激活对肾小管上皮细胞的影响[D];苏州大学;2007年
6 沈琼;高糖环境中肾小管上皮细胞RANTES、CCR5的表达及辛伐他汀干预研究[D];苏州大学;2008年
7 陈丽叶;高糖对肾小管上皮细胞MCP-1、ICAM-1、NF-κB和FN的影响及疏血通的干预作用[D];苏州大学;2008年
8 吴嫚;尾加压素II异常表达与人肾纤维化关系的初步探讨[D];兰州大学;2008年
9 李勤;干扰素-γ对转化生长因子-β1诱导肾小管上皮细胞转分化及结缔组织生长因子表达的作用[D];四川大学;2004年
10 罗昌霞;白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡的实验研究[D];武汉大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026