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荧光原位杂交在尿路上皮癌及前列腺癌中的应用研究

丁雪飞  
【摘要】: 目的评价FISH用于诊断泌尿系尿路上皮癌的临床应用价值。 方法收集北京协和医院泌尿外科尿路上皮癌患者共241例,其中膀胱尿路上皮癌183例,上尿路上皮癌58例,行FISH检查及尿细胞学检查。同时以健康志愿者20例,建立本实验室FISH的正常阈值,以非尿路上皮癌患者40例为对照。FISH探针采用随机引物法标记3,7,17号染色体着丝粒及9p21(p16)区带。结果1、以健康志愿者建立FISH正常阈值。2、FISH对于膀胱尿路上皮癌敏感性共为85.4%(145/158),特异性为90%(36/40)。在低级别尿路上皮癌与高级别之间敏感性有统计学差异(P=0.002);非肌层浸润性尿路上皮癌与肌层浸润性之间无统计学差异(P=0.487)。细胞学检查敏感性为41.1%(65/158),特异性为92.5%(37/40)。3、FISH;对于UUC-UT的敏感性高于尿细胞学检查(P=0.0001);两者阳性预测值无明显差异(P=0.94),阴性预测值则有统计学差异(P=0.02)。两者对于非肌层浸润性UUC-UT患者两者检查分别是71.1%和24.4%(PO.0001),肌层浸润性肿瘤分别为81.8%和48.9%(P=0.016);在低级别肿瘤的敏感性分别是50%和12.5%(P=0.027),高级别肿瘤为87.0%和44.4%(P<0.01)。尿细胞学和FISH检查的特异性无明显差别,P=0.548。探针中3,7,17染色体非整倍性扩增分别为53.8%、56.4%和39.7%,p16杂合性缺失丢失25.6%。 结论1、FISH法诊断尿路上皮癌灵敏度比尿脱落细胞学高、特异性相似,是一种较为理想的无创性检查方法。2、FISH结果显示其敏感性与尿路上皮癌病理分级具有相关性,并且随着病理分级的增加敏感性增加;与临床分期无相关性。3、在膀胱尿路上皮癌术后随访中由于肿瘤临床分期较早,尿细胞学检查的敏感性更低,相比较而言FISH检查仍具有较高的敏感性和特异性,适合术后随访工作。4、p16杂合性缺失丢失出现频率明显低于其他三组探针,可能与其正常阈值较高有关。 目的:1、评价在会阴模板定位下行经会阴前列腺穿刺活检术有效性及安全性;2、应用FISH技术检测前列腺活检组织中TMPRSS2基因与ETS家族基因ERG、ETV1、ETV4之间融合的表达情况,进而评价FISH诊断早期前列腺癌的可行性。 方法:1、选择我院437例接受经直肠超声引导下模板定位经会阴前列腺穿刺活检术患者。年龄平均70.4±14.35岁(33-86岁)。PSA 0.2-5000ng/ml,平均80.3±12.96ng/ml。前列腺体积10-200ml,平均57.6±14.72ml。2、采用随机法合成FISH探针:TMPRSS2与ERG、ETV1、ETV4融合基因。(1)在模板定位下经会阴前列腺分区穿刺活检术行穿刺活检,病理确定前列腺癌患者40例,为实验组,应用FISH技术检查前列腺癌患者组织中TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1和TMPRSS2-ETV4融合基因。良性前列腺增生患者20例,为对照组。(2)分析融合基因与前列腺癌组织生物学特性中Gleason评分、前列腺体积、临床分期和PSA水平的关系。 结果:1、将直肠超声下前列腺分为11各区,每区穿刺1-4针,每例平均18.6(11-44)针。活检阳性率38.5%(168/437)。2、活检率与前列腺穿刺相关参数之间关系:(1)与分区关系:不考虑PSA水平时,1-11区阳性检出率无统计学差异,P=0.16。当PSA20 ng/ml时,前列腺11区的检出率为47.9%,高于其他区,P0.05;(2)与前列腺体积关系:阳性检出率与前列腺体积成负相关;(3)与PSA水平关系:当PSA>4ng/ml时,阳性检出率与PSA水平呈正相关,PSA4ng/ml时,阳性检出率与PSA水平无相关性;(4)与前列腺前后区关系:前列腺前区(1、2、9、10)与后区(4、5、6、7)阳性检出率比较无统计学差异,P=0.45。3、穿刺1周内肉眼血尿发生率为29.7%(130/437),尿潴留发生率为1.1%(5/437),无严重感染及直肠感染等并发症。4、FISH用于前列腺癌诊断中的40例前列腺癌患者阳性率为80%(32/40),其中TMPRSS2-ERG探针为52.5%(21/40), TMPRSS2-ETV1为22.5%(9/40),TMPRSS2-ETV4为5%(2/40)。三组探针中有一组阳性者,其余两组即为阴性,无重复阳性患者。5.FISH结果与前列腺癌生物学特性关系:FISH阴性组与阳性组Gleason评分无统计学差异,P=0.874。FISH阴性组与阳性组PSA无统计学差异,P=0.141。FISH阴性组与阳性组临床分期无统计学差异,P>0.05。实验组淋巴结pN0为35例,pN1-2为5例,FISH阴性组与阳性组与淋巴结转移无统计学差异,P>0.05。根治性前列腺癌11例,切除后切缘情况:切缘阴性为8例,阳性为3例,FISH阴性组与阳性组切缘阳性与否无统计学差异,P>0.05。 结论:1、模板定位下经会阴前列腺分区穿刺活检阳性率较高,并与前列腺体积、血清PSA水平高具有相关性。2、当PSA20 ng/ml时,11区的肿瘤检出率较高。3、模板定位下经会阴前列腺分区穿刺安全性高,手术并发症低。4、FISH三组探针可以检测出前列腺癌组织中的TMPRSS2-ERG和TMPRSS2-ETV1以及TMPRSS2-ETV4融合基因,出现频率以TMPRSS2-ERG最高。FISHT阳性组与阴性组与前列腺癌生物学特性,如Gleason分级、前列腺体积、临床分期和PSA水平之间无统计学差异。5、FISH检测前列腺癌TMPRSS2-ERG和TMPRSS2-ETV1以及TMPRSS2-ETV4融合基因有望成为早期诊断前列腺癌的一个新的有力手段。


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