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《首都医科大学》 2017年
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通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾脏p38MAPK通路的影响

仝宇  
【摘要】:【目的】本研究通过体内体外实验探讨通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾组织与高糖培养肾小球系膜细胞的p38MAPK信号通路及细胞外基质FN、Col-Ⅳ的蛋白表达的影响,以部分阐明通心络用于临床中治疗糖尿病肾病的可能作用机制。【材料和方法】动物实验:采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠建立动物模型,检测通心络对其体重、肾重及肾功能等的影响。应用western blot技术观察各组小鼠肾组织中TGF-β1的蛋白表达水平;细胞外基质主要成分FN、Col-Ⅳ的蛋白表达水平;p38MAPK通路相关蛋白p38、P-p38蛋白表达水平。细胞实验:采用SV40 MES 13小鼠肾小球系膜细胞,高糖刺激模拟糖尿病状态。采用酶联免疫法试剂盒检测细胞培养上清液中FN、Col-Ⅳ蛋白表达水平;WB法检测系膜细胞中TGF-β1蛋白表达水平;p38MAPK通路相关蛋白p38、P-p38蛋白表达水平。【结果】1.与正常组小鼠比较,模型组空腹血糖,体重、肾重、肾重指数均增加(P(27)0.05)。与模型组小鼠比较,通心络和缬沙坦组小鼠体重、肾重减轻,肾重指数降低(P(27)0.05);空腹血糖无明显变化(P(29)0.05);通心络和缬沙坦组间无显著差异(P(29)0.05)。2.与正常组小鼠比较,模型组24h m ALB、SCr、Urea明显升高(P(27)0.05)。与模型组小鼠比较,通心络组和缬沙坦组小鼠的24h m ALB、SCr、Urea降低(P(27)0.05);通心络和缬沙坦两组间比较无统计学差异(P(29)0.05)。3.与正常组小鼠相比,模型组小鼠肾组织中FN、Col-Ⅳ、TGF-β1、P-p38蛋白表达显著增加(P(27)0.05)。与模型组小鼠相比,通心络和缬沙坦组肾组织的FN、Col-Ⅳ、TGF-β1、P-p38蛋白表达减少(P(27)0.05);通心络和缬沙坦组间比较无统计学意义(P(29)0.05)。4.与正常组相比,模型组细胞培养上清中FN、Col-Ⅳ蛋白显著增加(P(27)0.05)。与模型组相比,通心络和缬沙坦组细胞上清的FN、Col-Ⅳ蛋白表达减少(P(27)0.05);通心络和缬沙坦组间差异无统计学意义(P(29)0.05)。5.与正常组细胞相比,模型组TGF-β1、P-p38表达显著增加(P(27)0.05)。与模型组细胞相比,通心络和缬沙坦组TGF-β1、P-p38表达下降(P(27)0.05);通心络和缬沙坦组间差异无统计学意义(P(29)0.05)。【结论】1.通心络能够减少2型糖尿病KK-Ay小鼠蛋白尿,降低血肌酐、血尿素,改善肾脏功能。2.体内外实验证实通心络能够明显抑制2型糖尿病KK-Ay小鼠肾组织及肾小球系膜细胞FN,Col-Ⅳ的表达,可能减少细胞外基质成份积聚。3.体内外实验证实通心络可有效调控p38MAPK通路,减少p38的磷酸化,降低TGF-1的表达,可能减少细胞外基质成份积聚,抑制肾脏纤维化。
【学位授予单位】:首都医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R285.5

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