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《首都医科大学》 2017年
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基于肝络病证治的大黄(?)虫丸加味方对IHF大鼠MMPs/TIMPs系统影响的研究

李文新  
【摘要】:【目的】通过文献研究,深入学习中医络病理论,探讨肝纤维化络病的证治规律,辨证分析中药复方大黄(?)虫丸联合黄芪、水红花子后对肝络的调节作用;通过动物实验研究,从现代医学角度探讨大黄(?)虫丸丸加味后的抗肝纤维化作用变化,明确该复方对肝组织MMP-1/TIMP-1的调控机制,从而验证其疗效并以此阐明中医通络法对应的分子机制。从分子水平更好地解释中医药复方的作用原理,增强大黄(?)虫丸加味的实验可重复性和临床应用价值。【方法】回顾经典医籍,检索相关文献,明确肝纤维化络病的因、机、证、治、方的研究概况,为实验研究提供理论依据。本实验研究是以猪血清诱导SD大鼠建立免疫性肝纤维化模型,分别设置正常组、模型对照组、大黄(?)虫丸组、大黄(?)虫丸加味组、秋水仙碱组,进行对照实验,通过12周规范饲养、12周猪血清腹腔注射建立大鼠免疫性肝纤维化模型,通过6周规范灌胃给药预防控制大鼠肝纤维化病变,而后处死所有实验大鼠,采集血清和组织样本,测量与计算肝脾指数,检测与统计血清肝功能及肝纤维化标志物,观察肝组织病理HE染色(hematoxylin-eosin staining,苏木精-伊红染色)及MASSON三色染色的病理改变,用RT-PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,实时荧光定量PCR技术)法检测肝组织MMP-1(matrix metalloproteinase-1,基质金属蛋白酶-1)、TIMP-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,金属蛋白酶抑制因子-1)的信使RNA表达水平变化。用Elisa(enzyme linked immunosorbent assay,酶联免疫吸附测定)法直接检测肝组织MMP-1、TIMP-1蛋白含量变化。【结果】1.大鼠一般情况:在12周造模给药过程中,与正常组sd大鼠相比,模型对照组的神色状态、活跃程度、进食排泄等一般状况较差,体重长势较为缓慢。与模型对照组相比,大黄(?)虫丸组、大黄(?)虫丸加味组、秋水仙碱组大鼠一般状况均有一定程度改善,但均不及正常组大鼠状态。2.大鼠肝脾指数:在12周末,与正常组相比,模型对照组肝重增加,差异性不明显;脾重、肝指数与脾指数明显增加,差异有统计学意义(p0.01)。与模型组相比,大黄(?)虫丸组、大黄(?)虫丸加味组、秋水仙碱组大鼠肝重、肝指数降低,差异无统计学意义;脾重、脾指数降低,差异有统计学意义(p0.05)。3.大鼠肝脏病理:于不同倍数光镜下观察肝组织病理he染色切片显示:模型对照组大鼠肝脏的肝小叶结构不明显,肝细胞排列不整齐,汇管区不同程度扩大并伴有明显的炎性细胞浸润,有胶原纤维间隔形成,个别大鼠出现大小不等的假小叶结构;秋水仙碱组,大黄(?)虫丸组与大黄(?)虫丸加味组均可见肝细胞排列紊乱,个别仍然可见假小叶结构,但汇管区炎性浸润较模型对照组减轻,且胶原纤维间隔明显减少。4.大鼠血清肝功能:与正常组相比,模型对照组血清ast(aspartateaminotransferase,谷草转氨酶)明显升高,差异有统计学意义(p0.05);血清alt(alanineaminotransferase,谷丙转氨酶)、ggt(gamma-glutamyltranspeptidase,谷氨酰转肽酶)、tbil(totalbilirubin,总胆红素)升高,血清tp(totalprotein,总蛋白)、alb(albumin,白蛋白)、glb(globulin,球蛋白)、a/g(albumin/globulin,白球比)下降,差异无统计学意义。与模型组相比,秋水仙碱组血清alt、ast、ggt有下降趋势,tbil有升高趋势,血清tp、a/g有下降趋势,血清glb、alb有升高趋势,差异无统计学意义。与模型组相比,大黄(?)虫丸加味组血清alt、ast、tbil降低,差异有统计学意义(p0.05);血清ggt有降低趋势,血清tp、glb、alb、a/g有升高趋势,差异无统计学意义。5.大鼠血清肝纤维化标志物:与正常大鼠相比,模型对照组大鼠血清HA(hyaluronic acid,透明质酸)、LN(laminin,层粘连蛋白)、PCⅢ(procollagenⅢ,Ⅲ型前胶原)、Ⅳ-C(Ⅳ-collagen,Ⅳ型胶原)明显升高(P0.05);秋水仙碱组与大黄(?)虫丸组HA、LN、PCⅢ较模型对照组明显降低(P0.05);大黄(?)虫丸加味组HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ较模型对照组明显降低(P0.05)。6.大鼠肝组织MMP-1/TIMP-1的mRNA表达水平变化:与正常组相比,模型对照组MMP-1mRNA降低、TIMP-1mRNA升高(P0.05,P0.01);与模型对照组相比,大黄(?)虫丸组、大黄(?)虫丸加味组MMP-1mRNA有升高趋势、TIMP-1mRNA有降低趋势,其中大黄(?)虫丸加味组差异有显著统计学意义(P0.01)。7.大鼠肝组织MMP-1/TIMP-1蛋白含量变化:与正常组相比,模型对照组大鼠MMP-1降低,TIMP-1升高,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01);与模型组相比,大黄(?)虫丸组、大黄(?)虫丸加味组、秋水仙碱组TIMP-1有降低趋势,差异具有统计学意义(P0.05)。【结论】从中医络病学角度说明肝纤维化发生发展演变的基本过程是“毒损肝络”、“络虚邪留”导致肝络气郁血瘀,滞塞不通。动物实验证实猪血清能诱导大鼠出现免疫性肝纤维化的理化改变:肝功受损,纤维化增生,病理性损伤,MMP-1/TIMP-1失去平衡。也从现代医学角度证实大黄(?)虫丸联合黄芪、水红花子(即大黄(?)虫丸加味)能改善肝功能,减轻纤维化程度,减轻肝脏病理,调节MMP-1/TIMP-1的代谢紊乱,对肝纤维化具有确切的治疗作用。而其中的关键环节是对MMP-1/TIMP-1表达的调控作用,抑制肝细胞外基质沉积,促进其降解,从而拮抗肝纤维化。此实验从分子水平更好地阐明大黄(?)虫丸加味的调肝络机制。
【学位授予单位】:首都医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R285.5

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵庆华;史海立;刘静生;王正;王亚丽;;强肝软坚丸对肝纤维化大鼠肝组织中MMP、TIMP表达的影响[J];中医学报;2017年02期
2 刘旭东;梁真;赵晓芳;童汪霞;唐艳芳;;大黄蛰虫丸对肝星状细胞p38MAPK通路活化的影响[J];中西医结合肝病杂志;2016年06期
3 柯梦琼;高兴亮;高博;平大冰;陈龙全;;中医治疗肝纤维化的研究进展[J];湖北民族学院学报(医学版);2016年04期
4 乌云达来;萨仁高娃;;大黄蛰虫丸临床研究进展[J];世界最新医学信息文摘;2016年97期
5 李文新;车念聪;王金光;杜宇琼;刘晔;司远;赵晖;;大黄虫丸加黄芪、水红花子对拮抗大鼠肝纤维化作用的影响[J];中华中医药杂志;2016年12期
6 王金光;车念聪;李文新;杜宇琼;司远;刘晔;赵晖;;大黄虫丸加味对免疫性肝纤维化大鼠肝组织PDGF及PDGFR的影响[J];环球中医药;2016年10期
7 周晓蕾;吴春晓;陈燕鸿;;大黄蛰虫丸联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝纤维化的临床研究[J];岭南急诊医学杂志;2016年03期
8 徐文洋;鲁玉辉;吴若云;王心蕊;;虫类药与肝纤维化证治研究[J];光明中医;2016年07期
9 骆洁恒;邓锦伟;陈小梅;;大黄蛰虫丸联合贞芪扶正颗粒治疗乙型肝炎后肝硬化腹水疗效观察[J];新中医;2016年03期
10 廖宇;宋翊;;从痰瘀阻络论治肝纤维化肝硬化[J];四川中医;2016年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 戴琦;秦绪花;;血府逐瘀汤治疗肝纤维化从络病论治[A];江西省第四次中西医结合消化系统疾病学术交流会论文汇编[C];2011年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 杜一江;苟金平;;软肝抗纤汤联合恩替卡韦分散片治疗肝硬化肝纤维化临床研究[J];新中医;2017年09期
2 王朝阳;刘光伟;;鳖甲煎丸治疗早期肝硬化及并发症的研究进展[J];光明中医;2017年13期
3 杨婧;贾彦;王蔚;戚基萍;刘宏;代巧妹;;膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝脏组织硫氧还蛋白系统的影响[J];世界科学技术-中医药现代化;2017年04期
4 刘宇;王彦刚;;李佃贵教授运用角药治疗肝硬化经验[J];河北中医;2016年08期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周光德;赵景民;;不同病因致肝纤维化/肝硬化的病理特点[J];临床肝胆病杂志;2016年06期
2 王君;王贺勇;;大黄蛰虫丸配合西药治疗慢性肾功能衰竭疗效观察[J];山西中医;2016年05期
3 陈艳君;孙云春;黎勇夫;;大黄蛰虫丸对宫颈癌患者术后化疗的近期疗效影响[J];现代中西医结合杂志;2016年05期
4 司远;车念聪;杜宇琼;李文新;王金光;刘晔;;浅析“肝络病”概念与特点[J];环球中医药;2016年02期
5 陈静;张翠英;唐秀丽;;养肝清毒丸联合替比夫定治疗慢性乙型肝炎肝纤维化32例临床研究[J];云南中医中药杂志;2015年11期
6 李富龙;王宏伟;邓玉海;王晓素;;柔肝煎膏联合核苷类抗病毒药物对慢性乙型肝炎患者肝纤维化指标及生活质量的影响[J];上海中医药大学学报;2015年06期
7 宫嫚;辛绍杰;邹正升;李润东;徐庆会;韩宝英;于建国;于德航;司雁菱;王宪波;候爱画;李秀惠;陈菊梅;;复方鳖甲软肝片治疗慢性乙型肝炎患者对血清肝纤维化指标的影响[J];实用肝脏病杂志;2015年06期
8 王林;;珍珠茯苓汤治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的初步临床效果分析[J];中国实用医药;2015年31期
9 徐学刚;黄毓;黄玉娟;;益气活血解毒方治疗慢性病毒性乙型肝炎肝纤维化的临床研究[J];陕西中医;2015年11期
10 王文杰;;丹参强肝胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化疗效观察[J];临床医药文献电子杂志;2015年31期
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1 ;某些因素对大鼠胃肌电的影响[J];基础医学与临床;2001年S1期
2 陈同度,张昌颖;素食大鼠的贫血现象[J];营养学报;1957年04期
3 陈伟强;赵善广;;自制注射用大鼠固定装置[J];上海实验动物科学;1992年04期
4 肖柳英,林培英,冯昭明,张丹;不同周龄的SD大鼠生理、生化及体重的正常值测定[J];中药新药与临床药理;1996年03期
5 李淑云;简易大鼠灌胃器的制作[J];锦州医学院学报;2001年04期
6 杨明智,陈积圣;一种大鼠抓取与固定的新工具介绍[J];上海实验动物科学;2001年03期
7 戴英,陆群;复方H_(505)对Wistar大鼠外周血的血液流变学指标的影响[J];中国血液流变学杂志;2001年01期
8 韦应波,孙喜庆,曹新生,姚永杰,冯岱雅,杨长斌;+Gz暴露时间对大鼠记忆功能和行为的影响[J];航天医学与医学工程;2003年01期
9 吕学军,郭俊生,李敏,周利梅,张永娟;晕船大鼠体内铁含量的变化[J];中国职业医学;2003年04期
10 汤仁仙,王迎伟,王慧,周峰;201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎病变的影响[J];徐州医学院学报;2003年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 尹音;孙振宇;胡敏;李冬霞;;持续性高正加速度对大鼠颞颌关节损伤的作用[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
2 祝總骧;楊靜霞;鮑克琴;崔素英;文允鎰;鄭肖釗;紀豁然;杜如竹;;高血壓發病機制的研究 三、正常及高血壓大鼠組織及血漿中兒茶酚胺含量變化的初步觀察[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生理)[C];1964年
3 馬蒲生;王日宏;陳麗生;錢梓文;程治平;;自大鼠腎上腺靜脈取血的一些經驗(腎上腺靜脈血流速與皮質固酮含量之關係)[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生理)[C];1964年
4 林巳茏;张士俊;徐为人;王玉丽;;枸橼酸爱地那非在大鼠体内排泄状况的研究[A];中国药理学会制药工业专业委员会第十一届学术会议论文摘要汇编[C];2004年
5 谢文婷;朱婉儿;李婷;董逢泉;吴晶晶;陈芝芸;;柴胡加龙骨牡蛎汤对大鼠急性应激反应的影响[A];浙江省医学会心身医学分会成立大会暨2006年浙江省心身医学学术年会论文汇编[C];2006年
6 文文;赖国祥;郑和平;张亚彬;姚丽青;;反复铜绿假单胞菌感染诱导大鼠慢性阻塞性肺疾病模型的研究[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
7 张清民;吴青业;廖雪珍;梁荣辉;茹丽;;复方风湿宁注射液对SD大鼠腹腔注射给药长期毒性试验研究[A];中华中医药学会第十六届全国风湿病学术大会论文集[C];2012年
8 戴学栋;方超;戴晓丽;马玉奎;;SD大鼠被动皮肤过敏试验影响因素[A];中国药理学与毒理学杂志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年
9 朱东;陈塑寰;杨艳芳;董心;孙伟;程杰平;;悬吊和去势SD大鼠生化指标和胫骨压缩实验研究[A];第八届全国生物力学学术会议论文集[C];2006年
10 潘黎;李宏霞;李子轲;韦娜;卓衍蔷;王汉蓉;;地震对SD大鼠生殖过程的影响研究[A];中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 冯卫东;大鼠研究显示孕期压力或可代代相传[N];科技日报;2014年
2 奇 云;解读大鼠基因有助人类攻克疑难病症[N];大众科技报;2004年
3 张天行;克隆大鼠意义重大[N];中国医药报;2003年
4 本报特约撰稿人 陆志城;用大鼠还是用小鼠?[N];医药经济报;2004年
5 记者 蓝建中;日本研究:骨髓移植使大鼠血管“返老还童”[N];新华每日电讯;2010年
6 记者 姜澎;聪明大鼠 解密大脑记忆功能[N];文汇报;2009年
7 万姗姗 记者 王春;转基因“聪明大鼠”学得快记得牢[N];科技日报;2009年
8 记者 曹继军 颜维琦 通讯员 孙国根;大鼠基因功能图谱被成功绘制[N];光明日报;2014年
9 记者 白毅 通讯员 孙国根;大鼠基因功能图谱绘制成功[N];中国医药报;2014年
10 记者 孙国根;将大鼠基因的功能“对号入座”[N];健康报;2014年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨静;消癌解毒方干预W256移植瘤大鼠生存及血、尿代谢的研究[D];南京中医药大学;2015年
2 韩梅;大鼠前扣带皮层SIP30参与痛厌恶情绪反应的细胞分子机制[D];复旦大学;2011年
3 李丽红;卵巢雌激素剥夺对成年大鼠伤害性反应的影响及其机制探讨[D];复旦大学;2011年
4 李志远;瑞舒伐他汀对急性心肌梗死大鼠左心房交感神经重构的影响[D];山东大学;2015年
5 张文强;IL-13对大鼠佐剂性关节炎的作用及相关机制研究[D];山东大学;2015年
6 宋勇峰;促甲状腺激素调节肝脏胆固醇转化的机制研究[D];山东大学;2015年
7 沈夏锋;早期运动训练对大鼠重度颅脑外伤后脑功能的作用及其机制研究[D];复旦大学;2013年
8 韩海峰;十二指肠空肠旁路术对T2DM大鼠肝脏脂肪沉积的影响和机制研究[D];山东大学;2015年
9 黄新忠;Sirt1对5/6肾切除大鼠的保护作用及相关机制探讨[D];复旦大学;2012年
10 李倩;NALP1炎症小体在大鼠神经痛及痛情绪中的作用及电针缓解痛情绪作用观察[D];复旦大学;2014年
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1 李变芳;钙对铅致大鼠脑组织损伤的营养干预机制研究[D];山西农业大学;2015年
2 孟静;钙对染铅大鼠骨骼损伤干预机制的研究[D];山西农业大学;2015年
3 郑东;姜黄素对糖尿病大鼠海马神经元的作用研究[D];湖北科技学院;2015年
4 张敏丽;山楂叶总黄酮对大鼠糖尿病心肌病的保护作用及机制研究[D];湖北科技学院;2015年
5 董婷;甘草甜素对大鼠HAART药物心肌损伤的保护效应与机制[D];福建医科大学;2015年
6 张迪;不同途径移植人脐带间充质干细胞治疗糖尿病大鼠的实验研究[D];新乡医学院;2013年
7 刘波;靶向超声造影对GK大鼠肾脏血流灌注的实验研究[D];新乡医学院;2013年
8 王璐;α7nACh受体在孕期烟熏抑制新生大鼠RRDA中的作用[D];新乡医学院;2014年
9 文实;基于核磁共振的SD大鼠诱导的胰腺癌及上皮内瘤变组织水溶性萃取物代谢组学研究[D];福建医科大学;2015年
10 袁鑫;二甲双胍对链脲佐菌素所致大鼠认知功能障碍的作用研究[D];湖北科技学院;2015年
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