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《中国协和医科大学》 2010年
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退行性脊柱侧凸的血清比较蛋白质组学研究

朱勇  
【摘要】: 研究背景: 退行性脊柱侧凸(degenerative scoliosis, DS)不仅导致外观畸形,还可引起腰痛、下肢放射痛、间歇性跛行等,甚至损害心肺功能。随着人口老龄化趋势及老年人生活方式的转变,DS逐渐成为导致脊柱功能障碍、影响老年人生活质量的一种重要的腰椎退行性疾病。DS的病因不明,可能与椎间盘、关节突关节的不对称退变、骨质疏松和遗传学因素有关,但这些并不是发生退行性脊柱侧凸的直接原因。目前关于DS的研究绝大多数都是针对该病的治疗,涉及病因学方面的基础研究很少,而且还没有分子生物学方面的报道。因此,弄清DS的病因,确立DS发病及进展相关的分子标志物,从而找到有效预测和防治侧凸加重的方法对于该病的临床诊治具有重大意义。2D-DIGE是近年来发展的新蛋白质组技术,是目前定量蛋白质组学研究中可信度和准确性最高的技术之一。对DS进行比较蛋白质组学研究,寻找患者血清的蛋白质差异,有助于从分子水平认识DS的发生发展机制,也可以为DS的诊断和防治提供有效的分子标志物。 研究目的: 1.构建DS患者与对照间血清差异蛋白质组图谱。 2.应用质谱鉴定技术,对差异蛋白质点进行鉴定。 3.结合蛋白功能网络研究成果,分析所鉴定的蛋白质在DS发生发展中的作用。 研究方法: 1.采集12例退行性脊柱侧凸患者和12例年龄、性别匹配的腰椎管狭窄患者的血清。经去高丰度蛋白、CyDye染料交叉标记,然后进行荧光双向差异凝胶电泳、图像扫描,并用DeCyder v.5.02图像分析软件对DIGE图像进行分析和寻找差异点。 2.对筛选出的差异点进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 分析,检索IPI-HUMAN数据库鉴定蛋白。 研究结果: 1.经过荧光双向差异凝胶电泳、DeCyder软件分析发现,退行性脊柱侧凸患者和腰椎管狭窄患者血清中有11个蛋白质差异点,两者之间的差异有统计学意义。其中3个点在DS血清中表达上调,8个点表达下调。 2.11个蛋白质差异点经质谱分析,IPI-HUMAN数据库鉴定出7个差异蛋白。 结论: 1.首次对DS患者进行蛋白质组研究,成功构建DS患者与腰椎管狭窄患者血清差异蛋白质组资料库。 2.应用质谱鉴定技术,成功鉴定出7个差异表达蛋白质。这种蛋白质的差异表达究竟是DS发生的始动因素还是畸形引起的继发改变尚不能明确。其具体意义、具体作用及其是否具有DS特异性尚需进一步研究以阐明。研究结果为DS的发病和进展机制研究,筛选可作为DS诊断标记的血清标志物及药物作用靶点奠定了理论基础。
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R687.3

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