收藏本站
《中国协和医科大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

阿司匹林/糖皮质激素对骨髓间充质干细胞凋亡的影响及其信号调控机制

邓琳子  
【摘要】:骨髓间充质干细胞以其具有多向分化潜能、来源充足、体外易扩增、无免疫排异等优点,成为再生医学细胞移植治疗重要的种子细胞。然而,大量动物实验和临床研究均显示,移植的骨髓间充质干细胞存活率很低,限制了此方法的临床治疗效果。本研究组先前的研究表明,体外以缺氧无血清条件模拟缺血心肌微环境能够引起骨髓间充质干细胞凋亡;进一步研究发现洛伐他汀、溶血磷脂酸能够对抗缺氧无血清引起的骨髓间充质干细胞凋亡,而阿斯匹林具有抑制骨髓间充质干细胞增殖的作用。本论文旨在研究常用抗炎药物对骨髓间充质干细胞存活的影响及相关机制,探讨阿司匹林/糖皮质激素对骨髓间充质干细胞凋亡的影响,并着重研究了线粒体凋亡途径和Wnt/β-catenin、ERK、Akt等信号通路在其中的调节作用。 本论文主要包括以下研究内容: 一、阿司匹林对骨髓间充质干细胞凋亡的影响及相关机制 1.研究阿司匹林对骨髓间充质干细胞凋亡的影响。 2.研究阿司匹林诱导骨髓间充质干细胞凋亡过程中,线粒体/caspase-3途径和Wnt/β-catenin信号通路成员变化。 3.研究Wnt/β-catenin信号通路是否调节阿司匹林诱导的骨髓间充质干细胞凋亡。 二、糖皮质激素对缺氧无血清诱导骨髓间充质干细胞凋亡的影响及相关机制 1.研究糖皮质激素对缺氧无血清诱导骨髓间充质干细胞凋亡的影响。 2.研究ERK1/2和Akt是否参与糖皮质激素抗缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞凋亡。 3.研究糖皮质激素是否抑制缺氧无血清刺激骨髓间充质干细胞炎症因子的表达及其与抗凋亡作用的关系。 本论文主要采用的研究方法: 使用SD大鼠来源的骨髓间充质干细胞,采用Hoechst 33342和AnnexinV-FITC/PI流式细胞仪技术检测细胞凋亡。Western免疫印迹法检测蛋白表达和蛋白磷酸化表达。实时定量PCR技术检测mRNA的表达。Caspase-3色度检测试剂盒检测caspase-3酶活。 本论文研究结果: 阿司匹林诱导骨髓间充质干细胞凋亡率增高,凋亡小体增加,促进线粒体细胞色素c释放和caspase-3激活。阿司匹林以磷酸化水平降低的方式促进GSK-3β的活化和抑制β-catenin的入核,降低Wnt/β-catenin信号通路靶基因细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达,提示阿司匹林抑制Wnt/β-catenin信号通路。采用Wnt 3a和GSK-3β抑制剂(LiC1和SB 216763)模拟激活Wnt/β-catenin信号通路,促进了细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达,抑制了阿斯匹林诱导的骨髓间充质干细胞凋亡,保护线粒体功能阻抑细胞色素c释放和caspase-3的激活。阿斯匹林时间依赖性地降低环氧化酶-2(COX-2)的表达,而后促进COX-2的表达上调,激活Wnt/β-catenin信号通路进一步诱导COX-2的表达,而COX-2抑制剂NS-398抑制COX-2的表达上调,进一步促进了阿斯匹林诱导的骨髓间充质干细胞的凋亡。说明Wnt/β-catenin信号通路促进cyclin D1和COX-2表达,通过线粒体/caspase-3凋亡通路调节阿斯匹林诱导骨髓间充质干细胞凋亡。 天然糖皮质激素之一氢化可的松抑制缺氧无血清引起的骨髓间充质干细胞caspase-3激活和凋亡率增高。氢化可的松以磷酸化水平增高的方式促进ERK1/2和Akt的活化,而ERK1/2抑制剂U0126和PI3K/Akt抑制剂Wortmanin拮抗氢化可的松阻抑caspase-3激活的作用;以浓度依赖性的方式抑制炎症因子IL-1β、TNF-α的表达,但在抑制作用较弱的低浓度(10~(-10)mol/L)和抑制作用较强的高浓度(10~(-6)mol/L)具有类似的抗凋亡作用。说明氢化可的松抗缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞凋亡。ERK1/2和Akt可能参与调节氢化可的松抗凋亡作用。另外,研究结果还提示了氢化可的松抑制炎症因子表达作用与抗凋亡作用没有相关性。 综上所述,Wnt/β-catenin信号通路通过线粒体/caspase-3凋亡通路调节调节阿斯匹林诱导骨髓间充质干细胞凋亡。ERK1/2、Akt参与氢化可的松抗缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞凋亡。我们的研究结果提示在特定的环境下,如长期常规较大剂量服用阿司匹林治疗,阿斯匹林会影响骨髓间充质干细胞的存活,因此在患有慢性炎症如风湿性关节炎的病人,接受骨髓间充质干细胞移植治疗的时候,需谨慎服用阿司匹林,而同样具有抗炎作用的糖皮质激素可作为替代治疗的候选药物之一。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R96

手机知网App
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 柏志全;张海峰;陈丽新;朱林燕;左婉红;和树同;王立伟;;细胞周期蛋白D1重组质粒的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达[J];南方医科大学学报;2010年02期
2 范雪梅;李雪;梁琼麟;胡坪;王义明;罗国安;;双龙方组分诱导大鼠BMSCs分化的差异基因筛选及聚类分析[J];高等学校化学学报;2009年09期
3 黄裕立;麦炜颐;;骨髓间充质干细胞移植在心脏再生医学中的分子机制[J];国际内科学杂志;2008年09期
4 王飞;吴强;彭林林;张晓丽;俞杉;梁勤;黄山;令狐颖;周晓泉;;再灌注治疗对心肌梗死患者血清MMP-1、TIMP-1含量和心室重塑的影响[J];贵州医药;2007年12期
5 钟竑;赵宏光;马南;柳瑞军;单根法;梅举;张辅贤;李国庆;;脐血内皮祖细胞移植对犬急性梗死心肌胶原网络重构的影响[J];江西医学院学报;2007年05期
6 吴强;彭林林;张晓丽;刘相飞;张雪松;张静;俞杉;梁勤;;血运重建对急性心肌梗死患者心脏胶原重塑的影响[J];临床心血管病杂志;2008年05期
7 郭军;李自成;;IGF-1预处理对骨髓间充质干细胞心肌再生及抗炎效果的影响[J];临床心血管病杂志;2011年12期
8 杨湄;李青峰;;骨髓间充质干细胞在缺血性损伤治疗中的研究与进展[J];中国美容医学;2009年11期
9 张赟;陈洁;李廷玉;;骨髓间充质干细胞在组织损伤局部微环境中的调节作用[J];生命科学;2010年09期
10 马金萍;王林;;骨髓间充质干细胞旁分泌改善心室重塑的作用[J];天津医药;2010年10期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙军;人脐带间充质干细胞抗炎免疫调节作用及其机制的研究[D];北京协和医学院;2011年
2 邓玮;BMSC在微泡及BiAb辅助下修复心肌纤维化的实验研究及PⅢNP对冠心病合并代谢综合征患者的预测价值[D];重庆医科大学;2011年
3 曹月娟;BM-MSCs移植治疗AMI大鼠模型的疗效及其机制的研究[D];天津医科大学;2011年
4 边素艳;鞘氨醇激酶-1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
5 杜优优;骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死及免疫炎症调节机制研究[D];中南大学;2008年
6 刘杰;个体化组织工程骨修复长骨缺损实验与临床研究[D];第三军医大学;2008年
7 卫静;BMP-7基因修饰骨髓间充质干细胞治疗IgA肾病的实验研究[D];第三军医大学;2008年
8 廖文斌;人脐带间充质干细胞移植治疗脑血管疾病的实验研究[D];中国协和医科大学;2009年
9 洪昊;间充质干细胞联合复合支架构建组织工程瓣膜的研究[D];华中科技大学;2009年
10 曾建平;骨髓干细胞移植改善猪急性心梗后左室重构及相关机制的研究[D];中南大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁维杰;人骨髓间充质干细胞体外向心肌样细胞分化及心肌样细胞的特性研究[D];郑州大学;2010年
2 张福丽;间充质干细胞治疗肺动脉高压研究进展(附肺动脉高压发病机制进展)[D];山西医科大学;2011年
3 孟春阳;锌促进骨髓间充质干细胞修复大鼠脊髓缺血再灌注损伤的研究[D];吉林大学;2011年
4 叶东;沉默ClC-3氯通道基因对低分化鼻咽癌细胞周期的影响[D];暨南大学;2011年
5 乔建晶;自体骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死后心功能不全家兔炎性因子表达的影响[D];河北医科大学;2011年
6 张同方;Galectin-3促进骨髓间充质干细胞来源的内皮细胞增殖和血管生成的研究[D];安徽医科大学;2011年
7 潘欣宇;不同种属来源骨髓间充质干细胞修复喉软骨缺损的实验研究[D];辽宁医学院;2011年
8 张琳;丹参联合骨髓间充质干细胞静脉注射对心肌梗死兔心肌纤维化的影响[D];辽宁中医药大学;2011年
9 高晋芳;类风湿关节炎患者骨髓间充质干细胞增殖能力及向软骨细胞分化能力的研究[D];山西医科大学;2009年
10 郭梁;同种异体骨髓间充质干细胞与脱细胞角膜材料移植治疗兔角膜碱烧伤的实验研究[D];第四军医大学;2009年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赖铭裕;黄杰安;梁志海;唐国都;姜海行;;阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖和诱导凋亡作用及其机制研究[J];广西医科大学学报;2008年06期
2 林强;陈书艳;;骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的机制[J];心脏杂志;2008年04期
3 曲环;郭艳红;朱小君;高炜;毛节明;;骨髓间充质干细胞对持续缺氧心肌保护作用的研究[J];中国老年学杂志;2008年15期
4 孙小毛;拓西平;;阿司匹林在阿尔茨海默病防治中作用机制研究进展[J];中华临床医师杂志(电子版);2011年14期
5 郑丽芳;梅元武;张小乔;张红;白静;查运红;;TGF-β1抑制缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的研究[J];卒中与神经疾病;2008年02期
6 杨柏霖;刘飞;谷云飞;金黑鹰;刘秀芳;;黄芩苷对错配修复基因缺失LoVo细胞的抑制作用及其机制[J];世界华人消化杂志;2008年21期
7 林海泓;施海明;肖萍;朱军;罗心平;;抗血小板药物对人骨髓间充质干细胞增殖及分泌功能的影响(英文)[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年38期
8 周莉;张兰芳;陆勤;贲晓明;;骨髓间充质干细胞对K562细胞增殖及化疗敏感性的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年10期
9 高秋萍;;阿司匹林对青少年痛经的效果[J];国际儿科学杂志;1982年03期
10 沈丽清;用HPLC法测定片剂中的阿司匹林与苯福林[J];国外医学.药学分册;1985年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周军;杨惠林;毛海青;岑建农;陈子兴;;骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的抗凋亡机制[A];第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议论文汇编[C];2007年
2 唐震宇;陆雪芬;易咏红;;阿司匹林对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
3 ;善达~对加速贮存条件下阿司匹林片剂稳定性的影响[A];第三届全国药用新辅料与中药制剂新技术应用研讨会会议论文资料[C];2006年
4 王星;张澍田;;NF-κB在阿司匹林抑制食管癌细胞生长中的作用研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
5 胡海一;张澍田;;阿司匹林与烟草提取物对食管鳞癌细胞株cyclinD1的表达及对细胞周期的影响[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
6 曲方;韩晓书;何凡;郝君;;阿司匹林对大鼠脑缺血/再灌注损伤后VEGF表达的影响[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
7 曾量波;梁子敬;叶政;陈国勤;王鹏鲲;;阿司匹林对压力负荷性心肌肥厚大鼠左心室重构的影响[A];2005急诊医学学术研讨会暨《中华急诊医学杂志》第四届组稿会论文汇编[C];2005年
8 李红梅;高延;刘毅;李文斌;叶季鲜;李敏;;氯吡格雷联合阿司匹林治疗老年急性冠脉综合征对血小板功能的影响[A];全国第十届心脏学学会、第十三届心功能学会、《心脏杂志》编辑部联合学术会议论文摘要集[C];2007年
9 杨亚滨;;安全应用阿司匹林保健[A];第六届全国药理学教学学术会议论文摘要汇编[C];2003年
10 张宏博;王震宇;周新民;樊晓明;樊代明;林兆鑫;;蛋白激酶C表达对阿司匹林诱导的胃癌细胞凋亡中的作用[A];中华医学会消化病学分会——2005年全国胃肠激素学术研讨会论文集[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 宋雯;阿司匹林是功能最多的药物[N];卫生与生活报;2007年
2 魏春来;阿司匹林新用[N];医药养生保健报;2007年
3 南昌大学医学院 胡春松;阿司匹林 非剂量越大越好[N];健康报;2008年
4 陈列欢;阿司匹林仍是一个谜[N];医药经济报;2003年
5 唐文;与阿司匹林“不睦”的药物[N];中国医药报;2005年
6 黄馨;正确认识阿司匹林“抵抗”[N];保健时报;2007年
7 陈不我;《阿司匹林》:无虎头有豹尾[N];中国电影报;2006年
8 副主任医师 袁秉;冠心病人应规范服用阿司匹林[N];大众卫生报;2006年
9 常怡勇;哪些药不宜与阿司匹林同服[N];健康报;2007年
10 沈珠军;别忽略了阿司匹林[N];农村医药报(汉);2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邓琳子;阿司匹林/糖皮质激素对骨髓间充质干细胞凋亡的影响及其信号调控机制[D];中国协和医科大学;2009年
2 李海生;低氧促进人骨髓间充质干细胞增殖和分化及其机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
3 史达;木豆叶联合骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死的实验与相关临床研究[D];广州中医药大学;2007年
4 顾绍峰;兔骨髓间充质干细胞分化为角膜上皮样细胞的体外研究[D];中国医科大学;2008年
5 张伟;骨髓间充质干细胞免疫调节机制的研究[D];中国协和医科大学;2004年
6 张海峰;骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性肝功能衰竭治疗作用的实验研究[D];山东大学;2007年
7 牟大鹏;抑制消减杂交技术筛选骨髓间充质干细胞诱导分化前后差异表达基因[D];吉林大学;2007年
8 景红;大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导为肾脏系膜细胞样细胞的实验研究[D];中国协和医科大学;2008年
9 宋可新;黑色素细胞与骨髓间充质干细胞复合构建组织工程皮肤的初步研究[D];中国协和医科大学;2008年
10 滕春燕;骨髓间充质干细胞对急性胰腺炎损伤修复及其机制的实验研究[D];吉林大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈书尚;骨髓间充质干细胞移植治疗心力衰竭的实验研究[D];福建医科大学;2005年
2 刘宏志;大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经前体细胞的研究[D];中国医科大学;2005年
3 王艳芳;生物反应器内培养兔骨髓间充质干细胞[D];大连理工大学;2006年
4 陈洁;同种异体移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠心梗后心室重构[D];浙江大学;2006年
5 刘弘光;尝试移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠糖尿病[D];中国医科大学;2006年
6 董玉泉;兔骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定及生物学特性研究[D];青岛大学;2006年
7 项正兵;人骨髓间充质干细胞向胆碱能神经元样细胞定向分化的实验研究[D];南昌大学;2007年
8 周哲;骨髓间充质干细胞bFGF复合降解膜修复皮肤缺损的研究[D];吉林大学;2008年
9 贾小力;骨髓间充质干细胞静脉移植对损伤大鼠脊髓VEGF、bFGF表达及血管新生的影响[D];福建医科大学;2008年
10 刘书会;局部应用血管内皮生长因子及间充质干细胞培养物提高皮瓣成活率的实验性研究[D];吉林大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026